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Capture interactine d'ARNm à partir de protoplastes végétaux
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mRNA Interactome Capture from Plant Protoplasts
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Capture interactine d'ARNm à partir de protoplastes végétaux

DOI:
10.3791/56011-v

•

12:29 min

•

July 28, 2017

•

, , ,
1Department of Biology,KU Leuven

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:15In Vivo mRNA-protein Crosslinking by UV Irradiation
  • 02:38Protoplast Lysis Under Denaturing Conditions
  • 03:59mRNP Pull-down and Purification by Oligo-d(T)25 Beads
  • 08:14mRBP Concentration and Protein Assays
  • 10:04Results: Capture of UV-crosslinked mRNA-bound Proteins by Oligo-d(T)25 Beads
  • 11:53Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Ici, nous présentons un protocole de capture interactif appliqué aux protoplastes de mésophylle de la feuille d' Arabidopsis thaliana . Cette méthode repose de manière critique sur la réticulation UV in vivo et permet l'isolement et l'identification des protéines de liaison de l'ARNm de la plante à partir d'un environnement physiologique.

Tags

MRNA InteractomeMRNA-bound ProteomePlant ProtoplastsPost-transcriptional Gene RegulationUV CrosslinkingArabidopsis ThalianaLeaf Mesophyll ProtoplastsMMG SolutionCentrifugation

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