Acceso a la diferenciación temprana de células T CD4⁺ auxiliares foliculares específicas del virus en ratones infectados con LCMV agudo

Al encontrarse con diferentes patógenos o amenazas, las células T CD4⁺ ingenuas adaptan sus respuestas inmunitarias diferenciándose en varios subconjuntos de células T (T_H) auxiliares^{con funciones} especializadas. En el escenario de infección viral aguda, una gran parte de las células T CD4⁺ vírgenes se diferencian en células T auxiliares foliculares (T_FH) que proporcionan ayuda a las células B ^2,3. A diferencia de otros subconjuntos de células T_H CD4⁺ (por ejemplo, células T_H1, T_H2, T_H9 y T_H17), las células T_FH expresan un nivel sustancial de CXCR5, que es el receptor de quimiocinas para la quimiocina CXCL13 de las células B, lo que permite que las células T_FH migren a los folículos de las células B. En los folículos de las células B, las células T_FH ayudan a las células B afines a iniciar y mantener las reacciones del centro germinal, lo que permite una rápida producción de anticuerpos de alta afinidad y una memoria humoral a largo plazo ^2,3.

Tras la infección viral aguda, el compromiso temprano del destino de las células T_FH específicas del virus ocurre dentro de las 72 h ^4,5 y es controlado por el linfoma represor transcripcional de células B-6 (Bcl-6)^5,6,7,8, que actúa como el “regulador maestro” que gobierna las decisiones de destino de las células T_FH. La deficiencia de Bcl-6 reduce gravemente la diferenciación de las células T_FH, mientras que la expresión ectópica de Bcl-6 promueve sustancialmente el compromiso con el destino de las células T_FH. Además de Bcl-6, múltiples moléculas están involucradas en la instrucción del compromiso temprano del destino de las células T_FH. Los factores de transcripción TCF-1 y LEF-1 inician la diferenciación de las células T_FH a través de la inducción de Bcl-6 ^9,10,11. La inhibición de Blimp1, tanto por Bcl-6 como por TCF-1, es necesaria para el compromiso temprano del destino de las células T_FH ^11,12. STAT1 y STAT3 también son necesarios para la diferenciación temprana de las células T_FH ¹³. Además, las modificaciones epigenéticas por la histona metiltransferasa EZH2^14,15 y la m6A metiltransferasa METTL3¹⁶ ayudan a estabilizar los programas transcripcionales de las células T_FH (especialmente Bcl6 y Tcf7) y, por lo tanto, a preparar el compromiso temprano del destino de las células_{T FH}. Si bien se han logrado avances, incluidas las moléculas antes mencionadas y otras, resumidas en otra parte³, en la comprensión de las regulaciones transcripcionales y epigenéticas del compromiso temprano del destino de las células T_FH, las moléculas previamente desconocidas aún no se han aprendido.

En el modelo murino de infección por el virus de la coriomeningitis linfocítica aguda (LCMV), las células T CD4⁺ transgénicas TCR-transgénicas TCR transferidas adoptivamente, que reconocen específicamente el epítopo de la glicoproteína LCMV I-A^BGP_66-77, experimentan una diferenciación de células T_FH o T_H1 durante la infección viral. Este patrón de diferenciación de bifurcación T_FH/T_H1 apoya el avance del modelo de infección por SM/LCMV aguda en el estudio de la biología de las células T_FH específicas del virus. De hecho, el modelo de infección por SM/LCMV aguda se ha utilizado ampliamente en el campo de la investigación de células T_FH y ha desempeñado un papel crucial en los descubrimientos de hitos en la biología de las células T_FH. Esto incluye la identificación del mencionado Bcl-6 como el factor de transcripción que define el linaje de las células T_FH ^5,6, así como otros factores transcripcionales importantes (por ejemplo, Blimp-1⁶, TCF-1/LEF ^9,10,11, STAT1/STAT3¹³, STAT5¹⁷, KLF2¹⁸ y Itch¹⁹) que guían la diferenciación de las células T_FH, las regulaciones postranscripcionales ( por ejemplo, METTL3¹⁶ y miR-17~92²⁰) de la diferenciación de los linfocitos T_FH, la memoria y plasticidad de los linfocitos T_FH ^21,22 y las estrategias racionales de vacunación dirigidas a los linfocitos T_FH (p. ej., selenio²³).

El estudio actual describe métodos reproducibles para acceder al compromiso de destino temprano de las células T_FH específicas del virus, que incluyen (1) el establecimiento de un modelo de ratón de quimera SM infectado con LCMV agudo adecuado para acceder a las células T_FH diferenciadas tempranamente, (2) la realización de tinciones por citometría de flujo de moléculas relacionadas con las células T_FH diferenciadas tempranamente y (3) la realización de manipulación génica basada en vectores retrovirales en SM CD4⁺ Células T. Estos métodos serán útiles para los estudios que investigan el compromiso del destino temprano de las células T_FH específicas del virus.