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Visualizing Proteine ​​und Makromolekulare Komplexe von Negative Stain EM: von Grid Vorbereitung auf Image Acquisition
Journal JoVE
Bio-ingénierie
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Journal JoVE Bio-ingénierie
Visualizing Proteins and Macromolecular Complexes by Negative Stain EM: from Grid Preparation to Image Acquisition
DOI:

08:01 min

December 22, 2011

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Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:16Making Carbon Coated EM Grids for Negative Staining EM
  • 02:28Carbon Coating Grids
  • 04:27Preparing Negative Stain EM Grids
  • 05:57Preparing an Electron Microscope
  • 07:07Electron Microscopy Images
  • 07:30Conclusion

Summary

Traduction automatique

Visualizing Protein-Proben von negativen Fleck-Elektronenmikroskopie (EM) hat sich zu einem beliebten Strukturanalyse Methode. Es ist für die quantitative Struktur-Analyse nützlich, wie zum Beispiel die Berechnung einer 3D-Rekonstruktion der Moleküle untersucht, und auch für qualitative Prüfung der Qualität von Protein-Präparationen. In diesem Artikel präsentieren wir detaillierte Protokolle für die Vorbereitung der EM-Gitter, Färbung der Probe und die Visualisierung der Probe in einem Elektronenmikroskop. Unerfahrene Benutzer können diese Protokolle einfach zu folgen und zu nutzen Negativfärbung EM als Routine-Test, zusätzlich zu anderen biochemischen Assays für die Bewertung ihrer Protein-Proben.

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