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सक्रिय उपकला सेल lysates से जीएसटी टैग उत्परिवर्ती रो प्रोटीन (जीएसटी RhoA (G17A)) का उपयोग रो - GEFs आत्मीयता वर्षा
Journal JoVE
Biologie
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Journal JoVE Biologie
Affinity Precipitation of Active Rho-GEFs Using a GST-tagged Mutant Rho Protein (GST-RhoA(G17A)) from Epithelial Cell Lysates

सक्रिय उपकला सेल lysates से जीएसटी टैग उत्परिवर्ती रो प्रोटीन (जीएसटी RhoA (G17A)) का उपयोग रो - GEFs आत्मीयता वर्षा

DOI:

11:28 min

March 31, 2012

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Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:46Transformation of E. coli with the pGEX-RhoA(G17A) Construct
  • 02:55Preparation of GST-RhoA(G17A) Beads
  • 07:50GEF Pulldown Assay with Nucleotide-free RhoA(G17A) Beads
  • 10:11Representative Pull Down Results
  • 11:03Conclusion

Summary

Traduction automatique

यहां प्रस्तुत पद्धति एक उत्परिवर्ती RhoA जीएसटी संलयन प्रोटीन है कि उच्च सक्रिय GEFs के लिए संबंध है का उपयोग करने द्वारा RhoA विशिष्ट सकल घरेलू उत्पाद (जीडीपी) / GTP संवर्धित कोशिकाओं में विनिमय कारक (GEFs) के सक्रियण का पालन करने के लिए एक परख का वर्णन करता है. GEFs सेल lysates, के पश्चिमी सोख्ता और densitometry द्वारा मात्रा से पता लगाया से उपजी है.

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