Ce protocole fournit des informations techniques pour la reconstruction vasculaire à l’aide de la technique du brassard dans la transplantation hépatique orthotopique de souris.
La transplantation hépatique orthotopique de souris est une méthodologie efficace pour étudier les mécanismes sous-jacents de l’ischémie hépatique et des lésions de reperfusion. Cependant, les défis techniques constituent un obstacle à l’utilisation de ce précieux modèle expérimental et à la transmission de ces compétences à la prochaine génération. L’aspect le plus difficile de cette procédure est la reconstruction vasculaire, y compris la veine porte (PV), la veine cave inférieure infrahépatique (IHIVC) et la veine cave inférieure suprahépatique. L’utilisation de brassards en plastique, plutôt que de sutures, permet une reconstruction PV et IHIVC plus fluide. Les vaisseaux sont reconstruits en fixant un brassard fabriqué à partir d’un cathéter intraveineux à l’extrémité du vaisseau greffé et en interposant le brassard dans le vaisseau receveur. Les deux aspects les plus cruciaux sont de visualiser correctement la lumière interne du vaisseau et d’éviter l’utilisation d’une force excessive. Notre objectif est de fournir un aperçu technique des reconstructions vasculaires à l’aide de la technique du brassard en chirurgie du receveur. Ces conseils techniques pour la technique du brassard devraient aider les microchirurgiens à faciliter la reconstruction vasculaire et à faire avancer leurs recherches.
La transplantation hépatique orthotopique de souris (MOLT) est une méthode expérimentale efficace signalée pour la première fois en 19911. Ce modèle expérimental, qui utilise des souris génétiquement modifiées et divers réactifs de recherche, a joué un rôle central dans l’étude de l’ischémie chaude et froide et des lésions de reperfusion. Cependant, la grande complexité technique du modèle a entravé le développement d’une médecine de base pour la transplantation hépatique2. La MOLT comporte trois étapes principales : (1) le prélèvement du foie de la souris donneuse, (2) la chirurgie de la table arrière et (3) l’implantation du foie chez le receveur. Parmi ces procédures de receveur, l’anastomose vasculaire pose le plus grand défi. Alors que l’anastomose de la veine cave inférieure suprahépatique est généralement complétée par une couture à la main2, la veine cave inférieure infrahépatique (IHIVC) et la veine porte (PV) peuvent être reconstruites plus efficacement à l’aide de brassards en plastique au lieu de sutures cousues à la main.
La période anhépatique signifie l’intervalle entre l’ablation du foie natif du receveur et l’implantation du greffon. Pour garantir des résultats cohérents, il est impératif de limiter le temps anhépatique à moins de 20 min. Par conséquent, les études utilisant ce modèle ont été limitées à des institutions spécifiques 3,4,5,6,7,8,9. Parmi les différentes étapes de la MOLT, la réalisation d’une reconstruction PV et IHIVC en douceur est cruciale pour minimiser le temps anhépatique et assurer la réussite de la transplantation.
La reconstruction PV et IVC est généralement réalisée à l’aide de brassards vasculaires puisque la technique du brassard simplifie l’anastomose vasculaire par rapport aux sutures cousues à la main 2,5,8. La technique impliquée dans la préparation du brassard vasculaire et la fixation sécurisée du brassard a un impact significatif sur la complexité de la reconstruction vasculaire du receveur. Notre objectif est de fournir un guidage visuel détaillé pour de nombreux conseils techniques liés à la méthode du brassard, réduisant ainsi la courbe d’apprentissage. Ces clips vidéo permettront de bien comprendre comment fixer le brassard aux vaisseaux et reconstruire le PV et l’IHIVC pendant la chirurgie du receveur.
L’apprentissage de la reconstruction vasculaire est l’aspect le plus difficile de la réussite de la MOLT. La qualité du brassard influence considérablement la difficulté de la reconstruction, compte tenu de la petite taille de la souris5. Cet article fournit un protocole détaillé pour la préparation, la fixation et la reconstruction du brassard.
Bien qu’il n’y ait pas de différences majeures par rapport aux rapports précédents c…
The authors have nothing to disclose.
Ce travail a été soutenu par la recherche fondamentale 2022 JST (The Japanese Society for Transplantation).
16 G intravenous catheter | TERUMO | SR-FF2032 | IHIVC cuff |
20 G intravenous catheter | TERUMO | SR-FF1651 | PV cuff |
8-0 braid silk | Natsume Seisakusho | CR9-80B2 | 8-0 silk |
Belzer UW Cold Storage Solution | Astellas | Organ preservation fluid | |
Bulldog clamp | B BRAUN | FB329R | Bulldog clamp |
C57BL/6 mice | Oriental Bio Service | ||
Isoflurane inhalation solution | Viatris | Anesthesic | |
Micro Blunted Tips 0.1 mm x 0.06 mm | F.S.T | 11253-20 | Straight microforceps |
Micro Serrefine Clamp Applicator with Lock | F.S.T | 18056-14 | Vessel clip applicator |
Micro Serrefines | F.S.T | 18055-4 | Vessel clip |
No.11 Spare Blades | FEATHER Safety Razor | 11 | Blades |
Ophthalmic scissor, round handle | B BRAUN | FD103R | Microscissor |
Plastic rectangular-shaped container | Daiso | 10 cm long, 15 cm wide and 6 cm high | |
SuperGrip Tips | F.S.T | 00649-11 | Curved microforceps |
SZX7 | Olympus | SZX7 | Microscope |