This content is Free Access.
Chapitres
- 00:05Introduction
- 00:49Split-and-Mix Synthesis of Mutagenic Primers
- 02:34Performing Compartmentalized In Vitro Transcription-translation Reaction
- 05:07Continued Processing of Libraries and Selection
- 07:20Results: Examples of Screening of NlaIV Variants for Sequence Specificity Alteration
- 08:16Conclusion
Ограничение эндонуклеазы с новой специфичностью последовательности может быть разработано из ферментов, распознающих частично вырожденную последовательность. Здесь мы предоставляем подробный протокол, который мы успешно использовали, чтобы изменить специфику последовательности фермента NlaIV. Ключевыми составляющими протокола являются разобщенности транскрипции/перевода и выбор вариантов с новой последовательностью.
