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En protokol til produktion af Integrase-mangelfuld Lentiviral vektorer for CRISPR/Cas9-medieret gen Knockout i dividere celler
Journal JoVE
Génétique
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Journal JoVE Génétique
A Protocol for the Production of Integrase-deficient Lentiviral Vectors for CRISPR/Cas9-mediated Gene Knockout in Dividing Cells
DOI:

10:42 min

December 12, 2017

,

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 00:52Transfecting of HEK-293T Cells Using Calcium Phosphate
  • 02:19Harvesting Virus
  • 02:50Concentration of Viral Particles by Ultracentrifugation
  • 05:11Esimating of Viral Titers Using p24-enzyme-linked Immunosorbent Assay
  • 07:31Counting GFP-positive Cells
  • 08:25Results: Production and Validation of the Knockout-efficiency of Integrase-deficient Lentiviral-CRSPER/Cas9 Vector
  • 09:57Conclusion

Summary

Traduction automatique

Vi beskrive produktion strategien integrase-mangelfuld lentiviral vektorer (IDLVs) som køretøjer til at levere CRISPR/Cas9 til cellerne. Med en evne til at mægle, hurtig og robust gen redigering i celler, IDLVs præsentere et sikrere og lige så effektive vektor platform for gen levering i forhold til integrase-kompetente vektorer.

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