Journal
/
Chimie
/
Produktion af disulfid-stabiliserede transmembrane peptidkomplekser til strukturelle studier
Journal JoVE
Chimie
Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu.  Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Journal JoVE Chimie
Production of Disulfide-stabilized Transmembrane Peptide Complexes for Structural Studies

Produktion af disulfid-stabiliserede transmembrane peptidkomplekser til strukturelle studier

DOI:
10.3791/50141-v

•

12:05 min

•

March 06, 2013

•

, , , , ,
1Structural Biology Division,The Walter and Eliza Hall Institute of Medical Research, 2The University of Melbourne

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 02:06Inclusion Body Preparation and Nickel Matrix Binding
  • 03:55On-column Oxidative Crosslinking
  • 04:50TFA Elution and Quantitation
  • 05:52CNBr Digestion
  • 07:54Reversed-phase HPLC Purification of Disulfide-crosslinked Peptide Complexes
  • 09:06TrpLE fusions: Transmembrane Peptide Complexes Expressed in Bacteria
  • 11:19Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Biofysiske og biokemiske studier af samspillet mellem membran-embedded proteindomæner står over for mange tekniske udfordringer, hvoraf den første er at opnå passende undersøgelse materiale. I denne artikel beskrives en protokol til fremstilling og oprensning af disulfid-stabiliserede transmembrane peptidkomplekser, der er egnede til strukturel analyse ved opløsning kernemagnetisk resonans (NMR) og andre analytiske anvendelser.

Tags

Keywords: Disulfide-stabilizedTransmembrane Peptide ComplexesStructural StudiesMembrane ProteinsTM DomainsTM SignalingTM Peptide ComplexesHomo-dimericHetero-dimericStable Isotope LabelsNMRNon-natural Amino AcidsDisulfide-crosslinkedDetergentLipidMembrane-mimetic

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

check_url/fr/50141?article_type=v

Overfladepassivering for Single-molekyle Protein Studies
check_url/fr/50141?article_type=v

Steady-state, Pre-steady-state, og Single-omsætningen Kinetic måling for DNA glycosylase Activity
check_url/fr/50141?article_type=v

Structure and Coordination Determination of Peptide-metal Complexes Using 1D and 2D 1H NMR
check_url/fr/50141?article_type=v

Tyndtlagskromatografisk (TLC) Separations og Bioassays planteekstrakter til at identificere antimikrobielle forbindelser
check_url/fr/50141?article_type=v

Kapillarelektroforese til Monitor peptid podning på Chitosan Film i Real Time
check_url/fr/50141?article_type=v

Kontrolleret Photoredox Ring-åbning polymerisering af O- Carboxyanhydrides medieret af Ni/Zn komplekser
check_url/fr/50141?article_type=v

Forberedelse af stabile bicykliske Aziridinium ioner og deres Ring-åbning for syntese af Azaheterocycles
check_url/fr/50141?article_type=v

Nye teknikker til at observere strukturdynamik Photoresponsive flydende krystaller
check_url/fr/50141?article_type=v

Analysere Protein arkitekturer og Protein-Ligand komplekser af Integrativ strukturelle massespektrometri
check_url/fr/50141?article_type=v

Instrueret samling af elastin-lignende proteiner i definerede supramolekylære strukturer og cargo indkapsling in Vitro

Read Article