מאמר זה מתאר סדרה של שיטות למדידת יכולת הדיכוי של רחרוח משקאות אלכוהוליים על תחושת הצריבה המעוררת ווסאבי.
משחות הווסאבי המסחריות המשמשות בדרך כלל להכנת מזון מכילות תרכובת הומולוגית של איזותיוציאנטים כימו-סנסוריים (ITC) המעוררים תחושה מגרה בעת צריכתם. ההשפעה של רחרוח משקאות אלכוהוליים דיאטטיים על תחושת חריפות הווסאבי מעולם לא נחקרה. בעוד שרוב מחקרי ההערכה החושית מתמקדים במזון ומשקאות בודדים בנפרד, חסרים מחקרים על מחקר חוש הריח של רחרוח משקאות חריפים בזמן צריכת ווסאבי. כאן פותחה מתודולוגיה המשלבת שימוש במחקר התנהגותי של בעלי חיים ורשת עצבית קונבולוציונית לניתוח הבעות הפנים של עכברים כאשר הם מרחרחים בו זמנית משקאות חריפים וצורכים ווסאבי. התוצאות מראות כי מודל הלמידה העמוקה המיומן והמתוקף מזהה 29% מהתמונות המתארות טיפול משותף בווסאבי ובאלכוהול השייכים לקבוצת הוואסבי-שלילי למשקאות חריפים-חיוביים ללא צורך בסינון חומרי הדרכה מקדים. ניתוח סטטיסטי של ציוני סולם עווית עכברים המתקבלים מתמונות מסגרת הווידאו שנבחרו מגלה הבדל משמעותי (P < 0.01) בין נוכחות והיעדר משקאות חריפים. ממצא זה מצביע על כך שלמשקאות אלכוהוליים תזונתיים עשויה להיות השפעה פוחתת על תגובות הוואסבי בעכברים. מתודולוגיה קומבינטורית זו טומנת בחובה פוטנציאל לסינון תרכובת ITC פרטנית ולניתוחים חושיים של מרכיבי הרוח בעתיד. עם זאת, מחקר נוסף נדרש כדי לחקור את המנגנון הבסיסי של דיכוי אלכוהול של חריפות ווסאבי.
Wasabia japonica, הידוע בכינויו ווסאבי, זכה להכרה בהכנת מזון 1,2. החוויה החושית האינטנסיבית שהיא מעוררת בעת הצריכה, המאופיינת בדמעות, התעטשויות או שיעול, ידועה היטב. ניתן לייחס את החריפות הייחודית הזו של ווסאבי לתרכובת הומולוגית של איזותיוציאנטים כימו-סנסוריים (ITC). הם פיטוכימיקלים נדיפים של אורגנו-גופרית שניתן לסווג ל-ω-alkenyl ו-ω-methylthioalkyl isothiocyanates3. מבין תרכובות אלה, אליל איזותיוציאנט (AITC) הוא מוצר ITC הטבעי הנפוץ ביותר שנמצא בצמחים השייכים למשפחת המצליבים, כגון חזרת וחרדל4. משחות ווסאבי מסחריות מוכנות בדרך כלל מחזרת, מה שהופך את AITC לסמן כימי המשמש לבקרת איכות של מוצרים מסחריים אלה5.
שילוב משקאות אלכוהוליים דיאטטיים עם מנות עם ווסאבי יכול להיחשב דוגמה לנטייה תרבותית6. מבחינה סובייקטיבית, שילוב זה עשוי להשלים את החריפות והחום שבין הוואסבי לרוח, ולהעצים את החוויה הקולינרית הכוללת. הערכה התנהגותית איכותנית של בעלי חיים (QBA) היא גישה מתודולוגית מקיפה של בעלי חיים שלמים הבוחנת שינויים התנהגותיים בנבדקים בתגובה לגירויים חיצוניים קצרי טווח או ארוכי טווח באמצעות מונחים מספריים7. שיטה זו כוללת מבחני כאב, מבחנים מוטוריים, מבחני למידה וזיכרון, וכן מבחני רגש שתוכננו במיוחד עבור דגמי מכרסמים8. עם זאת, מחקרים שבדקו את ההערכה החושית הסינרגטית של חוש הריח יחד עם חוש הריח נותרו נדירים בספרות עד כה 9,10. רוב המחקרים על תחושה כימיתטית מוגבלים לבחינת צריכת מזון ומשקאות בודדיםבנפרד 11. כתוצאה מכך, קיים מחסור במחקר על האינטראקציה טעם-ריח הכרוכה בפעולת הרחרוח של משקאות חריפים בזמן צריכת ווסאבי.
מכיוון שתחושת הצריבה הנגרמת על ידי ווסאבי נחשבת לצורה של nociception12, הערכות התנהגותיות של בעלי חיים מתאימות היטב להערכת התגובות החושיות הנוסיספטיביות בחיות מכרסמים 8,13,14. שיטה להערכת nociception בעכברים, הידועה בשם ניקוד סולם עווית עכבר (MGS) פותחה על ידי Langford et al.15,16. שיטת מחקר התנהגותית זו היא גישת הערכה הקשורה לכאב, המסתמכת על ניתוח הבעות הפנים המוצגות על ידי עכברי הניסוי. מערך הניסוי פשוט, וכולל כלוב שקוף ו-2 מצלמות להקלטת וידאו. על ידי שילוב טכנולוגיות מתקדמות 17,18,19 ללכידת נתונים אוטומטית, ניתן להשיג מדדים התנהגותיים כמותיים ואיכותיים, המשפרים את רווחת בעלי החיים במהלך ניטור התנהגותי 20. כתוצאה מכך, ל- MGS יש פוטנציאל להיות מיושם בחקר ההשפעות של גירויים חיצוניים שונים על בעלי חיים באופן רצוף ואד ליביטום. עם זאת, תהליך הניקוד כולל רק כמה (פחות מ -10) תמונות מסגרת וידאו להערכה על ידי חברי הפאנל, ויש צורך בהכשרה מוקדמת. ניקוד מספר רב של תמונות לדוגמה יכול להיות עבודה רבה. כדי להתגבר על אתגר גוזל זמן זה, מספר מחקרים השתמשו בטכניקות למידת מכונה לחיזוי ציון MGS21,22. עם זאת, חשוב לציין כי MGS הוא מדד מתמשך. לכן, מודל סיווג רב-מעמדי יתאים יותר להערכת בעיה לוגית וקטגורית, כגון קביעה אם התמונות של עכברים בולעים ווסאבי ומרחרחים בו זמנית דומים לאלה של עכברים רגילים.
במחקר זה הוצעה מתודולוגיה לחקר האינטראקציה בין טעם לריח בעכברים. מתודולוגיה זו משלבת מחקרים התנהגותיים בבעלי חיים עם רשת עצבית קונבולוציונית (CNN) כדי לנתח את הבעות הפנים של נבדקי העכבר. שני עכברים נצפו שלוש פעמים בתנאי התנהגות רגילים, במהלך החוויה של נוסיספטציה הנגרמת על ידי ווסאבי ובזמן שרחרח משקאות חריפים בכלוב שתוכנן במיוחד. הבעות הפנים של העכברים הוקלטו בווידיאו, ותמונות המסגרת שנוצרו שימשו לאופטימיזציה של הארכיטקטורה של מודל למידה עמוקה (DL). לאחר מכן המודל אומת באמצעות מערך נתונים עצמאי של תמונות ונפרס כדי לסווג את התמונות שנרכשו מקבוצת הניסוי. כדי לקבוע את מידת דיכוי חריפות הוואסבי כאשר העכברים רחרחו בו זמנית משקאות חריפים במהלך צריכת הווסאבי, התובנות שסופקו על ידי בינה מלאכותית אוששו עוד יותר באמצעות אימות צולב עם שיטת ניתוח נתונים אחרת, ה- MGS קיבל ציון16.
השיטה המוצעת לחקר אינטראקציה בין טעם לריח בעבודה זו מבוססת על השיטה המקורית של קידוד התנהגותי להבעת פנים של כאב בעכברים, שפותחה על ידי Langford et al.16. מספר מאמרים שפורסמו לאחרונה הציגו את CNN למעקב אוטומטי אחר פני עכבר ולאחר מכן ניקוד MGS 21,26,27,28.<s…
The authors have nothing to disclose.
Z. Cai רוצה להכיר בתמיכה הכספית מקרן הצדקה Kwok Chung Bo Fun להקמת הקתדרה לניתוח סביבתי וביולוגי של Kwok Yat Wai.
Absolute ethanol (EtOH) | VWR Chemicals BDH | CAS# 64-17-5 | |
Acrylonitrile butadiene styrene bricks | Jiahuifeng Flagship Store | https://shop.paizi10.com/jiahuifeng/chanpin.html | |
Acrylonitrile butadiene styrene plates | Jiahuifeng Flagship Store | https://shop.paizi10.com/jiahuifeng/chanpin.html | |
Allyl isothiocyanate (AITC) | Sigma-Aldrich | CAS# 57-06-7 | |
Anhydrous dimethyl sulfoxide | Sigma-Aldrich | CAS# 67-68-5 | |
Chinese spirit | Yanghe Qingci | https://www.chinayanghe.com/article/45551.html | |
Commercial wasabi | S&B FOODS INC. | https://www.sbfoods-worldwide.com | |
Formic acid (FA) | VWR Chemicals BDH | CAS# 64-18-6 | |
GraphPad Prism 5 | GraphPad | https://www.graphpad.com | |
HPLC-grade acetonitrile (ACN) | VWR Chemicals BDH | CAS# 75-05-8 | |
HPLC-grade methanol (MeOH) | VWR Chemicals BDH | CAS# 67-56-1 | |
Microsoft Excel 2016 | Microsoft | https://www.microsoft.com | |
Microsoft PowerPoint 2016 | Microsoft | https://www.microsoft.com | |
Milli-Q water system | Millipore | https://www.merckmillipore.com | |
Mouse: ICR | Laboratory Animal Services Centre (The Chinese University of Hong Kong, Hong Kong, China) | N/A | |
Peanut butter | Skippy | https://www.peanutbutter.com/peanut-butter/creamy | |
Python v.3.10 | Python Software Foundation | https://www.python.org | |
Transparent acrylic plates | Taobao Store | https://item.taobao.com/item.htm?_u=32l3b7k63381&id=60996545797 0&spm=a1z09.2.0.0.77572e8dFPM EHU |
.