Journal
/
/
Singel-steg rening av makromolekylära komplex använder RNA som bifogas Biotin och en foto-cleavable länkare
Journal JoVE
Biochimie
Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu.  Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Journal JoVE Biochimie
Single-step Purification of Macromolecular Complexes Using RNA Attached to Biotin and a Photo-cleavable Linker
DOI:

08:12 min

January 03, 2019

, ,

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 00:51Substrate Preparation
  • 01:28Complex Assembly
  • 02:14Immobilization of the RNA/protein Complexes on Streptavidin Beads
  • 04:00UV-Elution
  • 05:08Sample Analysis by Silver Staining Followed by Mass Spectrometry
  • 05:59Results: Analysis of UV-eluted Complexes
  • 07:36Conclusion

Summary

Traduction automatique

RNA och protein komplex renas med hjälp av botin-streptividin strategi elueras lösning under denatureringen förhållanden i en form som är olämpliga för ytterligare rening och funktionell analys. Här beskriver vi en ändring av denna strategi som utnyttjar en foto-cleavable linker i RNA och en mild UV-eluering steg, framställning av infödda och fullt fungerande RNA och protein komplex.

Vidéos Connexes

Read Article