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बायोटिन से जुड़ी आरएनए का उपयोग करके Macromolecular परिसरों का एकल-चरण शुद्धिकरण और एक फोटो-सट linker

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Single-step Purification of Macromolecular Complexes Using RNA Attached to Biotin and a Photo-cleavable Linker

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बायोटिन से जुड़ी आरएनए का उपयोग करके Macromolecular परिसरों का एकल-चरण शुद्धिकरण और एक फोटो-सट linker

DOI:

10.3791/58697-v

•

08:12 min

•

January 03, 2019

•

Aleksandra Skrajna, Xiao-Cui Yang, Zbigniew Dominski²

¹Integrative Program for Biological and Genome Sciences,University of North Carolina at Chapel Hill, ²Department of Biochemistry and Biophysics,University of North Carolina at Chapel Hill

Chapitres

00:04Titre
00:51Substrate Preparation
01:28Complex Assembly
02:14Immobilization of the RNA/protein Complexes on Streptavidin Beads
04:00UV-Elution
05:08Sample Analysis by Silver Staining Followed by Mass Spectrometry
05:59Results: Analysis of UV-eluted Complexes
07:36Conclusion

Summary

Traduction automatique

आरएनए/प्रोटीन परिसरों botin का उपयोग कर शुद्ध-streptavidin रणनीति आगे शोधन और कार्यात्मक विश्लेषण के लिए एक अनुपयुक्त रूप में denaturing शर्तों के तहत समाधान के लिए eluted हैं । यहां, हम इस रणनीति का एक संशोधन है कि एक फोटो-आरएनए में सट linker और एक सज्जन यूवी-रेफरेंस कदम का इस्तेमाल, देशी और पूरी तरह कार्यात्मक आरएनए उपज/

Tags

RNA Protein Complexes Single-step Purification Biotin Photo-cleavable Linker Mass Spectrometry T7 Generated RNA Adaptor Oligonucleotide Mouse Nuclear Extract EDTA Streptavidin Agarose Beads Binding Buffer Centrifugation Tube Rotation

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