Vi præsenterer her, en detaljeret protokol for at differentiere humane pluripotente stamceller (hPSCs) i bugspytkirtlen/duodenum HOXD protein 1+ (PDX1+) celler for generation af pancreas lineages baseret på ikke-koloni type éncellelag vækst af adskilles enkelt celler. Denne metode er velegnet til producerer homogene hPSC-afledte celler, genmanipulation og screening.