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免疫沉淀法研究受体与酶的功能相互作用
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Journal JoVE Immunologie et infection
Co-immunoprecipitation Assay for Studying Functional Interactions Between Receptors and Enzymes
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免疫沉淀法研究受体与酶的功能相互作用

DOI:
10.3791/58433-v

•

09:40 min

•

September 28, 2018

•

, ,
1Pulmonary Department,The Chaim Sheba Medical Center, 2Columbia Center for Translational Immunology, Department of Medicine,Columbia University Medical Center

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 00:37Transfection of Cells
  • 01:54Promoting Phosphorylation in Transfection Cells
  • 02:40Immunoprecipitation
  • 06:13Phosphatase Activity Assay
  • 07:07SHP2 Western Blot Analysis
  • 08:16Results: Analysis of Co-immunoprecipitation Assay
  • 09:18Conclusion

Summary

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在这里, 我们提出了一个共同免疫沉淀的协议和一个在珠酶活性检测, 同时研究的具体蛋白质领域的血浆膜受体对酶的招募和酶活性。

Tags

Co-immunoprecipitationReceptor-enzyme InteractionCell SignalingProtein DomainsEnzymatic ActivationDMEM293-T CellsTransfectionGFP ExpressionPervanadatePhosphorylationPD-1Lysis BufferProtease InhibitorsSodium OrthovanadateImmunoprecipitation

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