Ce protocole décrit la méthode de réduction de l’apport alimentaire en acide folique ou en choline chez les souris femelles avant la grossesse dans le but d’étudier l’impact de l’alimentation maternelle sur les résultats de santé de la progéniture.
L’alimentation maternelle pendant la grossesse et l’allaitement joue un rôle important dans le développement neurologique de la progéniture. Le métabolisme à un carbone (1C), qui s’articule autour de l’acide folique et de la choline, ainsi que d’autres vitamines B, joue un rôle clé lors de la fermeture du tube neural du fœtus en développement. Cependant, l’impact de ces carences nutritionnelles maternelles pendant la grossesse sur les résultats de santé de la progéniture après la naissance reste relativement indéfini. De plus, les carences alimentaires maternelles en acide folique ou en choline peuvent avoir un impact sur d’autres résultats de santé chez la progéniture, ce qui en fait un modèle précieux. Ce protocole vise à décrire la procédure à suivre pour induire une déficience du métabolisme 1C chez les souris femelles par des modifications alimentaires. Les femelles sont soumises à un régime alimentaire au sevrage, jusqu’à l’âge de 2 mois, pendant 4 à 6 semaines avant l’accouplement et restent au régime tout au long de la gestation et de l’allaitement. La progéniture de ces femelles peut être évaluée pour les résultats de santé. Les femelles peuvent être utilisées plusieurs fois pour générer une progéniture, et les tissus des femelles peuvent être collectés pour mesurer les métabolites 1C. Ce protocole donne un aperçu de la façon d’induire des carences alimentaires maternelles en acide folique ou en choline afin d’étudier les résultats de santé de la progéniture.
L’alimentation maternelle pendant la grossesse et l’allaitement joue un rôle essentiel dans le développement de la progéniture. Le métabolisme à un carbone (1C) est un réseau métabolique clé qui intègre les signaux nutritionnels à la biosynthèse, à l’homéostasie redox et à l’épigénétique. L’acide folique et la choline sont des composants centraux du 1C qui jouent un rôle important dans la fermeture du tube neural. Il est largement recommandé aux femmes de prendre des suppléments d’acide folique et de choline pendant leurs années de procréation1. Bien que le rôle critique de l’acide folique dans le développement du fœtus soit clairement établi, les mécanismes sous-jacents en jeu restent flous. Il est recommandé aux femmes en âge de migrer de prendre de l’acide folique avant de tomber enceintes, car la fermeture du tube neural se produit au cours du premier trimestre2. Les femmes enceintes qui présentent une carence en acide folique ou en d’autres composants du 1C, comme la choline, ont une incidence plus élevée de naissances avec des anomalies du tube neural en raison de la forte demande de synthèse de nucléotides et d’autres processus requis par le début de la période de gestation3.
L’impact à long terme des régimes maternels déficients en métabolisme 1C sur les résultats de santé de la progéniture est mal compris. Des recherches menées par nos laboratoires, ainsi que par d’autres, ont démontré que les régimes alimentaires maternels déficients en acide folique ou en choline ont effectivement un impact sur les résultats de santé de la progéniture après un AVC ischémiqueà l’aide de modèles précliniques 4,5,6. L’impact de l’alimentation maternelle a également été démontré dans des études cliniques où des volumes cérébraux plus petits et des niveaux de méthylation modifiés ont été décrits7. La théorie des origines développementales de la santé et de la maladie (DOHaD) suggère que les maladies chroniques prospectives sont programmées in utero 8,9, et que l’alimentation maternelle joue un rôle important.
Ce protocole est conçu pour décrire la méthode de modification de la consommation alimentaire de 1C chez les souris femelles avant la grossesse, dans le but d’examiner les effets de la nutrition maternelle sur les résultats de santé de la progéniture.
Lors de la mise en œuvre de ce protocole dans les laboratoires de recherche, il y a plusieurs notes importantes que les chercheurs doivent prendre en compte avant de commencer les expériences. Tout d’abord, dans la fabrication d’un régime alimentaire, il faut disposer d’un délai suffisant pour fabriquer le régime avant le début de l’étude expérimentale. Les délais de livraison peuvent varier d’une entreprise à l’autre, et l’expédition du régime doit également être prise en compte. Les souris f…
The authors have nothing to disclose.
Aucun
1.5 mL tubes | Eppendorf | ||
C57BL/6 Female Mice | Charles River | 27 | Mice can be bred in house as well. |
Choline Deficient Diet | Envigo | TD.06119 | |
Control Diet | Envigo | TD.190790 | |
EDTA tubes | |||
Folic Acid Deficient Diet | Envigo | TD.01546 | |
GraphPad prism | https://www.graphpad.com/features | ||
Housing for rodents | Lab Products, LLC | One CageVentilated Racks & Cages | |
Liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) | SCIEX, Framingham, MA | 5500 QTrap | |
Ultra-performance liquid chromatography (UPLC) | Shimadzu, Columbia, MD, USA | Nexera |