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荧光显微镜竞争滴定法测定转录机-dna 结合感的高灵敏度
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High Sensitivity Measurement of Transcription Factor-DNA Binding Affinities by Competitive Titration Using Fluorescence Microscopy
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荧光显微镜竞争滴定法测定转录机-dna 结合感的高灵敏度

DOI:
10.3791/58763-v

•

06:38 min

•

February 07, 2019

•

, , , ,
1Gene Center and Department of Biochemistry, Center for Protein Science Munich (CIPSM),Ludwig-Maximilians-Universität München

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 01:00Oligomer Annealing
  • 01:45Gel Preparation
  • 03:35Addition of the Competitor DNA Solution and Image Acquisition
  • 04:41Competitive Titration Assay and the Fitting Procedure
  • 05:17Results: Determining TF-DNA Binding Affinities Using Fluorescence Microscopy
  • 06:07Conclusion

Summary

Traduction automatique

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在这里, 我们提出了一种新的方法来确定结合亲和力的平衡和解决具有高灵敏度的大尺度。这改进了转录因子-dna 结合的定量分析。该方法基于控制下的输送系统中的自动荧光各向异性测量。

Tags

Transcription Factor-DNA BindingFluorescence MicroscopyDissociation ConstantCompetitive TitrationAnisotropy MeasurementBinding AffinityProtein-DNA InteractionDNA AnnealingAgarose GelTitration PlateCalibration WellNile Blue Dye

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