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Exempt de calibration In Vitro la Quantification des protéines Homo-oligomérisation à l’aide d’instruments commerciaux et Open Source gratuit, logiciel d’analyse de luminosité

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Calibration-free In Vitro Quantification of Protein Homo-oligomerization Using Commercial Instrumentation and Free, Open Source Brightness Analysis Software

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Exempt de calibration In Vitro la Quantification des protéines Homo-oligomérisation à l’aide d’instruments commerciaux et Open Source gratuit, logiciel d’analyse de luminosité

DOI:

10.3791/58157-v

•

08:22 min

•

July 17, 2018

•

Rory Nolan, Luis A. Alvarez, Samuel C. Griffiths, Jonathan Elegheert, Christian Siebold, Sergi Padilla-Parra^2,3,4

¹Cellular Imaging Group, Wellcome Centre Human Genetics,University of Oxford, ²Division of Structural Biology, Wellcome Centre Human Genetics,University of Oxford, ³Dynamic Structural Virology Group,Biocruces Health Research Centre, ⁴IKERBASQUE,Basque Foundation for Science

Chapitres

00:04Titre
00:50FKBP12F36V-mVenus Purification
03:24Preparation of Multiwell Plate Array
04:19Calibration-free Confocal Acquisition
06:26Results: FKBP12 Dimerizes upon Addition of BB Dimerizer Drug
07:23Conclusion

Summary

Traduction automatique

Ce protocole décrit une approche sans étalonnage pour quantifier les protéines homo-oligomérisation in vitro basée sur la spectroscopie de fluorescence fluctuation en utilisant la lumière commerciale au microscope à balayage. Les paramètres d’acquisition correcte et les méthodes d’analyse sont affichés.

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