Journal
/
Biochimie
/
Expressão, purificação, cristalização e ensaios enzimáticos de proteínas contendo domínio de Fumarilacetoacetato de hidrolase
Journal JoVE
Biochimie
This content is Free Access.
Journal JoVE Biochimie
Expression, Purification, Crystallization, and Enzyme Assays of Fumarylacetoacetate Hydrolase Domain-Containing Proteins

Expressão, purificação, cristalização e ensaios enzimáticos de proteínas contendo domínio de Fumarilacetoacetato de hidrolase

23,511 Views

•

10:21 min

•

June 20, 2019

DOI:

10.3791/59729-v

DOI:
10.3791/59729-v

•

10:21 min
June 20, 2019

•

12 Views
, , , , , , , ,
1Research Institute for Biomedical Aging Research,University of Innsbruck Austria, 2Center for Molecular Biosciences Innsbruck (CMBI),University of Innsbruck Austria, 3Division of Genetic Epidemiology,Medical University of Innsbruck Austria, 4Faculty of Chemistry, Department of Organic Chemistry,University of Vienna Austria

Summary

Automatically generated

Expressão e purificação de proteínas contendo domínio de fumarilacetoacetato hidrolase é descrita com exemplos (expressão em E. coli, FPLC). As proteínas purificadas são utilizadas para a cristalização e produção de anticorpos e empregadas para ensaios enzimáticos. Os ensaios fotométricos selecionados são apresentados para exibir a multifuncionalidade de FAHD1 como oxaloacetato descarboxilase e acylpyruvate hydrolase.

Explore More Videos

ExpressionPurificationCrystallizationEnzyme AssaysFumarylacetoacetate HydrolaseFHD ProteinTCA CycleEnergy MetabolismMitochondriaCellular SenescenceIPTG InductionAffinity ChromatographyFPLCBL21-DE3 PLysS E. ColiLB AgarNZCYM Medium

Read Article

Cite this Article

Weiss, A. K. H., Holzknecht, M., Cappuccio, E., Dorigatti, I., Kreidl, K., Naschberger, A., Rupp, B., Gstach, H., Jansen-Dürr, P. Expression, Purification, Crystallization, and Enzyme Assays of Fumarylacetoacetate Hydrolase Domain-Containing Proteins. J. Vis. Exp. (148), e59729, doi:10.3791/59729 (2019).

Download .ris file

Copy

Share Video

.

Copy