Summary

Rutin Hayvancılık Prosedürlerini İyileştirmek için Laboratuvar Tavşanlarının Eğitimi

Published: February 16, 2024
doi:

Summary

Tavşanlarda rutin yetiştirme prosedürleri için olumlu pekiştirme içeren eğitim protokolleri geliştirilmiş ve tavşanlar haftalık genel muayenede eğitilen davranışları güvenilir bir şekilde gösterdikleri için başarılı oldukları kanıtlanmıştır. Tavşanları taşıma kutusuyla toplamak, geleneksel taşıma tekniğinden daha az caydırıcıydı.

Abstract

Deney ve rutin hayvancılık prosedürlerini kolaylaştırmak, hem hayvan refahını hem de bilimsel kaliteyi artırmak için laboratuvar hayvanları için caydırıcı olmayan taşıma ve eğitim teknikleri gereklidir. Clicker eğitimi, tavşanların genellikle onları kaldırma (yani yerden alınma) / kısıtlama (yani bir insanın kollarında tutulma) ile ilişkili stresli rutin yetiştirme prosedürlerini iyileştirmeleri için eğitim protokolleri geliştirmek için kullanıldı. On üç dişi Yeni Zelanda Beyaz tavşanı üç hafta boyunca eğitildi. Tüm tavşanlar önceden tanımlanmış hedef davranışlarını öğrendiler: hedef çubuğu takip ettiler, tartı ölçeğine atladılar, bir taşıma kutusuna girdiler ve ön pençelerini eğitmenin eline yerleştirirken şahlandılar. Buna ek olarak, on hayvan yerden oturan eğitmenin kucağına atladı ve eğiticinin kucağında otururken eğiticinin pençelerini yüzeyden kaldırmasına izin verdi. Bazı kişiler için, protokollerin ek geçici adımlarla uyarlanması gerekiyordu. Eğitimin sonunda tavşanlar, kısa ve uzun eğitim molalarından sonra bile beklenen hedef davranışlarını güvenilir bir şekilde gösterdiler. Birkaç istisna dışında, eğitmen dışında tanıdık bir kişi, tavşanlardan hedef davranışları ortaya çıkarabilir (genelleme), ancak genelleme için daha fazla seans gerekliydi. Gönüllü yaklaşım testinde, tavşanlar 1. denemede eğitici ile etkileşime girmeyi tercih ettiler, ancak 2. denemede eğitici ile olduğu kadar yabancı bir kişiyle de zaman geçirdiler. Davranışsal gözlemler, tavşanları protokolde anlatıldığı gibi, boyunlarının tırnağıyla dizginlemek ve kollarının üzerine kaldırmak yerine, taşıma kutusuyla kaldırmanın daha az caydırıcı olduğunu gösterdi. Sonuç olarak, eğitim protokolleri uygulanabilirdi ve laboratuvar hayvanı tesislerinde bir iyileştirme stratejisi olarak hizmet edebilirdi. Hayvan refahı adına, eğitim protokolleri mümkün olan her yerde uygulanmalıdır.

Introduction

2015 ve 2019 yılları arasında Avrupa Birliği’nde (ve Norveç’te) 49 milyondan fazla hayvan bilimsel amaçlarla kullanıldı; Bunların 1.745.037’si (% 3.5) tavşandı1. Tavşanlar çoğunlukla düzenleyici araştırmalar (örneğin, kalite kontrol, toksisite ve farmakoloji dahil diğer güvenlik testleri) ve biyolojik maddelerin (örneğin, kan bazlı ürünler) rutin üretimi için kullanılır2. Hayvan deneylerinin yerini hayvansız yöntemlerle değiştirmek için çaba sarf edilse de, bu amaçların bazıları için hayvanların kullanımı hala gereklidir. Bir hayvan deneyinin yeri doldurulamadığında, hayvan sayısını azaltmak ve acıyı en aza indirmek için deneysel, barınma ve hayvancılık koşullarını iyileştirmek çok önemlidir. Russel ve Burch bu stratejiyi 1959’da3R ilkesi (değiştir, azalt, rafine et) olarak tanımladılar 3 ve 2010’da bilimsel amaçlarla kullanılan laboratuvar hayvanlarının korunmasına ilişkin 2010/63/EU sayılı Direktifeuygulandı 4. Bazen 3R5’in ‘Külkedisi’ olarak adlandırılan arıtmanın rolü giderek daha fazla önem kazanmıştır. İkame ve azaltma, Direktifin hayvan deneylerinin tamamen yerini almaya yönelik nihai hedefine yönelik uzun vadeli stratejiler olsa da, iyileştirme, hayvan refahının derhal iyileştirilmesini sağlar5 ve bu da bilimsel kaliteyi iyileştirme potansiyeline sahiptir6. Arıtmanın temel parçaları, 2010/63/EU sayılı Direktifin Ek III’ünde belirtildiği gibi hayvanların taşınması ve eğitimidir. Direktif, hayvan tesislerinin türe, prosedüre ve proje4’e uyarlanmış laboratuvar hayvanları için alışkanlık ve eğitim programları tasarlamasını şart koşmaktadır. ETS No. 123’ün Ek A’sı, laboratuvar hayvanı personelinin “hayvanlarla konuşmak, idare etmek, eğitmek ve tımar etmek” için zaman harcadığını göstermektedir7.

Bazı taşıma prosedürleri, özellikle tavşanlar gibi karasal av hayvanları için strese neden olur. Örnekler, bir sağlık muayenesi veya deneysel prosedürler için köşeye sıkıştırılmak, kısıtlanmak (yani bir insan tarafından tutulmak, bir insanın kollarında tutulmak veya bir cihaz tarafından hareketsiz hale getirilmek) ve kaldırılmaktır (yani yerden alınmak)8. Evcil tavşanlara odaklanan bir anket, bunların %57-61’inin kaldırılırkenmücadele ettiğini 9,10 ve hatta bazılarının korkuyla ilgili saldırganlık (yani ısırma) gösterdiğini ortaya koydu11. Bu, nazik kullanım ve eğitim tekniklerine olan ihtiyacı vurgulamaktadır. Fareler gibi diğer küçük memeliler için nazik kullanım tekniklerinin kaygıyı azalttığı zaten gösterilmiştir12. Ayrıca, eğitimle birlikte nazik kullanım, farelerde stresi, kaygıyı ve depresyon benzeri davranışları azaltır13. Rhesus makaklarında ve şempanzelerde, stresle ilgili fizyolojik ölçümler, daha önce bir prosedür üzerinde eğitildiklerinde daha az etkilenmiştir14,15. Bir hayvanın eğitime gönüllü olarak katılmayı seçebilmesi durumunda, durumu aktif olarak meşgul edebileceği ve kontrol edebileceği, bunun da hayvanın refahını artırabileceği ve ayrıca daha sağlam ve güvenilir bilimsel verilere katkıda bulunabileceği varsayılabilir16.

Birçok hayvan eğitim prosedürü, edimsel koşullandırma ilkelerine, özellikle de olumlu pekiştirme ve şekillendirmekullanımına dayanır 17,18,19. Edimsel koşullanma, bir hayvanın daha sonra artırılabilen veya azaltılabilen davranışları ortaya çıkarmasını gerektirir20. Edimsel koşullanmayı tanımlamak için kullanılan dört yaygın olasılık vardır: olumlu ve olumsuz pekiştirme ile olumlu ve olumsuz ceza21,22. Tavşanlarda, bir kişi bir hayvanı belirli bir yerden uzaklaştırmak veya belirli bir yere doğru hareket ettirmek için yaklaştığında (istenmeyen uyaran) pozitif ceza kullanılır23. Muayene masasında bir tavşanın ele alınması bağlamında, negatif pekiştirme için bir örnek, tavşan hareketsiz kaldığında tavşanın vücudu üzerindeki baskının (istenmeyen uyaran) kaldırılmasıdır; Olumsuz cezaya bir örnek, tavşan mücadele etmeye başladığında bir yiyecek ödülünü (istenen uyaran) geri çekmektir. Hayvan eğitiminde ne olumlu/olumsuz ceza ne de olumsuz pekiştirme önerilmemektedir. Ceza, köpeklerde25 gösterildiği gibi sıkıntı gibi olumsuz duygusal etkilere24 neden olur. Bunun yerine, hayvanları eğitirken tercih edilen yöntem olumlu pekiştirme olmalıdır 25,26. Pozitif pekiştirme eğitimi (PRT), hayvanın istenen davranışı göstermesinden sonra arzu edilen bir uyaranın (örneğin bir yiyecek ödülü) sağlanması anlamına gelir, bu da hayvanın gelecekte istenen davranışı tekrar gösterme olasılığını artırır27. PRT genellikle şartlandırılmış bir pekiştirecin uygulanmasını içerir. Koşullu bir pekiştireç (ikincil pekiştireç) genellikle hayvanın koşulsuz bir pekiştireçle (birincil pekiştireç, örneğin yiyecek ödülü) ilişkilendirmeyi öğrendiği bir ses gibi nötr bir uyarandır.28 Hayvan istenen davranışı sergiledikten sonra, şartlandırılmış pekiştireç hemen sunulur ve ardından yiyecek ödülü26’nın sunumu yapılır. PRT’nin iyi bilinen bir örneği, bir tıklayıcının ikincil pekiştireç olarak bir tıklama üretmek için kullanıldığı tıklayıcı eğitimidir26.

Eğitim, bir eğitim protokolü tasarlanarak elde edilen öngörülebilir kalıpları takip etmelidir. Eğitim protokolü, bir hedef davranışa adım adım nasıl ulaşılabileceğini (yani davranışsal şekillendirme) açıklarken, her adım objektif kriterlerle tanımlanır ve kolayca gerçekleştirilmelidir26. Eğitim belirli bir protokolü takip ediyorsa, laboratuvar hayvanı personelinin hayvanların eğitimi ile dönüşümlü olarak çalışması mümkündür. Unutulmaması gereken önemli nokta, personelin öğrenme ve eğitim tekniklerinin ilkelerini doğru bir şekilde uygulayabilmesi için bilmesi gerektiğidir26. Hayvan eğitimi genellikle davranışsal şekillendirmeyi içerir. Elle davranışsal şekillendirme ilk kez 1940’ların başında Skinner ve meslektaşları tarafından kasıtlı olarak kullanılmıştır29. Buna karşılık, önceki çalışmalarında, Skinner daha çok “ardışık bir yaklaşım programını uygulamak için fiziksel çevrede küçük değişiklikler yapmaya”29 odaklandı. Scientific American’da yayınlanan bir makalede, bir davranışı pekiştirmenin, davranışın tekrarlanma olasılığını artırdığını ve bunun da “bir hayvanın davranışını neredeyse bir heykeltıraşın bir kil yığınını şekillendirdiği gibi şekillendirmeyi mümkün kıldığını” açıkladı.30. O zamandan beri, tutsak hayvanlar için şekillendirmenin önemi artmıştır 29,30,31,32. Şekillendirme protokollerinin çoğaltılması ve iyileştirilmesi için protokollerin sistematik ve objektif bir şekilde değerlendirilmesi çok önemlidir 33,34,35,36.

Pfaller-Sadovsky ve arkadaşları tarafından yakın zamanda yayınlanan bir sistematik inceleme ve meta-analiz, koşullu pekiştirmenin en sık atlarda ve köpeklerde çalışıldığını, ancak kediler, sığırlar, balıklar, keçiler ve insan olmayan primatların da araştırıldığını buldu37. Laboratuvar hayvanları biliminde PRT, insan olmayan primatlar 38,39,40 ve köpekler41,42 için yaygın olarak kullanılmaktadır. Ek olarak, domuzlar43, keçiler44 ve hatta fareler13 ve sıçanlar 45,46,47 gibi küçük memeliler laboratuvar ortamında bir tıklayıcı kullanılarak başarıyla eğitildi. Yazarların bildiği kadarıyla, laboratuvar tavşanları için İİT’nin kullanılmaya başlandığı henüz çok az rapor edilmiştir48; Birkaç on yıl önce yayınlanan mevcut hakemli literatür güncelliğini yitirmiştir ve modern etik araştırma kriterlerini karşılamamaktadır. Her ne kadar hakem denetiminden geçmemiş az sayıda bilgi, tavşanların PRT49 kullanılarak başarılı bir şekilde eğitilebileceğini öne sürse de, laboratuvar hayvanı tesislerinde barındırılan tavşanlar için uygun eğitim protokolleri hakkında bilgi eksikliği var gibi görünmektedir. Altta yatan nedenler değişkenlik gösterebilir. Örneğin, kullanılan eğitim teknikleri araştırma makalelerinde ayrıntılı olarak açıklanmayabilir veya veriler düzenleyici araştırmalar için üretilir ve bu nedenle yayınlanmaz. Ayrıca, fareler ve sıçanlar gibi diğer türler araştırmada daha sık kullanıldığından, tavşanlar arıtma araştırmalarının ana odak noktası olmayabilir. Tavşanlar stresi ve rahatsızlığı son derece iyi maskeleyebildiklerinden, ele alınırken olumsuz duygusal durumları genellikle tanınmayabilir. Bir tavşanın büyüklüğü, insanların bu hayvanları prosedürler için dizginlemesine izin verirken, insan olmayan primatlar gibi diğer türler, ciddi şekilde yaralanmadan benzer müdahaleler için ellerle tutulamayabilir50. Bununla birlikte, bu gerçekler laboratuvar tavşanları için PRT protokollerinin geliştirilmesini veya paylaşılmasını engellememelidir.

İİT’nin potansiyel yararları ile ilgili olarak, laboratuvar tavşanları için uygun eğitim protokolleri konusundaki bilgi boşluğunu doldurmak için ilk girişimlerde bulunulmuştur. Elleçleme, sağlık denetimleri ve tartma gibi rutin prosedürleri kolaylaştırmak için eğitim protokolleri geliştirildi ve bunların dişi Yeni Zelanda Beyaz tavşanları için fizibilitesi değerlendirildi. Eğitim protokollerinde açıklanan alternatif kullanım tekniğinin geleneksel kullanım tekniğinden daha az caydırıcı olup olmadığını ve eğitim protokollerinin iyileştirme önlemleri olarak hizmet edip edemeyeceğini değerlendirmek için karşılaştırmalar yapılmıştır. Şekil 1 , bu çalışmanın zaman çizelgesini göstermektedir.

Hayvan bakımı

On üç dişi Yeni Zelanda Beyaz tavşanı ticari kaynaklardan elde edildi (yaklaşık yedi haftalıkken hayvan tesisine varış). Hayvanlar, FELASA tavsiyelerinde51 listelenen tüm viral, bakteriyel ve parazitik patojenlerden arındırılmıştır. Mevcut protokolün adımları yerine getirilirken koruyucu giysi ve ekipmanlar (eldiven, maske, saç filesi) giyildi. Altı kişilik bir grup ve yedi hayvandan oluşan bir grup, sırasıyla 2,8 m × 2,8 m’lik (zemin muhafazası) bir zemin kaleminde bir araya getirildi. Zemin ince ve lapa lapa ahşap yatak malzemesi (otoklavlanmış) ile kaplandı. Ayrıca, yuvalama malzemesi ve kağıt yünü, yatak takımlarının üzerine serpiştirildi. Her biri iki açıklığı olan üç plastik ev (37 cm × 60 cm; yükseklik 30 cm) ve plastik bir tünel (uzunluk: 58 cm; çap: 16 cm) sığınak olarak hizmet etti. Ek olarak, ahşap kemirme blokları, saman ve söğüt topları ve topu hareket ettirirken düşen yiyecek peletleri ile doldurulmuş atıştırmalık topları gibi zenginleştirme öğeleri sağlandı. Tavşanların musluk suyuna, peletlenmiş yiyeceklere ve otoklavlanmış samana ve samana ücretsiz erişimi vardı. Gıda ve zenginleştirme ürünleri hakkında daha fazla bilgi Malzeme Tablosunda listelenmiştir. Hayvan odası perşembe günleri temizlenirdi.

Tavşanlar standart koşullar altında (oda sıcaklığı ve bağıl nem ortalama ± standart sapma olarak verilmiştir: 20.3 ± 0.4 °C ve %50 ± 5) 12:12 saatlik bir aydınlık:karanlık döngüsünde (ek gün ışığı insidansı ile yapay ışık) tutuldu. Tavşanları ortam seslerine alıştırmak için ışık fazının başlamasından 30 dakika önce yaklaşık 8 saat boyunca bir radyo açıldı.

Protocol

Hayvanların bakımı Berlin Eyalet İdaresi (“Landesamt für Gesundheit und Soziales”, izin numarası: ZH3 – Alman Federal Risk Değerlendirme Enstitüsü, Berlin) tarafından onaylanmıştır. Eğitim protokolleri, elleçleme, sağlık muayenesi ve tartma gibi prosedürleri iyileştirmek için rutin hayvancılık çerçevesinde geliştirilmiştir. Eğitim protokollerinin herhangi bir acı, ıstırap ya da zarara yol açmaması ve tüm gözlemlerin rutin hayvancılık bağlamında yapılması nedeniyle bu çalışma Avrupa mevzuatı gereği bir hayvan deneyi olarak kabul edilmemiştir. 1. Eğitim için genel şartlar NOT: Aşağıdaki noktalar, mevcut protokolden bağımsız olarak, hayvan eğitimi için genel olarak gereklidir. Tanımlama için hayvanları açıkça işaretleyin. Yüksek kaliteli bir ödüle sahip olduğunuzdan emin olun, örneğin çok lezzetli yiyecekler. Hedef davranışa, yani hayvanın göstermesi gereken istenen davranışa yönelik tüm adımları içeren eğitim planını tanımlayın.NOT: Hedef davranış adım adım şekillendirilirken, her adım objektif kriterlerle tanımlanır ve kolayca gerçekleştirilmelidir. Bir sonraki adıma geçmeden önce hayvanların eğitim adımlarının ‘ini mi yoksa 0’ünü mü gerçekleştirmesi gerektiğini tanımlayın. Belgeleri hazırlayın (örneğin, Ek Tablo 1). Acelesi varken hayvanları eğitmeyin ve tavırlara, ses tonuna ve hareket hızına dikkat edin, yani yumuşak ve sakin bir şekilde konuşun, yavaş ve öngörülü hareket edin. Önceki eğitimde eğitilen adımları test edin. Hayvanın genel sağlık durumu bozulduğunda ve/veya hayvan eğitmenle etkileşime girmekle ilgilenmediğinde bir hayvanı eğitmeyin. 2. Mevcut protokol için eğitim rutinleri NOT: Mevcut protokol için aşağıdaki eğitim rutinleri tanımlanmıştır. Antrenman alanını hayvan odasında/ağılında kurun (Şekil 2) ve antrenman yapılacak hedef davranışa bağlı olarak, tartı veya taşıma kutusunu (zemin 30 cm × 50 cm; kapı 27 cm × 25,5; kapakta 16 cm × 39 cm) bir açıklık ile) arenaya yerleştirin. “Tartı” ve “taşıma kutusu” hedef davranışları eğitilmeden önce tavşanları bu yeni nesnelerle tanıştırmak için teraziyi ve taşıma kutusunu arenanın dışına yerleştirin. Hedef davranışları için (6-9. adımlara bakın), adım 5.7’de açıklandığı gibi tavşanı eğitim alanına yönlendirin. Antrenman alanında oturmak için yere oturun veya alçak bir tabure/basamak kullanın. Hedef davranışları, aynı anda değil, protokolde açıklanan sırayla birbiri ardına eğitin. Bir hayvan art arda iki gün boyunca bir hedef davranışının bir adımını öğrenemezse bir istisna yapın – bu durumda, bir sonraki hedef davranışını aynı anda eğitin. Bir birey için eğitim sürecini kolaylaştırıyorsa, hedef davranışların sırasını değiştirin. Alışkanlık ve tıklama girişinden sonra, tüm hayvanları hedef davranışının 1. adımı olan “hedefi takip etme” konusunda eğitmeye başlayın (yani, hedef çubuğunun ucundaki top hedef olarak tanımlanır). Bireysel performanslarına bağlı olarak, bu gün farklı eğitim adımlarına ulaşabileceklerini unutmayın. İlerleyen günlerde hayvanların bireysel gelişimlerine göre eğitime devam edin. Hafta boyunca her iş günü için bir eğitim oturumu planlayın (örneğin, altı ila yedi hayvandan oluşan bir grup için yaklaşık 30 dakika).NOT: Eğitim seansı, eğitmen hayvan odasında/ağılında olduğunda ve eğitime başlamak için hazırlandığında başlar. Bir oturum, tavşanların hiçbiri eğitime katılmadığında (artık) veya tüm tavşanlar bu oturumda eğitilecek hedef davranışın son eğitim adımına ulaştığında sona erer. Her eğitim oturumuna protokolün son başarılı adımıyla başlayın. Bir oturum, hayvan başına en az bir veya daha fazla denemeden oluşur. Hayvandan belirli bir eğitim adımını gerçekleştirmesini isteyerek bir deneme başlatın (yani, tavşan burun/ağız ile hedefe dokunmayı öğrendikten sonra adım 3.1) ve hayvan eğitime katılmadığında (artık) veya hayvan eğitilecek hedef davranışın son eğitim adımına ulaştığında denemeyi sonlandırın. Eğitimin sonunda eğitim alanını açın ve tavşanı arenadan çıkarın; Ardından hedef çubuğunu (hedef tavana bakacak şekilde) ve ödül kasesini göğsün önünde tutun. Eğitimi besleme, temizlik, tedaviler veya deneysel prosedürlerden önce planlayın. Entegre bir tıklayıcıya sahip bir ödül kasesi (Şekil 3, Ek Kodlama Dosyası 1) ve bazı hedef davranışları için ek bir hedef çubuğu kullanın. Ödül kasesini lezzetli yiyeceklerle, örneğin ayçiçeği çekirdeği ve tahıl bazlı yiyecek arama ikramlarıyla doldurun.NOT: Tavşanlar yapraktır ve bu ödül örnekleri optimal değildir; Bununla birlikte, laboratuvar hayvanları tesisindeki hijyen kısıtlamaları nedeniyle, bu hayvanlar için mevcut en iyi alternatiflerdi. Mümkünse, yemek ödülü olarak taze otlar tercih edilmelidir. Bir ödülün yalnızca tavşan onu gerçekten tercih ederse bir ödül olduğunu unutmayın. Ödül kasesini her zaman aynı konumda, örneğin göğsün önünde tuttuğunuzdan emin olun ve ödül kasesini ancak tık sesinden sonra tavşanlara doğru hareket ettirmeye başlayın. “Şaha kalkma” ve “kucağa atlama” hedef davranışı dışında, hedef çubuğunu bir elinde, ödül kasesini diğer elinde tutun. Ödülü, istenen davranış doğru bir şekilde gösterildiğinde tavşanın burnunun/ağzının olduğu yerde sunun. Ödülü sunarken tavşanın sadece az miktarda yemek yemesine dikkat edin. Bir tavşan istenen davranışı beş denemelik bir blokta en az dört kez gösteriyorsa ( başarı oranı), bir sonraki adıma geçin. Bir hayvan bir sonraki adımı gerçekleştiremiyorsa (yani, adımı bir kereden fazla gerçekleştiremezse), protokolün önceki adımına geri dönün. Bir önceki adıma geri dönmek gerekiyorsa veya bir tavşan eğitime katılmıyorsa, eğitim protokollerini gözden geçirin (örneğin, daha küçük eğitim adımları tanımlayın), başka (daha lezzetli) başka bir yiyecek ödülü seçin veya eğiticinin eğitim becerilerini kontrol edin. Bir tavşan bir hedef davranışın son eğitim adımını doğru bir şekilde gerçekleştiriyorsa, bu tavşan için eğitim seanslarını aynı gün içinde bitirin. Dokümantasyon sayfasını (Ek Dosya 1), ayrıntılı eğitim protokollerini ve basitleştirilmiş eğitim protokollerini (Ek Dosya 2) yazdırın ve bunları bir panoya yapıştırın veya bir tablette açın. Her bir seansta tek tek hayvanlar tarafından ulaşılan eğitim adımlarını not etmek için dokümantasyon sayfasını kullanın. 3. Bağlamsal koşullandırma / alışkanlık NOT: Bağlamsal koşullandırma/alışkanlık seansları, eğitmen ve hayvan bakıcıları tarafından art arda beş gün boyunca (Pazartesi’den Cuma’ya) tavşan grubu başına yaklaşık 15 dakika süreyle günlük olarak gerçekleştirilir. Tavşanlarla yumuşak bir şekilde konuşun. Lezzetli yemek ödülleri sunun.NOT: Diyetteki ani değişikliklerin tavşanlarda sindirim sorunlarına neden olabileceğini unutmayın. Bu nedenle, yeni yiyecek ödülünü yavaşça tanıtın. Lezzetli yiyeceklerle dolu ödül kasesini tavşanlara doğru hareket ettirin ve ondan yemelerine izin verin. Tavşanları kısıtlamadan boynuna, omuzlarına, sırtına ve kıçına nazikçe dokunun. 4. Tıklayıcının tanıtılması NOT: Hedef davranışı: Antrenöre yaklaşın ve clic k’den sonra kaseden ödülü yiyin. Amaç, tavşanın yiyecek ödülünü tıklama ile ilişkilendirmesi, yani tavşanın tıklamadan sonra yiyecek ödülünü yemesidir. Tavşanın yaklaşmasına izin ver. Bir kez tıklayın ve ödül kasesini tavşana doğru hareket ettirin (tıkla ve tedavi et veya C ve T olarak adlandırılır). Adım 4.2’yi on kez tekrarlayın. Onuncu kez tıklarken, ödül sunulmadan önce bir saniye bekleyin ve tavşanın davranışını gözlemleyin.NOT: Hayvan, tıklamadan hemen sonra ödülü ararsa, ikincil pekiştirecin koşullandırılmasının başarılı olduğu varsayılabilir. 4.1.-4.3 adımlarını tekrarlayın. Ertesi gün, bir tavşan en az sekiz kez tıkladıktan sonra yiyeceği yemezse, ödül. 5. Hedefi takip etmek NOT: Hedef davranışı: Hedefi burun/ağız ile takip edin ve dokunun. Bölüm 6-9’daki hedef davranışlar, bölüm 5’te sunulan hedef davranışının modifikasyonlarıdır. Hedefi tavşanın burnuna/ağzına yakın bir yere yerleştirin.NOT: Hedef çubuğunun ucundaki top hedef olarak tanımlanır.Tavşan burun/ağız ile hedefe dokunduğunda C ve T.NOT: Tavşanın burnunun/ağzının, top dışında tanımlanmamış herhangi bir yerde çubuğa değmediğinden emin olun. Ödüllendirirken hedefi tavşanın görüş alanından çıkarın. Tavşan bu adımı beş seferden en az dördünde başarıyla gerçekleştirene kadar yukarıdaki tüm adımları beş kez tekrarlayın (başarı oranı% 80). Hedefi, tüm vücudu hareket ettirmeden baş hareketleriyle burun/ağız ile dokunulabilecek farklı bir noktaya yerleştirin.Tavşan burun/ağız ile hedefe dokunduğunda C ve T ve 5.1.2 ve 5.1.3 adımlarını izleyin. Hedefi tavşandan daha geniş bir mesafeye yerleştirin ve tavşanın ona doğru gerilmesine izin verin.Tavşan burun/ağız ile hedefe dokunduğunda C ve T ve 5.1.2 ve 5.1.3 adımlarını izleyin. Hedef ile tavşan arasındaki mesafeyi daha da artırın ve hayvanın hedefe ulaşmak için bir sıçrama yapmasını isteyin.Tavşan burun/ağız ile hedefe dokunduğunda C ve T ve 5.1.2 ve 5.1.3 adımlarını izleyin. Hedefi tavşanın burnunun/ağzının hemen önüne yerleştirin, böylece tavşan hedefe dokunabilir ve ardından hedefi yavaşça tavşandan uzaklaştırın. Tavşanın hedefi takip etmek için değişken sayıda atlama yapması gerektiğinden emin olun.NOT: Beş denemeden oluşan bir blokta, 1., 2., 3., 4. ve 5. kez tavşan sırasıyla 2, 1, 2, 3 ve 2 atlamadan sonra ödüllendirilir (ortalama olarak: 2 atlamadan sonra).Tavşanlar gerekli sayıda şerbetçiotu yaptığında ve 5.1.2 ve 5.1.3 adımlarını takip ettiğinde C ve T. Adım 5.5’i tekrarlayın ve hedefi iki nesne arasındaki koridordan geçirin.NOT: Bu adım için tünel gibi iki nesne birbirine paralel olarak yerleştirilir ve bir koridor oluşturur.Tavşanlar gerekli sayıda atlama yaptığında C ve T ve 5.1.2 ve 5.1.3 adımlarını izleyin. Adım 5.5’i tekrarlayın ve hedefi, tavşanın girmesi için eğitim alanına doğru hareket ettirin.Tavşanlar gerekli sayıda atlama yaptığında C ve T ve 5.1.2 ve 5.1.3 adımlarını izleyin. 6. Tartı NOT: Hedef davranışı: En az bir saniye tartı üzerinde kalın. Terazinin yüzeyi çok kaygansa, üstüne kaymaz bir ped konulabilir. Bununla birlikte, bazı tavşanlar pedi kemirme eğilimindedir. Tavşanı hedef çubukla adım 5.5’te anlatıldığı gibi tartıya doğru yönlendirin.Tavşan burun/ağız ile hedefe dokunduğunda C ve T. Ödüllendirirken hedefi tavşanın görüş alanından çıkarın. Tavşan bu adımı beş seferden en az dördü için başarıyla gerçekleştirene kadar yukarıda açıklanan tüm adımları beş kez tekrarlayın (başarı oranı% 80). Hedefi ölçeğin biraz üzerine hareket ettirin, böylece tavşan burun/ağız ile hedefe dokunmak için ön pençelerle üzerine basar.C ve T tuşlarına basın ve 6.1.2 ve 6.1.3 adımlarını izleyin. Hedefi, terazinin merkezinin biraz ötesine hareket ettirin, böylece tavşan ön pençeleriyle üzerine basar ve hedefe burun/ağız ile dokunmak için terazinin üzerine gerilir.C ve T tuşlarına basın ve 6.1.2 ve 6.1.3 adımlarını izleyin. Tavşan, burun/ağız ile hedefe dokunmak için ön ve arka pençeleriyle tartıya basacak şekilde hedefi ölçeğin merkezinin ötesine doğru hareket ettirin.C ve T tuşlarına basın ve 6.1.2 ve 6.1.3 adımlarını izleyin. Tavşanı 4.4’te anlatıldığı gibi tartıya yönlendirin. ve C ve T’den önce birkaç saniye bekleyin.NOT: Bu adımda, tartıda değişken bir süre oturduktan sonra tavşanı ödüllendirin. Beş denemeden oluşan bir blokta, 1., 2., 3., 4. ve 5. kez, tavşan sırasıyla 0.5, 1.0, 2.0, 0.5 ve 1.0 saniye sonra ödüllendirilir (ortalama: 1.2 sn). Tavşan bu süre zarfında hareketsiz kalırken, ağırlık tartıdan okunabilir. Tartı, ağırlığı dengelemek ve ölçmek için daha fazla zaman alırsa, tartıda hayvan oturma süresini artırın.C ve T tuşlarına basın ve 6.1.2 ve 6.1.3 adımlarını izleyin. 7. Taşıma kutusuna giriş NOT: Hedef davranışı: Taşıma kutusuna girme ve çıkma. Eğitim seansı için, kapağı (16 cm × 39 cm) olan ve tabanı kirli yatak malzemesi ile kaplanmış bir taşıma kutusu (zemin 30 cm × 50 cm; kapı 27 cm × 25,5 cm) kullanın. Tavşanı hedef çubukla adım 5.5’te anlatıldığı gibi kutuya doğru yönlendirin.Tavşan kutu girişinin önündeyken C ve T. Ödüllendirirken hedefi tavşanın görüş alanından çıkarın. Tavşan görevi beş seferden en az dördünde başarıyla gerçekleştirene kadar yukarıda açıklanan tüm adımları beş kez tekrarlayın (başarı oranı% 80). Hedef çubuğu kapak açıklığından tutun ve kutunun içine doğru hareket ettirin, böylece tavşanı ön pençelerle kutuya girmesi için motive edin.C ve T tuşlarına basın ve 7.1.2 ve 7.1.3 adımlarını izleyin. Adım 7.2’yi izleyin ve tavşanı kutuya yönlendirin (yani, tüm ön ve arka pençeler kutuya girdi).C ve T tuşlarına basın ve 7.1.2 ve 7.1.3 adımlarını izleyin. Adım 7.3’ü izleyin ve kutunun kapağını birkaç saniye kapatın. Ardından kapıyı tekrar açın.C ve T tuşlarına basın ve 7.1.2 ve 7.1.3 adımlarını izleyin. Adım 7.3’ü izleyin ve kutunun kapağını kapatın. Kutuyu dikkatlice biraz kaldırın (yani, yerden birkaç santimetre yukarıda). Kutuyu tekrar yere koyun ve kapıyı açın.C ve T tuşlarına basın ve 7.1.2 ve 7.1.3 adımlarını izleyin. Adım 7.5’i izleyin. Ardından tavşanı hedef çubukla kutudan çıkarın.C ve T tuşlarına basın ve 7.1.2 ve 7.1.3 adımlarını izleyin. 8. Yetiştirme NOT: Hedef davranışı: Şahlama sırasında ön pençeleri avucunuzun içine yerleştirin. Antrenman seansı için hem hedef çubuğu hem de ödül kasesini aynı elinizde tutun. Hedefi tavşanın başının üzerine yerleştirin, böylece tavşan burnunu yukarı doğru uzatarak tüm pençeleri yerde kalırken burun/ağız ile hedefe dokunur.C ve T. Ödüllendirirken hedefi tavşanın görüş alanından çıkarın. Tavşan bu adımı beş seferden en az dördü için başarıyla gerçekleştirene kadar yukarıda açıklanan tüm adımları beş kez tekrarlayın (başarı oranı% 80). Hedefi, adım 8.1’de açıklandığı gibi tavşanın başının üzerine yerleştirin. Tavşan burnunu yukarı doğru gerdikten sonra, tavşan ön pençelerini yerden kaldıracak ve burun/ağız ile hedefe dokunacak şekilde hedefi daha da yukarı doğru hareket ettirin.C ve T tuşlarına basın ve 8.1.2 ve 8.1.3 adımlarını izleyin.NOT: Tavşan 8.2’yi gerçekleştiremezse, 8.2’den sonra bir ara adım eklenebilir. Bunun için 8.2’yi takip edin ve ardından serbest elin avucuyla tavşanın ön pençelerine (palmar yüzeyi) yaklaşın ve dokunun. C ve T tuşlarına basın ve 8.1.2 ve 8.1.3 adımlarını izleyin. Serbest elin avucunu tavşanın önüne yerleştirin ve hedefi tavşanın başının üzerine getirin, böylece tavşan burun/ağız ile hedefe dokunmak için ön pençelerini elinin üzerine koyar.Bir saniye sonra C ve T tuşlarına basın ve 8.1.2 ve 8.1.3 adımlarını izleyin.NOT: Ön pençeler eğiticinin eline dayanırken, tavşanın karnı görsel olarak incelenebilir. 9. Turda atlamak NOT: Hedef davranışı: Antrenörün kucağına atlayın ve dokunulduğunda oturmaya devam edin. 9.5-9.9 adımları için, bir elin tavşana dokunması gerektiğinden, hem hedef çubuğu hem de ödül kasesini aynı elinizde tutun. Protokol adımı 5.5’te açıklandığı gibi tavşanı hedef çubukla eğiticinin yanına götürün.Tavşan burun/ağız ile hedefe dokunduğunda C ve T. Ödüllendirirken hedefi tavşanın görüş alanından çıkarın. Tavşan bu adımı beş seferden en az dördü için başarıyla gerçekleştirene kadar yukarıda açıklanan tüm adımları beş kez tekrarlayın (başarı oranı% 80). Hedefi eğiticinin bacaklarının üzerine hareket ettirin, böylece tavşan burun/ağız ile hedefe dokunmak için ön pençeleri bacakların üzerine koyar.C ve T tuşlarına basın ve 9.1.2 ve 9.1.3 adımlarını izleyin. Hedefi bacakların üzerine ve tavşandan biraz daha uzağa hareket ettirin, böylece tavşan ön pençelerini bacakların üzerine koyar ve burun/ağız ile hedefe dokunmak için öne doğru uzanır.C ve T tuşlarına basın ve 9.1.2 ve 9.1.3 adımlarını izleyin.NOT: Tavşan 9.4’ü gerçekleştiremezse, 9.3’ten sonra bir ara adım eklenebilir. Bunun için adım 9.3’ü izleyin ve ardından tavşanı ödül kasesiyle birlikte kucağa çekin. Tavşan dört pençesini de kucağa koyduğunda, C ve T ve 9.1.2 ve 9.1.3 adımlarını izleyin. Hedefi bacakların üzerine ve hatta tavşandan daha da uzağa hareket ettirin, böylece tavşan burun/ağız ile hedefe dokunmak için kucağa atlar.C ve T tuşlarına basın ve 9.1.2 ve 9.1.3 adımlarını izleyin. Adım 9.4’ü izleyin. Ve tavşan kucağında otururken tavşanı serbest el ile kraniyalden kaudal’a (omuzdan başlayarak) dikkatlice okşayın.C ve T tuşlarına basın ve 9.1.2 ve 9.1.3 adımlarını izleyin. Adım 9.4’ü izleyin ve tavşan kucağında otururken serbest elinizle tavşanın kulaklarını kraniyalden kaudal’e dikkatlice okşayın.C ve T tuşlarına basın ve 9.1.2 ve 9.1.3 adımlarını izleyin. Adım 9.4’ü izleyin. ve kulakları görsel olarak incelemek için tavşanın kulaklarından birini nazikçe kavrayın.C ve T tuşlarına basın ve 9.1.2 ve 9.1.3 adımlarını izleyin. Adım 9.4’ü izleyin. ve tavşan kucağında otururken serbest elinizle ön veya arka pençeyi okşayın.NOT: Tavşanın sağ vücut tarafı antrenöre doğru ve sol vücut tarafı antrenörden uzağa bakıyorsa, sol pençelere hafifçe dokunulabilir (ve tam tersi). Her iki tarafı da dönüşümlü olarak eğittiğinizden emin olun.C ve T tuşlarına basın ve 9.1.2 ve 9.1.3 adımlarını izleyin. Adım 9.4’ü izleyin. Ve tavşan kucağında otururken serbest elinizle bir ön pençeyi veya arka pençeyi dikkatlice kaldırın.NOT: Pençeler kaldırıldığında pençeler incelenebilir. Her iki tarafı da dönüşümlü olarak eğittiğinizden emin olun.C ve T tuşlarına basın ve 9.1.2 ve 9.1.3 adımlarını izleyin.

Representative Results

İlerleyen bölümlerde, temsili sonuçlarla birlikte protokolün ötesine geçen materyal ve yöntemler hakkında bilgi verilmektedir. İstatistik Yukarıda belirtilen protokolden elde edilen veriler elektronik tablolarda saklanmış ve gelişmiş istatistiksel analiz için yazılım kullanılarak analiz edilmiştir (Malzeme Tablosu). Sürekli parametreler için normallik testleri (histogramların ve qq-grafiklerinin görsel olarak incelenmesi, ortalama, standart sapma ve medyanın karşılaştırılması) gerçekleştirildi. İstemli yaklaşım testinde incelenen parametreler arasındaki farklılıklar (eğitici ve tanıdık olmayan kişi ile etkileşim süresi, ön pati-bacak dokunuşları) Wilcoxon işaretli sıralar testi kullanılarak analiz edilmiştir. Taşıma teknikleri arasındaki farklar ya Wilcoxon işaretli sıra testi ya da McNemar testi (ikili ise) kullanılarak analiz edildi. Farklılıklar p < 0.05'te anlamlı kabul edildi. Wilcoxon işaretli sıra testini kullanırken, farklılıkların dağılımının histogramın görsel incelemesine göre simetrik olması gerekiyordu. Çalışma keşif amaçlıydı. Tavşanların “taşıma cihazları” ile etkileşime girdiği süreye dayalı güç analizi, çalışmadan sonra (Wilcoxon işaretli sıra testi; güç ≥ 0.999) G * Power (sürüm 3.1.9.7) kullanılarak gerçekleştirildi52. Alışkanlık # 4 ve # 10 dışındaki tüm tavşanlar ödül kasesinden yiyecek yuttu ve tüm alışkanlık seanslarında eğitmenin onlara dokunmasına izin verdi. Tavşan #4, 1. seansta yemek ödülünü kabul etmedi, ancak 2. seansta ödül kasesinden dört kez yedi. Bununla birlikte, ödül alım miktarı daha sonraki seanslarda arttı ve tavşana da dokunulabilir. Tavşan #10 ayrıca eğitmene ve yiyecek ödülüne alışmak için daha fazla zamana ihtiyaç duydu. İlk seansta tavşan, 5 dakika sonra eğiticiden gelen yiyecek ödülünü kabul etti ancak dokunulamadı. 2. oturumda ise yemeğe ilgi gözlenmedi. Ancak sonraki oturumlarda tavşan #10 hem yiyecek ödüllerini hem de dokunuşları kabul etti. Tıklayıcının tanıtımı On üç tavşandan on ikisi bir günde protokol bölüm 4’ü başarıyla tamamladı ve bu eğitim oturumunda yiyecek ödülünü (birincil pekiştirici) tıklama (ikincil pekiştirici) ile ilişkilendirdi. İlişkilendirme, tıklama onuncu kez sunulduktan sonra tavşanların davranışları gözlemlenerek test edildi. Bir hayvan tıklamadan hemen sonra ödülü ararken, tavşanın birincil pekiştireç ile ikincil pekiştireç arasında ilişki kurduğu varsayılmıştır. Tavşan #4, 1. gündeki tıklamadan sonra yiyecek ödülünü yemedi. Tavşan #4’ün tıklamayı ve yiyecek ödülünü başarılı bir şekilde ilişkilendirmesi bir gün daha uzun sürdü (yani iki gün). Hedefin peşinden gitmek Tablo 1 , tavşanlara protokollerin hedef davranışlarını öğretmek için gereken eğitim oturumlarının sayısını (medyan, 25. yüzdelik dilim ve 75. yüzdelik dilim olarak verilir) vermektedir. Tavşanların hedef çubuğu eğitim alanına kadar takip etmeleri 2 eğitim seansı (medyan) aldı (Tablo 1). Tüm tavşanlar bu hedef davranışın son adımına (5.7) ulaştı. Tavşan #4 ve tavşan #7, hedef çubuğu eğitim alanına girmeden önce sırasıyla 7 ve 8 eğitim seansına ihtiyaç duydu. Tavşan #7 adım 5.4’ü tamamlayamadığından ve hedef çubuğu takip etmek için bir sıçrama yapmadığından, adım 5.3’ten sonra protokole ek bir eğitim adımı (5.3+) uygulandı. Adım 5.3+’da, hedef çubuk tavşandan 5.3’e göre daha geniş bir mesafeye yerleştirildi ve tavşanın tavşana doğru farklı yönlerde gerilmesi gerekiyordu, ancak hedef çubuğa zıplamadan hala ulaşılabilirdi. Tavşan #4, adım 5.5 ile ilgili sorunlar yaşadı ve değişken sayıda atlama için burnun/ağzın hemen önüne yerleştirilen hedef çubuğu takip edemedi. Bu nedenle, protokole ek bir adım 5.4+ eklendi. Bu durumda, hedef çubuk tavşanın burnunun/ağzının hemen önüne yerleştirildi ve daha sonra tavşanın bir kez zıplamasını gerektirecek şekilde farklı yönlere hareket ettirildi. Aynı ek adım, tavşan #7 için de başarıyla kullanıldı. Ek eğitim adımlarını en az başarı oranı ile tamamladıktan sonra aşağıdaki adımlarla devam edebildiler. Tartım Tavşanlar, adım 6.5’i gerçekleştirene kadar (yani, değişken bir süre boyunca tartıda kalmak) 1 eğitim seansına (medyan) ihtiyaç duydular (Tablo 1). Tüm tavşanlar bu hedef davranışın son basamağına (6.5) ulaştı. Taşıma kutusuna giriş Tavşanlar, 2 eğitim seansı (medyan) içinde 7.1’den 7.6’ya kadar olan tüm adımları (yani, kaldırdıktan sonra taşıma kutusuna girme ve çıkma) başarıyla gerçekleştirdiler (Tablo 1). Tüm tavşanlar bu hedef davranışın son basamağına (7.6) ulaştı. Tavşan #2 ve #3 ilk kez adım 7.6’yı başarıyla gerçekleştirdiklerinde, bu adımı tekrarlamak için taşıma kutusuna tekrar girmek istemediler. Bu nedenle, adım 7.5+ oluşturuldu: hayvan hedef çubuğu kutuya doğru takip ettikten sonra, ödül kasesi kapak açıklığından tutuldu ve hayvan kutunun içine çekildi. Tavşan kutuya girdikten sonra kapı kapatıldı ve kutu dikkatlice kaldırıldı. Kutuyu tekrar yere koyduktan sonra kapı açıldı ve tavşan hedef çubukla kutudan dışarı çıkarıldı. Her iki hayvan da en az 4 kez adım 7.5+’yı gerçekleştirmeyi başardı ve ardından ertesi gün adım 7.6’yı gerçekleştirdi. Yetiştirme Tavşanlar adım 8.3’ü başarıyla tamamlayana kadar 1 eğitim seansı (medyan) gerekliydi (yani, ön pençeleri eğiticinin eline yerleştirme) (Tablo 1). 13 tavşandan 11’i (yani #3 ve #7 hariç tümü) adım 8.3’ü gerçekleştiremediğinden, bu hayvanlar için 8.2’den sonra ek bir eğitim adımı 8.2+ tanımlanmıştır. Adım 8.2+’da, hedef çubuk tavşanın başının üzerine taşındı, böylece tavşan ön pençelerini yerden kaldırdı ve burun/ağız ile hedefe dokundu. Tavşan hedefe dokunurken, eğitmen serbest elinin avucuyla ön pençelere (palmar yüzeyi) yaklaştı ve dokundu. Beş denemeden en az dördünde adım 8.2+ başarıyla gerçekleştirildikten sonra, adım 8.3 tekrar eğitildi ve tamamlandı. Turda atlama Tavşanları adım 9.1’de eğitmek için 2.5 eğitim seansı (medyan) gerekliydi. 9.9’a kadar. (Tablo 1). On tavşan son adım olan 9.9’a ulaşmayı başardı (yani, eğitmenin kucağında otururken pençelerine dokunulmasını kabul etmek). Tavşan #4 sadece 9.2 adımına ulaştı (yani, ön pençelerini eğitmenin bacaklarına yerleştirmek) ve tavşan #10 9.3 adımına ulaştı (yani, eğitmenin kucağına atlamak). Tavşan #7, 9.3 adımından sonra ek bir ara adım olan 9.3+ adımına ulaştı. Bu durumda, tavşan ön pençeleri adım 9.2’de anlatıldığı gibi eğitmenin bacaklarına yerleştirdi ve daha sonra eğitmenin kucağındaki ödül kasesi ile çekildi. Dört pençenin tamamı antrenörün kucağına yerleştirildikten sonra, tıklama ve ödül sunuldu. Bu adım, aşağıdaki adımların gerçekleştirilmesini kolaylaştırmak için sekiz tavşan için protokole başarıyla eklendi. Genelleme Tavşanların, hedef davranışları gerçekleştirmek için eğitilen ipuçlarını eğiticiden başka kişilerle genelleştirip genelleştirmediğini değerlendirmek için, tavşanlara aşina olan ancak tıklama eğitiminde çok az deneyimi olan bir dişi hayvan bakıcısı, tavşanlardan eğitilmiş hedef davranışları “tartma”, “taşıma kutusuna girme”, “yetiştirme” ve “kucakta atlama” işlemlerini gerçekleştirmelerini istedi. Bir tavşan daha önce “kucakta atlamanın” son adımını öğrenmediyse, son başarılı eğitim adımı gösterilmelidir. Oturumlar, 3 haftalık eğitimin tamamlanmasından sonra art arda beş gün boyunca gerçekleştirilmiştir (Şekil 1). Hayvan bakıcısı 1. seanstan önce eğitim protokollerini okudu. 1. oturumun başında, eğitmen tüm hedef davranışların kısa bir gösterimini yaptı. Daha sonra kalemde kaldı, oturumlar sırasında talimatlar verdi ve tavşanların hedef davranışlarının hangi adımını sergilediğini belgeledi. Bir tavşan belirli bir adımı gösteremezse, hayvan bakıcısına protokoldeki bir önceki adıma geri dönmesi talimatı verildi. Tavşan #4 dışındaki tüm tavşanlar sırasıyla 1 seans, 2 seans ve 2 seanstan sonra “tartma”, “taşıma kutusuna girme” ve “yetiştirme” (medyan olarak verilen veriler) hedef davranışlarını gerçekleştirdiler (Tablo 2). Tavşan #4 bu hedef davranışların herhangi bir adımını göstermeye istekli değildi. “Turda atlamanın” son adımını gösterebilen on hayvandan sekizi (9.9) bu davranışı 3 seanstan sonra gösterdi (medyan). Tavşan #3 ve #11 daha önce “kucakta zıplamanın” son adımını (9.9) öğrenmiş olsalar da, hayvan bakıcısıyla sadece 9.3 adımını gösterdiler. Tavşan #4, #7 ve #10, eğiticiyle aynı adımı gösterdi (9.2, 9.3+ ve 9.3). 1 haftalık eğitim molaları sonrası hedef davranışların performansı Hayvanların “tartma”, “taşıma kutusuna girme”, “yetiştirme” ve “kucakta atlama” gibi son adımları tutup tutamayacaklarını test etmek için, eğitmen genelleme seanslarından bir hafta ve iki hafta sonra hedef davranışları aldı (Şekil 1). Bu molalar sırasında hayvanlar eğitilmedi ve herhangi bir ödül almadı. Her iki zaman noktasında da, tüm tavşanlar önceki 3 haftalık eğitimde öğrendikleri “tartma” (6.5), “taşıma kutusuna girme” (7.6) ve “yetiştirme” (8.3) gibi son adımları gerçekleştirebildiler. “Turda atlamanın” (9.9) son adımını öğrenen hayvanlar (n = 10) bu davranışı her iki zaman noktasında da gösterdi; Bu hedef davranışının son basamağını öğrenmeyenler (n=3) ilk 1 haftalık aradan sonra daha önce ulaştıkları son basamağı (tavşan #4: adım 9.2; tavşan #7: adım 9.3+, tavşan #10: adım 9.3) gösterebilmişlerdir. İkinci 1 haftalık aradan sonra, bu üç tavşan bir önceki hafta ile aynı adımları gösterdi ancak sonraki adımları da gerçekleştirmeleri istendi ve 9.9 adımına ulaştı. Yaklaşık 8,5 haftalık bir eğitim molasından sonra hedef davranışların performansı Hayvanlar yaklaşık 7.5 hafta (# 1-5, # 13) veya 9.5 hafta (# 6-12) bir eğitim molası verdikten sonra, hedef davranışları tekrar hatırlandı. Tüm hayvanlar “tartma” (6.5), “taşıma kutusuna girme” (7.6) ve “yetiştirme” (8.3) aşamalarının son aşamalarını gösterebildi. On iki tavşan “kucakta zıplamanın” son adımını (9.9) gösterirken, tavşan #7 sadece ön pençelerini eğitmenin bacaklarına yerleştirdi ve burnu/ağzıyla hedefe dokunmak için öne doğru uzandı (9.3). Tanıdık bir eğitmene ve tanıdık olmayan bir kişiye karşı gönüllü yaklaşım Eğitimden üç hafta sonra, tavşanların gönüllü yaklaşım davranışları, tanıdık eğitmen ve tanıdık olmayan bir kişiyle (her ikisi de dişi) etkileşimlerini araştırmak için test edildi. Testten önce her iki kişi de aynı duş jeli ve şampuanı kullanarak duş aldı, aynı tür giysiler ve koruyucu ekipman (eldivenler, maskeler, saç fileleri) giydi. Hayvan ağılındaki denemeler arasında 2 dakikalık bir ara ile 5 dakikalık iki deneme yapıldı. Şekil 4A’da gösterildiği gibi, tanıdık eğitmen ve tanıdık olmayan bir kişi, kalemin zemininde, sırtı kalemin duvarına bakacak şekilde karşılıklı olarak (aynı pozisyonda) oturdu. Kalemden iki ev çıkarıldı; Kalan ev ve tünel, her iki kişiden de aynı mesafede olacak şekilde diğer iki duvarın yanına yerleştirildi. 2. denemede, tavşanların potansiyel yer tercihlerini göz önünde bulundurmak için koltuk yerlerini değiştirdiler. 5 dakikalık denemeler sırasında ne hareket ettiler ne de konuştular. Bir tavşan pantolonunu çiğneyip bacağını sıkıştırırsa, durması için bir el nazikçe tavşana doğru hareket ettirilirdi. Bireysel hayvanların gözlemlerinin grup içinde yapıldığına, yani tavşanların her iki deneme sırasında da birbirleriyle etkileşime girebileceğine dikkat edilmelidir. Videolar BORIS53 programı kullanılarak retrospektif olarak analiz edildi. Bu araştırma için tanımlanan etograma göre, dört pençenin tümü bir kişinin etrafında 70 cm × 70 cm’lik karede veya bu karenin sınır çizgisinde olduğunda bir tavşan bir kişiyle etkileşime girdi. Ayrıca, bir tavşanın her iki ön pençesini bacaklarının üzerine yerleştirip yerleştirmediği veya kucağa atlayıp atlamadığı (dört pençenin tümü kucağa yerleştirilerek) izlendi. Şekil 4B , tavşanların iki kişiyle etkileşime girdiği süreyi göstermektedir. Wilcoxon işaretli sıra testi, eğitici ve tanıdık olmayan kişi ile etkileşim süresinin 1. denemede anlamlı olarak farklılık gösterdiğini (z = -2.040, p = 0.041, Pearson korelasyon katsayısı r = 0.57), ancak 2. denemede anlamlı olmadığını (z = 0.245, p = 0.807, r = 0.07) ortaya koydu. 1. denemede, tavşanlar eğitmenle etkileşime girmek için daha fazla zaman harcadılar. Üç (#1, #5, #6) ve beş (#1, #6, #7, #8, #12) tavşan, sırasıyla deneme 1 ve 2’de ön pençelerini eğitmenin bacaklarına yerleştirdi. Beş hayvan, dört pençesiyle birlikte antrenörün kucağına atladı (deneme 1: #1, #3, #5, #6; deneme 2: #9). 1. denemede dört hayvan (#1, #2, #8, #9) ve 2. denemede üç (#1, #4, #8) hayvan ön pençeleriyle tanıdık olmayan kişinin bacaklarına tırmanırken, hiçbiri dört pençeyle de kucağına atlamadı. “Ön pençe-bacak dokunuşları” sayısı arasındaki farkların ortalaması, ne deneme 1’de (z = -0.264, p = 0.792, r = 0.07) ne de deneme 2’de (z = -0.707, p = 480, r = 0.20) eğitmen ile tanıdık olmayan kişi arasında önemli ölçüde farklılık göstermedi. Elleçleme tekniklerinin tavşanların “elleçleme cihazına” yönelik davranışları üzerindeki etkisi Tavşanları yerden kaldırmak için kullanılan tekniklerin davranışlarını etkileyip etkilemediğini araştırmak için, bu işlemden sonra genel muayene bağlamında iki ardışık gün boyunca 2 dakikalık bir davranışsal gözlem yapıldı (Şekil 1). Bu gözlem yedi hayvan için yapıldı. 1. günde, tavşanlar taşıma kutusuyla birlikte alındı. Bunun için hedef çubuğu kutuya kadar takip ettiler, kutu kapatıldı ve eğitim adımı 7.5’te anlatıldığı gibi muayene masasına getirildi. Burada, her iki el/kol hayvanın vücudunun altına/çevresine yerleştirilerek kutudan masaya nazikçe kaldırıldılar. Bir sağlık muayenesi (vücudun palpasyonu, kulakların, gözlerin, burun deliklerinin, kesici dişlerin, anogenital bölgenin görsel muayenesi dahil) yapıldı ve daha sonra onlara bir yiyecek ödülü teklif edildi. Sağlık muayenesinden sonra, ellerle nazikçe taşıma kutusuna yönlendirildiler. Hayvanları sabitlemek için eğiticinin ellerinin serbest kalmasını sağlamak için muayene masasında hedef çubuk kullanılmadı. Tavşanlar tekrar taşıma kutusuna girdiğinde ve kapı kapandığında, kutu ağıla aktarıldı ve kapı açıldı. Tavşan, hedef çubuğu takip edecek ve kutuyu terk edecek, ardından eğitim adımı 7.6’da açıklandığı gibi yiyecek ödülünün sunumu yapıldı. 2. günde, tavşanlar, hayvan bakıcıları tarafından rutin olarak kullanılan geleneksel teknikle alındı (yani, bir elleriyle boynunun tırnağı tarafından tutuldular ve kısa bir süreliğine diğer kolun üzerine kaldırıldılar, baş kolun kıvrımına bakacak şekilde). Daha sonra muayene masasına geçirilerek yukarıda anlatıldığı gibi sağlık muayenesi yapıldı. Sağlık kontrolünün ardından kendilerine ödül kasesinden yiyecek ödülü sunuldu. Sonunda, boynunun tırnağıyla tekrar dizginlendiler ve onları kaleme geri getirmek için kısa bir süre kollarına kaldırıldılar. Serbest bırakıldıktan sonra onlara tekrar bir yemek ödülü teklif edildi. Kafesteki tavşanlara yemek ödülü sunulduktan sonra, eğitmen tavşanlarla etkileşime girmeden kalemin zeminine oturdu ve BORIS53 kullanılarak retrospektif olarak analiz edilen 2 dakikalık bir video kaydedildi. Bireysel hayvanların gözlemlerinin grup içinde yapıldığına dikkat edilmelidir, çünkü tanıdık ortamlarında izlenmeleri gerekir. Bu, tavşanların birbirleriyle etkileşime girebileceği anlamına gelir. Aşağıdaki parametreler araştırılmış ve tanımlanmıştır: Eğitmen veya taşıma kutusu ile etkileşim için harcanan süre (yani, bir tavşan, burun eğiticiden veya kutudan bir vücut uzunluğundan daha az uzakta olduğunda, eğiticinin veya taşıma kutusunun etkileşim bölgesindeydi); Taşıma kutusunda geçirilen süre (yani, bu olay, hayvan kutunun etkileşim bölgesindeyken meydana geldi; tavşanlar kutuya dört pençeyle girdiğinde başladı ve bir veya daha fazla pençe kutunun dışına yerleştirildiğinde durdu); yemek için harcanan süre (örneğin, tavşan saman, saman, pelet veya dışkı yuttu; eğiticinin kıyafetlerini veya ayakkabılarını çiğnemek yemek olarak kabul edilmedi); saklanmak için harcanan süre (bu olay, tavşan dört pençesiyle bir eve veya tünele girdiğinde başladı; tavşan barınağı bir veya daha fazla pençeyle terk ettiğinde durdu); kucakta zıplama (yani, tavşan eğiticinin kucağına atladı ve dört pençesini de üzerine yerleştirdi; bu olay, hayvan eğiticinin etkileşim bölgesindeyken meydana geldi); ön pençeleri bacaklara yerleştirmek (yani, tavşan her iki ön pençeyi de eğiticinin bacaklarına yerleştirdi; bu olay, hayvan eğiticinin etkileşim bölgesindeyken meydana geldi). Davranış analizi, eğitmen ve gerçekleştirilen işleme tamamen kör olan bir kişi tarafından gerçekleştirildi. Landis ve Koch54’e göre, BORIS53 (Cohens Kappa) kullanılarak hesaplanan eğitici ve kör kişi arasındaki değerlendirici güvenilirliği neredeyse mükemmele yakındı. Daha fazla analiz için, kör gözlemci tarafından çıkarılan veriler kullanıldı. Wilcoxon işaretli sıralama testi, geleneksel taşıma tekniğinin “taşıma cihazı” ile etkileşim için harcanan süreyi, yani alındıktan sonra eğitmen ve kutu ile etkileşimde harcanan sürenin toplamını önemli ölçüde azalttığını ortaya koydu (z = 2.366, p = 0.018, r = 0.89; Şekil 5A). Taşıma tekniği, eğitmenle etkileşim süresini anlamlı olarak etkilemedi (z = 1.014, p = 0.310, r = 0.28; Şekil 5B). Buna karşılık, tavşanları kutu tarafından almak, kutu ile etkileşime girdikleri süreyi artırdı (z = 2.366, p = 0.018, r = 0,66; Şekil 5C) ve kutuda harcandı (z = 2.201, p = 0.028, r = 0.61; Şekil 5D) geleneksel taşıma tekniği ile karşılaştırıldığında. Ayrıca, hayvanlar geleneksel taşıma tekniği ile alındıktan sonra barınaklarda saklanmak için daha fazla zaman harcadılar (z = -1.992, p = 0.046, r = 0.046; Şekil 5F). İşleme tekniğinin, hayvanların yemek için harcadıkları süre üzerinde anlamlı bir etkisi yoktu (z = 0.944, p = 0.345, r = 0.26; Şekil 5E), ön pençelerini eğiticinin bacaklarına yerleştiren (McNemar: p = 1.000) veya eğiticinin kucağına atlayan (McNemar: p = 0.500) tavşanların sayısı. Taşıma tekniğinden bağımsız olarak, tavşan #9 eğitmenin kucağına atladı ve tavşan #12 ön pençelerini eğitmenin bacaklarına yerleştirdi. Ek olarak, #8 ve #11 numaralı tavşanlar, taşıma kutusu tarafından alındıktan sonra ön pençelerini bacaklarının üzerine koyarlar. Muayene masasında sunulan yiyecek ödülü, kutudaki kısa nakliyeden sonra tüm tavşanlar tarafından yutulurken, geleneksel taşıma tekniğinden sonra sadece bir tavşan (# 8) bunu kabul etti. Bu fark anlamlıydı (McNemar: p = 0.031). Kalemde, yiyecek ödülü, taşıma kutusundan ayrıldıktan sonra altı tavşan (yani #7 hariç tümü) ve koldan serbest bırakıldıktan sonra dört tavşan (#7, #9, #10 ve #12) tarafından kabul edildi (geleneksel taşıma tekniği; McNemar: p = 0.625). Şekil 1: Zaman çizelgesi. Tüm alışkanlık, eğitim ve genelleme seanslarının yanı sıra davranışsal gözlemler sabahları beslenme ve temizlikten önce yapıldı. 1. haftada (yani, varıştan dört gün sonra), hayvan bakıcıları ve ilgili yazar (tümü kadın) tarafından beş bağlamsal koşullandırma / alışkanlık seansı (Pazartesi’den Cuma’ya; protokol bölüm 3) gerçekleştirildi, ardından 2-4. haftalarda 3 haftalık bir eğitim dönemi (Pazartesi’den Cuma’ya; protokol bölümü 4-9) yapıldı. Eğitim oturumları, laboratuvar hayvanları biliminde uzmanlaşmış ve tavşan, fare, tavuk ve atların eğitiminde deneyimli bir veteriner olan ilgili yazar tarafından yürütülmüştür. Bundan sonra, tavşanları yerden kaldırmak için kullanılan tekniğin davranışlarını etkileyip etkilemediğini araştırmak için art arda iki gün boyunca davranışsal gözlemler yapıldı. 5. haftada, tavşanların öğrenilen hedef davranışları eğitmenden başka bir kişiyle gerçekleştirip gerçekleştirmeyeceklerini değerlendirmek için beş genelleme oturumu (Pazartesi-Cuma) yapıldı. 6. ve 7. haftalarda (Perşembe günleri) ve 14. haftada (Pazartesi/Salı), eğitmen haftalık genel sağlık muayenesi kapsamında tavşanların hedef davranışlarını koruyup koruyamayacaklarını ve gösterip gösteremeyeceklerini test etti. Tavşanların tanıdık ve tanıdık olmayan insanlara karşı davranışsal tepkilerini araştırmak için 7. haftada eğitmen ve tanıdık olmayan bir kişi ile gönüllü bir yaklaşım testi yapıldı. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın. Şekil 2: Antrenman alanı. Eğitim alanı (Malzeme Tablosuna bakınız) eğitim başlamadan birkaç dakika önce kuruldu. (A) Nakliye ve kurulumu kolaylaştırmak için arena, kalemle birbirine bağlanmış iki parçadan oluşuyordu. (B) İki sıra şeffaf plastik panel, yaklaşık 136 cm × 90 cm × 70 cm’lik bir arena oluşturdu. Kapı, açılıp kapanmasına izin veren kablo bağları kullanılarak diğer panellere tutturuldu. Kapı bir klips kullanılarak kilitlenebilir. Eğitim alanının duvarları şeffaf olduğundan, bir tavşan eğitim alanına girdiğinde grup üyeleriyle görsel, koku alma ve işitsel temas kurdu. Antrenör için koltuk olarak alçak bir tabure/basamak ve eğitilecek hedef davranışa bağlı olarak arenaya bir tartı veya taşıma kutusu yerleştirilebilir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın. Şekil 3: Entegre tıklayıcılı ödül kasesi. Ödül kasesi, beyaz polilaktik asit (PLA) kullanılarak 3D olarak basılmıştır. Kare kase boyutu: 8 cm × 8 cm × 3 cm; silindirik sap boyutu: 9,5 cm × 2,3 cm. Sapa bir parmak tıklayıcısı (Malzeme Tablosuna bakınız) takıldı. Ödül kasesi için bir 3D baskı dosyası Ek Kodlama Dosyası 1’de bulunabilir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın. Şekil 4: Gönüllü yaklaşım testi. (A) 5 dakikalık iki denemede, tanıdık eğitmen ve tanıdık olmayan bir kadın kişi, sırtı kalemin duvarına bakacak şekilde kalemde karşılıklı oturdu. Diğer iki duvarın yanına, her iki kişiden aynı mesafede bir ev ve bir tünel yerleştirildi. (B) Bir kişiyle etkileşimde geçirilen süre her tavşan için analiz edildi. Bir tavşan, dört pençenin tümü bir kişinin etrafında veya bu karenin sınır çizgisinde 70 cm × 70 cm’lik bir karede olduğunda bir kişiyle etkileşime girdi. Semboller, her bir hayvanın verilerini gösterir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın. Şekil 5: Taşıma tekniklerinin tavşanların davranışları üzerindeki etkileri. (AF) Yedi tavşandan, taşıma kutusu veya konvansiyonel teknikle ele alındıktan sonra toplanan davranışsal verilerin çizimleri (yani, boyunlarının tırnağı tarafından kısıtlandılar ve kol üzerinde kaldırıldılar). Eğitim seti ve taşıma kutusu “taşıma cihazları” olarak kabul edildiğinden, (A) Bu panel, panel B ve C’nin toplamını gösterir. Semboller, her bir hayvanın verilerini gösterir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın. Tavşan Hedef davranışı eğitmek için gereken eğitim oturumu sayısı Hedefin peşinden gitmek Tartım Taşıma kutusuna giriş Yetiştirme Turda atlama #1 1 1 2 2 2 #2 1 1 4 1 5 #3 2 1 3 1 4 #4 7 2 1 3 2 (adım 9.2) #5 2 1 3 1 3 #6 2 1 2 1 1 #7 8 1 2 2 3 (adım 9.3+) #8 2 1 2 1 1 #9 2 1 2 1 2 #10 2 2 3 3 5 (adım 9.3) #11 2 1 2 2 4 #12 2 1 1 1 1 #13 2 3 1 2 4 Medyan (25-75. yüzdebirlik dilim) 2 1 2 1 2.5 (2–2) (1–1.5) (1.5–3) (1–2) (1–4)* Tablo 1: Hedef davranışları eğitmek için gereken oturum sayısı. Bir tavşan bir hedef davranışının son adımını öğrenmediyse, ulaşılan son eğitim adımı parantez içinde gösterilir. Bir eğitim seansının tanımı: grup başına yaklaşık 30 dakika (6-7 hayvan); Üç hafta boyunca pazartesiden cumaya; eğitmen kaleme oturduğunda ve eğitime başlamaya hazırlandığında başlar; tavşanların hiçbiri artık eğitime katılmadığında veya tüm tavşanlar bir hedef davranışın son adımına ulaştığında sona erer; Bir hayvan seans başına birden fazla deneme yapabilir. * Tavşanlar #4, #7, #10 “turda atlama” nın son adımına ulaşamadıkları için bu hesaplamadan çıkarıldı. Tavşan Hedef davranışın son adımına ulaşılana kadar geçen eğitim oturumlarının sayısı Tartım (5 eğitim adımı) Taşıma kutusuna giriş (6 eğitim adımı) Yetiştirme (3 eğitim adımı) Turda atlama (9 egzersiz adımı) #1 1 3 1 1 #2 1 3 1 1 #3 1 3 1 F (9,3) #4 F F F 3 (9.2) #5 2 3 2 2 #6 1 1 3 3 #7 1 1 3 3 (9.3+) #8 1 1 1 3 #9 1 1 1 3 #10 1 3 3 3 (9.3) #11 1 1 3 F (9,3) #12 1 1 3 3 #13 1 3 2 5 Medyan (25-75. yüzdebirlik dilim) 1 2 2 3 (1–1) (1–3) (1–3) (1.25–3) (#4 hariç) (#4 hariç) (#4 hariç) (#3, #4, #7, #10, #11 hariç) Tablo 2: Genelleme. Beş oturumda (Pazartesi’den Cuma’ya), tavşanlara aşina olan bir hayvan bakıcısı, tavşanlardan eğitilen hedef davranışlarının son adımlarını (veya ulaşılan son adımı) gerçekleştirmelerini istedi. Bir hedef davranışın son adımına ulaşılmadıysa, ulaşılan son eğitim adımı parantez içinde gösterilir. F (başarısızlık), bir hayvan eğitimde daha önce ulaşılan bir hedef davranışın son adımını göstermediğinde belirtildi. Bir oturumun tanımı: Bir hafta boyunca Pazartesi’den Cuma’ya; hayvan bakıcısı ve eğitmeni ağılda oturduğunda başlar; tavşanların hiçbiri katılmadığında (artık) veya tüm tavşanlar istenen bir hedef davranışın son adımını (veya ulaşılan son adımı) gösterdiğinde sona erer; Bir hayvan seans başına birden fazla deneme yapabilir. Ek Kodlama Dosyası 1: 3D baskı dosyası “ödül kasesi”. Baskı için polilaktik asit (PLA) kullanılabilir. Bu dosyayı indirmek için lütfen buraya tıklayın. Ek Dosya 1: Altı tavşan için dokümantasyon sayfası. Her tavşanın eğitim ilerlemesini belgelemek için sayfa bir tablete yazdırılmalı veya açılmalıdır. Her eğitim oturumunda, tek tek hayvanların hangi eğitim adımlarına ulaştığı veya protokole uyarlamaların gerekli olup olmadığı not edilmelidir. Herhangi bir özel olay (örneğin, dış faktörler, bozulmuş sağlık durumu) da belgelenmelidir. Bu dosyayı indirmek için lütfen buraya tıklayın. Ek Dosya 2: Basitleştirilmiş eğitim protokolleri. Tablolar, protokol bölümleri 3-9’un adımlarını basitleştirilmiş bir şekilde açıklamaktadır. Daha fazla ayrıntı için, ana makalenin protokol adımları okunmalıdır. Bu dosyayı indirmek için lütfen buraya tıklayın.

Discussion

Eğitim protokolleri, laboratuvar tavşanlarında taşıma, sağlık denetimleri ve tartma gibi rutin prosedürleri iyileştirmek için geliştirilmiştir. Fizibiliteleri, bu keşif çalışmasında on üç dişi Yeni Zelanda Beyaz tavşanı kullanılarak değerlendirildi. Eğitim protokolleri, tavşanları başarılı bir şekilde eğitmek için güvenilir bir şekilde uygulanabilir. Tavşanların çoğu, eğitim protokollerinde tanımlanan hedef davranışları 3 haftalık eğitim süresinden daha kısa bir sürede öğrenebildi, 1 haftalık eğitim molalarından sonra hatırladı ve eğitmenden başka bir kişiye genelledi. Bireysel hayvanların ihtiyacını karşılamak için protokolde çok az uyarlama yapılması gerekiyordu. Bu çalışmanın ana bulgusu, eğitim protokollerinde tarif edildiği gibi, tavşanları toplamak için rafine edilmiş taşıma tekniğinin, geleneksel taşıma tekniğinden daha az caydırıcı olduğuydu. İlginç bir şekilde, eğitilmiş tavşanlar, gönüllü bir yaklaşım testinde sadece tanıdık eğitmene karşı değil, aynı zamanda yabancı bir kişiye karşı da keşif davranışlarını gösterdiler.

Hedefin anlamı

Hedef, mevcut eğitim protokolü için bir temel oluşturdu. Hedefi tanıtırken, hayvanlar davranışlarının çevreyi etkilediğini ve sonuçlar doğurduğunu öğrendiler. Hedefin tanıtılması, insan ve hayvan arasında güven oluşturur, tavşan # 4 tarafından gösterildiği gibi, hedef çubuğu eğitim alanına kadar takip etmeden önce 7 eğitim seansı aldı, ancak aşağıdaki hedef davranışlarını hızlı bir şekilde öğrendi (yani, 1-3 eğitim seansı içinde). Bu tavşan #4, hedef tanıtımı sırasında eğitmene güven kazanmış gibi görünüyordu ve bu da diğer hedef davranışların eğitimini kolaylaştırdı. Bununla birlikte, bu tavşan hala diğer kişilere güven duymuyordu ve genelleme oturumlarında hedef davranışların çoğunu göstermeye istekli değildi.

Hedefin bazı protokol bölümlerinde uç nokta olarak tanımlanmadığına dikkat edilmelidir. Bunun yerine, örneğin, hayvanlar değişken sayıda atlama için hedefi takip etmek veya değişken sayıda saniye boyunca ölçekte kalmak zorunda kaldılar. Tavşanların eğitimdeki dikkat ve motivasyonunu artırmak ve sürdürmek için değişken ödüllendirme modeli seçilmiştir.

Sinyal

Tavşanlar adım 5.1’i başarıyla gerçekleştirdikten sonra, sonraki tüm eğitim seanslarında, eğitmen tavşana eğitim denemesinin başladığını bildirmek için hedefi tavşanın burnuna yakın bir mesafeye yerleştirdi. Tavşanın burun/ağız ile hedefe dokunması durumunda, eğitime katılma isteği göz önünde bulunduruldu ve eğitime başlandı.

Mevcut protokoller başka herhangi bir sinyal içermiyordu, örneğin ölçek, taşıma kutusu veya el sinyal olarak kabul edilmedi. Bunun yerine hedef, hayvanı eğitim alanına, tartıya, taşıma kutusuna, havaya (yetiştirme) veya eğitmenin kucağına yönlendirmek için kullanıldı. Bu, “tartma”, “taşıma kutusuna girme”, “şahlanma” ve “kucakta atlama” hedef davranışlarının “hedefi takip etme”nin modifikasyonları olduğu anlamına gelir. Bunun nedeni, eğitim protokolünün gereklilikleriydi: hayvan eğitimi konusunda uzman olmayabilecek hayvan tesislerinin personeli tarafından gerçekleştirilmesi ve günlük çalışma rutinine kolayca entegre edilmesi mümkün olmalıydı. Bu nedenle, protokoller verimli olmalı ve hedef davranışlara hızlı bir şekilde ulaşmalıdır.

Bununla birlikte, tavşanın önüne yerleştirilen el (adım 8.3), terazi veya taşıma kutusu da pençeler için hem bir sinyal hem de bir hedef olma potansiyeline sahiptir. Bu nedenle, mevcut protokollerin ötesine geçen ve hedef çubuğun kullanılmasını gerektirmeyen başka adımlar tanımlamak mümkün olabilir. Örneğin, tavşan teraziyi görür görmez, terazi tavşanlara dört pençeyle de üzerine atlamaları için sinyal verir.

Protokollerin uyarlanması

Neredeyse genetik olarak aynı laboratuvar hayvanlarının fenotipinin çok benzer olması beklenebilse de, “bireyler arasında zaman içinde ve durumlar arasında tutarlı olan [ve] kişilik olarak adlandırılan farklılıklar” vardır”55, örneğin, bazı hayvanlar oldukça utangaç ve diğerleri cesurdur56. Utangaç, daha az keşfedici hayvanların protokolün tanımlanmış hedef davranışlarını öğrenmesi daha uzun sürebilir (örneğin, tavşan #4). Standart eğitim protokolleri çoğunluk için uygun olsa bile, eğitim tek bir hayvanın ihtiyaçlarını göz önünde bulundurmalı ve gerektiğinde buna uyum sağlamalıdır26. Bu nedenle, protokolün bir eğitim adımını öğrenemeyen tavşanlar için ek küçük ara adımlar tanımlanmalıdır. Ek ara eğitim adımları, bir sonraki adıma başarılı bir şekilde ilerlemelerine yardımcı olmalıdır. Özellikle eğitim planları teoride geliştirildiği ve daha sonra pratikte test edildiği için, belirli bir hedef davranışı eğitmek için ek eğitim adımlarının gerekli olduğu ortaya çıkabilir.

Mevcut eğitim protokolleri ile ilgili olarak, “hedefi takip etme”, “taşıma kutusuna girme”, “yetiştirme” ve “kucakta atlama” hedef davranışları için bazı ara eğitim adımlarının eklenmesi gerekmiştir, çünkü bireysel hayvanlar bir sonraki eğitim adımına devam edemedikleri için temsili sonuçlar bölümünde ayrıntılı olarak açıklanmıştır. İlginç bir şekilde, 8.2+ ve 9.3+ ara adımları çoğu tavşan tarafından gerekliydi ve bu da önemlerini vurguluyordu. Bu nedenle, bu adımlar eğitim protokollerine bir not olarak eklenmiştir.

Alternatif olarak, tanımlanan adım 8.2+’ya alternatif olarak, eğitmen avuç içi yukarı bakacak şekilde bir elini yere koyabilir ve tavşanın bir ve sonunda her iki ön pençesiyle elin üzerine basmasına izin verebilir. Ayrıca, bir tavşanın 9.3+ adımından önce ek ara adımlara ihtiyaç duyması düşünülebilir, örneğin, tavşan önce bir arka pençesini ve ardından her iki arka pençesini eğitmenin kucağına yerleştirir. Bir tavşan 9.5-9.9 adımlarında dokunulmayı kabul etmiyorsa, vücudun farklı bölgelerine dokunma süresi kademeli olarak artırılabilir. Dahası, başlangıçta sadece işaret ve orta parmaklar hayvanları tüy kadar hafif bir basınçla okşamak için kullanılabilirdi. Daha sonra dokunmak için kullanılan parmak sayısı ve basınç birkaç adımda artırılabilir.

Taşıma tekniklerinin iyileştirilmesi

Özellikle utangaç bir kişilik özelliğine sahip tavşanlarda, elleçlemenin oldukça caydırıcı olduğu varsayılabilir. Tavşanlar karasal av hayvanlarıdır ve bir sağlık muayenesi ve deneysel prosedür için kaldırılmaları (yani yerden kaldırılmaları) veya kısıtlanmaları (yani bir insanın kollarında tutulmaları) endişe ve sıkıntıya neden olabilir. Eğitim protokollerinde kullanım yöntemlerini iyileştirmek için bir seçenek tanıtıldı: tavşanı boynunun tırnağından tutmak ve tavşanı diğer kola kaldırmak yerine, tavşan hedef çubukla kutuya yönlendirilebilir ve daha önce önerildiği gibi kutu içinde muayene masasına taşınabilir50, 57, tavşanın yavaşça kutudan masaya aktarıldığı yer. Alternatif olarak, kutunun üst kısmı çıkarılabilir veya tavşan, hedef çubuk kutudan çıkarken yönlendirilebilir.

Tavşanlar konvansiyonel elleçleme tekniği veya taşıma kutusu kullanılarak alındıktan sonra yapılan davranışsal gözlemler, konvansiyonel elleçleme tekniğinin, alternatif tekniğe göre daha fazla stres ve kaygı ile ilgili davranışlarla ilişkili olduğunu ortaya koymuştur. Bu sonuç, konvansiyonel taşıma tekniği uygulandığında, muayene masasında yemek ödülünü reddeden hayvan sayısının fazlalığından ve barınaklarda saklanma süresinin artmasından çıkarılmıştır. İlginç bir şekilde, taşıma tekniği, eğitmenle etkileşim süresini etkilemedi, bu da taşıma sürecinin insan-hayvan ilişkisini bozmamış olabileceğini gösteriyor. Bununla birlikte, eğiticinin yanı sıra, taşıma kutusu aynı zamanda “taşıma cihazı” olarak da hizmet etti (yani, geleneksel tekniğin taşıma cihazı eğiticiydi, alternatif tekniğin taşıma cihazları hem eğitici hem de taşıma kutusuydu). Bu nedenle, taşıma kutusu ile etkileşim süresi de analiz edildi. Tavşanlar taşıma kutusuyla yeni alınmış olmalarına rağmen, kutuyla veya kutuyla etkileşime girmek için geleneksel teknikle alındıklarından daha fazla zaman harcadılar. Bu, taşıma kutusunun olumlu bir etki ile ilişkilendirilebileceğini düşündürdü. Her iki “taşıma cihazı” ile etkileşim halinde geçirilen süre karşılaştırıldığında (yani, kutu ve eğitici ile etkileşimde harcanan sürenin toplamı), kutu taşıma tekniği “taşıma cihazları” ile etkileşime giren süreyi artırdı, yani bu teknik, tavşanların ele alınma beklentisiyle “taşıma cihazlarına” karşı davranışsal tepkisi üzerinde açık bir olumlu etkiye sahipti. Laboratuvar farelerinde de benzer bulgular elde edildi ve nazik taşıma tekniklerinin ve eğitiminin stres ve kaygıyı azalttığını gösterdi: bir tünel kullanılarak alınan hayvanlar veya kaplanmış eller “taşıma cihazı” ile gönüllü olarak etkileşime girmek için daha fazla zaman harcadılar ve kuyruk saplı farelere göre daha az kaygı ile ilgili davranış gösterdiler12. Eğitimin bu etkiyi güçlendirdiği ortaya çıktı. Leidinger ve ark. nazik saplı (tünel/fincan) farelerin, eğitimsiz farelere kıyasla PRT kullanılarak eğitildiklerinde Morris Su Labirenti Testinde boyunlarının tırnağı tarafından kısıtlandıklarında daha az idrara çıkma, dışkılama ve ses çıkarma ve daha az yüzmeci davranış gösterdiklerini göstermiştir13.

Günlük çalışma için protokollerin fizibilitesi – eğitim süresi, saklama ve genelleştirme

Bir hedef davranışı öğrenmek için gereken eğitim oturumlarının sayısı, bireysel hayvana ve yukarıda sunulan protokolün 3. bölümünden 9. bölümüne kadar değişen farklı sayıda adımdan oluşan hedef davranışlara bağlıydı.

Bir hedef davranışı öğrenmeyi başaran hayvan sayısına ve her bir hayvan için protokollerde yapılması gereken adaptasyon sayısına göre, eğitim adımlarının farklı zorluk seviyeleri vardı. “Hedefi takip etme” davranışı, tavşanların ilk eğitim deneyimiydi ve bu nedenle, yukarıda tartışıldığı gibi, bazı hayvanların bu davranış üzerinde eğitim alması diğer hedef davranıştan daha uzun sürdü. Mevcut protokole göre tüm hayvanlar “tartma” konusunda eğitilebilirken, iki hayvan tarafından “taşıma kutusuna girme” ve hemen hemen tüm tavşanlar tarafından “yetiştirme” ve “kucakta atlama” için ek ara adımlar gerekliydi. Bu, farklı hedef davranışları gerçekleştirmek için gerekli olan hayvan ve eğitmen arasındaki fiziksel temas derecesi ile açıklanabilir. “Tartma” ve “taşıma kutusuna girme”, hayvan ve insan arasında herhangi bir fiziksel temas içermiyordu. “Yetiştirme”nin son adımı (8.3) ve “kucakta atlama”nın 9.2-9.4 adımları, tavşanların eğitici ile fiziksel temas kurmasını gerektiriyordu. Ek olarak, eğitmen “kucakta atlama” nın 9.5-9.9 adımlarında tavşanın omzuna, sırtına, kıçına veya pençelerine dokundu ve hayvan ile eğitmen arasındaki fiziksel temas derecesini artırdı. Dokunulduğunu kabul etmek bazı tavşanlar için diğerlerinden daha zordu. Yukarıda tartışıldığı gibi, bu hedef davranışların eğitim protokollerini uyarlamak ve ara adımlar eklemek faydalı olmuştur.

Bununla birlikte, üç tavşanın “turda atlama” hedef davranışını tamamlamak için ek eğitim seanslarına ihtiyacı vardı (# 4, # 7, # 10). Bu hayvanların eğiticinin kucağına atlamasını engelleyen fiziksel bozukluklar hariç tutulabilir. Dahası, tavşanlar evlerine atlayabildiler, bunların yükseklikleri eğiticinin kucağından daha yüksekti.

Bu üç tavşandan ikisinin (# 4 ve # 10) eğitmene alışmak için daha uzun süreye ve alışkanlık seanslarındaki yiyecek ödülüne ihtiyaç duyduğu ve diğer hedef davranışların son adımına ulaşmak için kısmen daha fazla eğitim seansına ihtiyaç duyduğu dikkat çekti. Bu aynı zamanda, dördüncü alışma seansından bu yana grup içindeki kavgalar nedeniyle kuyruğundan yaralanan tavşan #7 için de geçerliydi. Bu nedenle, tavşan # 7 alındı, muayene masasına transfer edildi, tedavi edildi ve 15 gün boyunca günlük olarak kontrol edildi, bu da insanlara karşı daha dikkatli olunmasına neden olmuş olabilir. Bir yandan, eğitim performansının, örneğin bozulmuş bir sağlık durumu, artan stres seviyeleri veya diğer müdahaleler nedeniyle bozulmuş bir insan-hayvan ilişkisinden etkilenebileceğini belirtmek çok önemlidir. Öte yandan, bu gözlemler eğitmen için alışmanın ve yiyecek ödülünün önemini gösterdi. Bazı hayvanların, eğiticinin varlığına aşina olması ve eğiticiden gelen yiyecek ödülünü kabul etmesi daha uzun sürebilir. Ek alıştırma seansları yapılmış olsaydı, tavşan # 4 ve # 10 eğitim seanslarında daha iyi performans gösterebilirdi. Alışılmış tavşanların insanlarla ilgisi literatürde zaten bildirilmiştir. Bu çalışmada kullanılan tavşanların satın alındığı ticari yetiştirici, son zamanlarda stresle ilgili davranışları azaltan ve saldırganlıkları ortadan kaldıran düzenli sevişme seansları başlattı58. Daha önceki bir çalışmada, genç tavşanların sevişilmesi ve ele alınmasının kaygı ile ilgili davranışları azalttığı, kilo alımını artırdığı ve ölüm oranını azalttığı gösterilmiştir59.

Tavşanlar farklı hedef davranışlarını öğrendikten sonra, bireysel istisnalar dışında, iki kısa (bir hafta) ve uzun (yaklaşık 7.5-9.5 hafta) eğitim molalarından sonra bunları hala sergileyebildiler. Bu gözlemler, genel muayene yapıldığında ve oda/kalem temizlendiğinde, tavşanlardan eğitilen hedef davranışları gerçekleştirmelerinin istenmesinin yeterli olduğunu gösterebilir.

Protokolün günlük iş hayatı için uygulanabilirliği için, tavşanların eğitilen hedef davranışlarını eğitici dışındaki kişilere genellemesi de çok önemlidir. Tatil veya hastalık durumunda, başka bir kişi hayvanların eğitimine ve bakımına devam etmek zorundadır. Tavşanların çoğunluğu (on üç tavşandan on ikisi) “tartma”, “taşıma kutusuna girme” ve “yetiştirme” hedef davranışlarını hayvan bakıcısına genelleştirdi, ancak bazı durumlarda tavşanların istenen davranışı göstermesi için birden fazla eğitim seansı aldı. “Tartım” en iyi genelleme gibi görünüyordu; ardından “taşıma kutusuna girme” ve “yetiştirme” geliyor. Bununla birlikte, “kucakta atlamak” başka bir kişiye genellemek daha zor görünüyordu. Hayvanların istenen davranışı göstermesi daha uzun sürdü (9.9.) ve daha önce son adım 9.9’u öğrenen iki tavşan, muhtemelen ihtiyaç duyulan daha yüksek fiziksel temas nedeniyle bu hedef davranışı gösteremedi (yukarıya bakın). Bir tavşan (# 4), “tartma”, “taşıma kutusuna girme” ve “yetiştirme” hedef davranışlarının herhangi bir adımını göstermedi ve hayvan bakıcısı ile etkileşime girmekle ilgilenmedi. Tavşan #4, alışma seanslarında eğitmene ve yiyecek ödülüne alışmak için daha uzun zamana ihtiyaç duyan hayvanlardan biriydi. Bu, bazı bireyler için, hayvan bakıcılarının tavşanlarla zaman geçirdikleri, onlardan yiyecek ödülünü kabul etmeleri için onları alıştırdıkları ve olumlu bir bağ kurdukları ek seansların faydalı olduğunu gösterebilir23. Tavşanlar, sıçanlar için gösterildiği gibi farklı kişiler arasında ayrım yapabilir60. Tavşanların eğitici ve hayvan bakıcısı ile yapılan seanslardaki performansını etkileme potansiyeline sahip diğer faktörler, eğiticinin eğitim seansları sırasında hayvanlara verdiği bilinçsiz sinyaller olabilir, örneğin hedef çubuğun veya ödül kasesinin konumu, vücut pozisyonu veya hareketi. Eğitmen bu sinyallerin farkında değilse, bunlar belgelenmeyecek ve diğer kişiler bu sinyalleri taklit etmeyecektir.

Ayrıca, hayvanlarla çalışan kişilerin, hedef çubuğu kullanma rutini ve ödül sunumu da dahil olmak üzere eğitim becerileri, hayvanların davranışlarını etkileyebilir. Öğrenme ilkeleri ve hayvan iletişimi bilgisinin yanı sıra, bir hayvanı61 başarılı bir şekilde eğitmek ve bir hedef davranışı elde etmek için pratik deneyimlere ihtiyaç vardır. Vasıflı ve vasıfsız bir kişiyi içeren genelleme oturumları karşılaştırılmadığından, “eğitim becerileri” faktörünün alaka düzeyi belirlenemez. Bununla birlikte, yazarların bildiği kadarıyla, laboratuvar hayvanları personelinin büyük bir kısmı hayvan eğitimi konusunda eğitimli değildir ve bu nedenle genelleme oturumlarının gerçekleştirildiği koşullar (yani, clicker eğitiminde daha önce çok az deneyime sahip bir hayvan bakıcısını dahil etmek) laboratuvar hayvanları tesislerinde gerçekçi bir ortamı temsil etmektedir.

Protokollerin temsili verileri, hayvan tesislerine farklı hedef davranışların eğitimi ile ilgili iş yükü hakkında bir fikir verir. Veriler, hayvan tesislerinin protokolü (bölümlerini) uygularken kendi çalışma programlarını oluşturmalarına yardımcı olabilir. Bireysel hayvan ve hedef davranışlarına bağlı olarak, genelleme süreci için biraz daha zaman ayrılmalıdır. Bununla birlikte, erkek tavşanlar veya başka bir tavşan ırkı ile çalışırken süre değişebilir. Hayvan tesislerinde, uygun zamanın olup olmadığı ve hayvan eğitimine zaman tanımak için nelerin değiştirilmesi gerektiği konusunda tartışma yapılmalıdır.

Hayvanların eğitimi için gereken sürenin yanı sıra, eğitimin yetenekli eğitmenlere ihtiyaç duyduğu ve personele hayvanların nasıl eğitileceğini öğretmenin de zaman alıcı olabileceği göz önünde bulundurulmalıdır. Eğitim, laboratuvar hayvanları personelinin, yani hayvan bakıcılarının, veteriner hekimlerin ve araştırmacıların eğitiminin zorunlu bir parçası olsaydı, tesislerde hayvan eğitiminin uygulanması kolaylaşacak ve daha az zaman alacaktır. 2010/63/EU sayılı Direktifin Ek III’üne göre, “kuruluşlar, hayvanlara, projenin prosedürlerine ve uzunluğuna uygun alışkanlık ve eğitim programları oluşturmalıdır”, yani hayvan eğitimi kanunen zorunludur. Almanya’da, hayvanlar üzerinde test lisansı için başvuruda bulunurken bu tür programlar sunulmalıdır. Bu, hayvan deneyleri planlayan ve laboratuvar hayvanlarıyla çalışan kişilerin hayvan eğitimi konusunda yetenekli olmasını gerektirir. Bununla birlikte, en azından Almanya’da, hayvan eğitimi, araştırma ve klinik62,63,64 alanındaki hayvan bakıcılarının eğitim programının bir parçası değildir. Ayrıca, AB’nin eğitim ve öğretim için tavsiye kararlarındaçerçeve 65’te açıkça belirtilmemiştir. Bu nedenle, bu düzenlemelerde eğitim uygulanmadığı sürece, olumlu pekiştirme eğitimine odaklanan sürekli mesleki gelişime daha fazla dikkat edilmesi gerekmektedir. Laboratuvar hayvanı personelinin, tutarlılık ve öngörülebilirliği sağlamak için öğrenme ve eğitim tekniklerinin ilkelerini, gerekli kriterleri, eğitmenler arasında prosedür transferini, kayıt tutmayı ve katılmayan hayvanlara istenen şekilde nasıl yanıt vereceğini öğrenmesi gerekir.

İnsan-hayvan etkileşimi

Eğitim seansları sırasındaki yoğun insan-hayvan etkileşimi süresi, bireysel tavşanlar ve eğitmen arasındaki ilişkiyi güçlendirmek için en uygun ortamı sağlar26,66. Olumlu bir insan-hayvan ilişkisi, hayvanların refahı için faydalıdır, çünkü hayvancılıkta ve deney ortamlarında stres düzeylerini azaltabilir67. Mevcut eğitim protokollerinde, eğitmen tavşanların temsilciliğini göz önünde bulundurur ve tavşanlar gönüllülük esasına göre eğitime katılmaya (veya katılmamaya) karar verebilirler. Hayvanlara aracılık sağlamak, onların refahı için faydalıdır 16 ve bu nedenle deneylerde, barınma ve hayvancılıkta da takip edilmelidir. Farklı davranışsal ajans seviyeleri vardır68; İİT’ye katılmak, eylem odaklı ajansın seviyesine, yani “mevcut sonuçlara ulaşmak için aktif olarak davranmaya [örneğin, gıda tedarik etmek]”68 bağlanabilir.

Tavşanların eğiticiye ve yabancı bir kişiye yönelik gönüllü yaklaşımı analiz edildiğinde, yoğun bir insan-hayvan etkileşimi gözlemlenebilir. Sonuçlar, 1. denemedeki (# 12) bir hayvan dışındaki tüm tavşanların hem eğitmen hem de yabancı kişiyle etkileşime girdiğini ortaya koydu. 1. denemede eğitmenle etkileşime girme konusunda net bir tercih gösterdikleri için eğiticiyi tanıyor gibi göründüler ve bazıları dört pençesiyle de eğiticinin kucağına atladı; yabancı kişiye karşı sergilenmeyen bir davranış. Tavşanlar, 1. denemede yabancı kişiye göre eğitici ile etkileşime daha fazla zaman harcasalar da, 2. denemede etkileşim süresi artık farklılık göstermedi. Bu gözlemin bir nedeni, tavşanların 1. denemede eğiticiden bir yiyecek ödülü almayı beklemeleri ve gönüllü yaklaşım testinde yiyecek ödüllerinin olmaması nedeniyle 2. denemede artık eğiticiyle daha fazla zaman geçirmemeleri olabilir. Bununla birlikte, bu veriler, eğitimli tavşanların hızlı bir şekilde yabancı bir kişinin varlığına alıştığını ve hiçbirinin etkileşime giremeyecek kadar utangaç olduğunu vurguladı. Buna karşılık, çok araştırmacıydılar ve yabancı kişiyle ilgileniyorlardı. Bununla birlikte, eğitimsiz bir kontrol grubu araştırılmadığından, eğitimin tavşanların gönüllü yaklaşım davranışı üzerindeki etkisi belirsizdir.

Tavşan #12’nin 1. denemedeki davranışını açıklayan bir hipotez, bu bireyin 1. denemede hala yabancı kişinin varlığına alışması gerektiği ve 2. denemede hem eğitmenle (70 saniye) hem de yabancı kişiyle (9 saniye) etkileşime girmeye daha fazla ilgi duyduğudur. Tavşanlar, tanıdık olmayan kişilerin etrafındaki rahatlık düzeyini ve buna bağlı olarak yaklaşma gecikmesini veya bir kişiyle etkileşim süresini etkileyebilecek farklı kişilik özelliklerine sahiptir69,70.

Sınırlama

Sadece eğitime katılan tavşanın değil, kalemdeki/odadaki tüm tavşanların bir eğitim seansı sırasında klik sesini (yani şartlı pekiştireç) duyabildiğinin ve yiyecek ödülü (yani doğal/koşulsuz pekiştireç) sunulmadığı için pekiştirme etkisinin zayıflayabileceğinin farkındayız. Eğitim alanının dışındaki bir tavşan eğitimli bir davranış gösterirse ve klik sesini duyarsa, ancak yiyecek sunulmazsa (ve bu senaryo birkaç kez gerçekleşirse), eğitilmiş davranış söndürülebilir. Bu fenomen yok olma64,71 olarak adlandırılır. Bununla birlikte, mevcut protokollerin tüm hedef davranışları eğitmen tarafından sunulan hedefe bağlı olduğundan, eğitim ortamımızda yok olma olasılığı düşüktür.

Eğitim alanının duvarları şeffaf olduğundan ve eğitim alanı kalemin içinde yer aldığından, tavşanlar eğitim sırasında birbirlerini görebilir, duyabilir ve koklayabilirler, bu da refahla ilgili açık bir avantajdır. Ayrıca, tavşanlar eğitim seansları sırasında grup üyelerini gözlemlemiş ve birbirlerinden öğrenmiş olabilirler. Sıçanlarda, bireylerin kafes arkadaşlarının PRT45 tarafından eğitildiğini gözlemleyerek bir hedef davranışı gerçekleştirmeyi öğrendikleri daha önce gösterilmişti. Bu gerçek hem bir avantaj hem de dezavantaj olarak kabul edilebilir. Hayvanların öğrenme ilerlemesi, birbirlerini gözlemleyebildiklerinde daha hızlı olabilir. Bununla birlikte, tek tek hayvanların verileri, grup üyelerinin performansından etkilenebilir ve yalnızca bireysel hayvanın eğitimine atfedilemez. Bu nedenle, hayvanların grup üyeleriyle veya tek barınaklı tavşanlarla herhangi bir teması olmadan eğitilmesi daha uzun sürebilir.

Bireylerin davranışsal gözlemleri (gönüllü yaklaşım testinde ve farklı ele alma teknikleri uygulandıktan sonra), yeni bir ortamın neden olduğu stres ve dikkat dağınıklığını ve gruplarından ayrılmayı önlemek için tanıdık sosyal çevrelerinde ve gruplarında gerçekleştirilmiştir, bu da davranışsal gözlemleri etkileyecektir. Bununla birlikte, dezavantajı, tavşanların gözlem seansları sırasında birbirlerinin davranışlarını etkilemiş olmalarıdır.

Taşıma tekniklerinin etkileri, hayvanları idare eden kişi olarak eğiticinin dahil olduğu yedi hayvanda araştırıldı. Yazarlar, bulguları diğer işleyicilerle yeniden üretmek ve işleme teknikleri arasındaki farkları daha fazla incelemek için a priori bir örneklem büyüklüğü hesaplaması da dahil olmak üzere bir takip çalışması planlamaktadır.

Eğitim, kullanım ve gönüllü yaklaşım testine katılan tüm insanlar kadındı. Tavşanların eğitim performansının veya davranışlarının, erkek kişilerin dahil olması durumunda değişip değişmeyeceği araştırılmamıştır.

Mevcut eğitim protokolleri, okuyucuya tavşanlarda nelerin eğitilebileceği hakkında bir fikir vermelidir, ancak bir laboratuvar tavşanında eğitilmesi faydalı olacak tüm potansiyel hedef davranışları içermemelidir. Örneğin, genel gerekliliklerle ilgili protokol bölümünde önerildiği gibi bir tavşanı işaretlemek de PRT kullanarak eğitim almaya değer olacaktır.

Yukarıda daha ayrıntılı olarak belirtildiği gibi, doğru ödülün seçimi önemsiz değildir. Hijyen kısıtlamaları nedeniyle, bazı laboratuvar hayvanları tesislerinde taze otların gıda ödülü olarak kullanılmasına izin verilmemektedir ve bu nedenle ayçiçeği tohumu veya tahıl bazlı yiyecek arama ikramları gibi daha az uygun gıda ödülleri kullanılmalıdır. Gıda ödülü kararıyla ilgili olarak, mevcut laboratuvar uygulamalarının bazı kuralları ve düzenlemeleri hayvan refahı ve etkili eğitim için zararlıdır ve bu nedenle duruma göre yeniden gözden geçirilmesi gerekebilir. Yiyecek ödüllerine alternatifler kullanmak da mümkün olabilir, örneğin nazik dokunuşlar veya eğitmenle etkileşimler veya zenginleştirme öğeleri. Bununla birlikte, eğitmen, her bir hayvan için alternatifin hayvanı ödüllendirmek olduğundan emin olmalıdır, çünkü bir ödül yalnızca tavşan onu gerçekten tercih ederse bir ödüldür. Özellikle dokunuşlar tüm tavşanlar tarafından ödüllendirici olarak alınmayabilir.

Sonuç

Özetle, bu çalışma, laboratuvar tavşanları için uygun eğitim protokolleri hakkındaki bilgi boşluğunu doldurmak için ilk adımdı. Dişi Yeni Zelanda Beyaz tavşanları, PRT kullanılarak rutin yetiştirme prosedürleri için eğitilebilir ve öğrenilen hedef davranışları diğer kişilere genelleştirilebilir, ancak genelleştirme işlemi için ek zaman ayrılmalıdır. Fiziksel temas olmadan hedef davranışların öğrenilmesi, insanlarla fiziksel temas gerektiren davranışlardan daha kolay görünüyordu. Hayvanlar bir hedef davranış eğitimini başarıyla tamamladıktan sonra, genel muayene ve kalem temizliği bağlamında haftada bir kez geri almak yeterliydi. Genel olarak tüm tavşanlara uygulandığı düşünülen eğitim protokolleri uygundur, ancak eğitmen, bazı durumlarda hayvanın ihtiyaçlarına göre uyarlanması gerektiğinin farkında olmalıdır. Taşıma teknikleriyle ilgili sonuçlar, tavşanları boynunun tırnağından tutmak ve kol üzerinde kaldırmak yerine taşıma kutusuyla kaldırmanın daha az caydırıcı olduğunu gösterdi. Sonuç olarak, mevcut protokoller tavşanların alışma ve eğitim süreci için uygulanabilir talimatlar sağlar ve laboratuvar hayvanı tesislerinde arıtma işlevi görebilir.

Hayvanlar, işgücünden, zamandan veya paradan tasarruf ettikleri için acı çekmemelidir (en azından Alman Hayvan Refahı Yasası72’ye göre). Tüm hayvanlara mümkün olan en nazik şekilde bakmak ve onlarla ilgilenmek önemlidir. Eğitimsiz hayvanlar, deneysel ve rutin yetiştirme prosedürlerinin neden olduğu kaygı ve sıkıntıdan, eğitimli meslektaşlarına göredaha yüksek derecede muzdarip olduklarından13, eğitim, olumsuz duygusal durumlar yaşamalarını etkili bir şekilde önlemek için basit bir iyileştirme önlemidir.

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Yazarlar, tavşanlara baktıkları ve şefkatli ve özverili çalışmaları için hayvan bakıcılarına teşekkür eder. El yazmasını düzelttiği için Kai Diederich’e teşekkürler.

Materials

Bed-r’Nest The Andersons, Inc., Maumee, USA The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
Finger Clicker ASCO https://ascoshop.de/products/fingerclicker
G*Power version 3.1.9.7
Heu-Proppen Ssniff Spezialdiäten GmbH, Soest, Germany The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
IBM Corp. Released 2020. IBM SPSS Statistics for Windows,  Armonk, NY: IBM Corp IBM Corp Version 27.0. in the manuscript referred to as "software for advanced statistical analysis"
Kaninchen Haltung + 25 mg/kg Salinomycin-Natrium-Sondermischung Ssniff Spezialdiäten GmbH, Soest, Germany The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
Lignocel block Lignocel J. Rettenmaier &Söhne GmbH + Co KG, Rosenberg, Germany The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
Lillebro geschälte Sonnenblumenkerne”, Martina GmbH, München, Germany) and Rainbow Foraging Bits (Bio-Serv, Flemington, USA)  Martina GmbH, München, Germany The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
Microsoft Excel for Microsoft 365 MSO Microsoft Corporation Version 2305 in the manuscript referred to as "spread sheet"
New Zealand White rabbits  Charles River Laboratories France
Plattformwaage DE 35K5DL KERN & SOHN GmbH, Balingen-Frommern, Germany The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
Premium scientific bedding (fine & flake) SAFE, Augy, France The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
Rainbow Foraging Bits Bio-Serv, Flemington, USA The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
Snackball für Kaninchen – 7 cm TRIXIE Heimtierbedarf GmbH & Co. KG, Tarp, Germany The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
Target stick with integrated clicker TRIXIE Heimtierbedarf GmbH & Co. KG, Tarp, Germany The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
Trixi Transportbox Capri Open Top TRIXIE Heimtierbedarf GmbH & Co. KG, Tarp, Germany The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 
Weiden-Heuball JR FARM GmbH, Holzheim-Pessenburgheim, Germany The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies. 

References

  1. EU statistics on the use of animals for scientific purposes under directive 2010/63/eu-section 1: Number of animals used for research, testing, routine production and education and training purposes in the EU. European Commission Available from: https://webgate.Ec.Europa.Eu/envdataportal/content/alures/section1_number-of-animals.html (2023)
  2. EU statistics database on the use of animals for scientific purposes under directive 2010/63/eu-section 2: Details of all uses of animals for research, testing, routine production and education and training purposes in the EU. European Commission Available from: https://webgate.Ec.Europa.Eu/envdataportal/content/alures/section2_number-of-uses.html (2023)
  3. Russell, W. M. S., Burch, R. L. . The principles of humane experimental technique. , (1959).
  4. Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes. Official journal of the European Union Available from: https://eur-lex.europa.eu/legal-content/EN/TXT/?uri=celex%3A32010L0063 (2023)
  5. Hau, J., Carver, J. Refinement in laboratory animal science; is it a cinderella subject, and is there conflict and imbalance within the 3Rs. Scandinavian Journal of Laboratory Animal Science. 21 (4), 161-167 (1994).
  6. Prescott, M. J., Lidster, K. Improving quality of science through better animal welfare: the NC3Rs strategy. Lab Anim (NY). 46 (4), 152-156 (2017).
  7. European convention for the protection of vertebrate animals. Appendix a of the european convention for the protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purposes (ETS No. 123). Guidelines for accommodation and care of animals (article 5 of the convention). European convention for the protection of vertebrate animals. , (2006).
  8. Morimoto, A., Watanabe, T., Myogin, T., Murakami, N. Restraint induced stress elicits acute-phase response in rabbits. Pflügers Archiv – European Journal of Physiology. 410 (4), 554-556 (1987).
  9. Rooney, N. J., et al. The current state of welfare, housing and husbandry of the English pet rabbit population. BMC Research Notes. 7, 942 (2014).
  10. Schepers, F., Koene, P., Beerda, B. Welfare assessment in pet rabbits. Animal welfare. 18 (4), 477-485 (2009).
  11. Normando, S., Gelli, D. Behavioral complaints and owners’ satisfaction in rabbits, mustelids, and rodents kept as pets. Journal of Veterinary Behavior. 6 (6), 337-342 (2011).
  12. Hurst, J. L., West, R. S. Taming anxiety in laboratory mice. Nature methods. 7 (10), 825-826 (2010).
  13. Leidinger, C., Herrmann, F., Thoene-Reineke, C., Baumgart, N., Baumgart, J. Introducing clicker training as a cognitive enrichment for laboratory mice. Journal of Visualized Experiments. (121), e55415 (2017).
  14. Lambeth, S. P., Hau, J., Perlman, J. E., Martino, M., Schapiro, S. J. Positive reinforcement training affects hematologic and serum chemistry values in captive chimpanzees (pan troglodytes). American Journal of Primatology. 68 (3), 245-256 (2006).
  15. Reinhardt, V. Working with rather than against macaques during blood collection. Journal of Applied Animal Welfare Science. 6 (3), 189-197 (2003).
  16. Sueur, C., Zanaz, S., Pelé, M. Incorporating animal agency into research design could improve behavioral and neuroscience research. Journal of Comparative Psychology. 137 (2), 129-143 (2023).
  17. Skinner, B. F. Two types of conditioned reflex: a reply to Konorski and M. The Journal of General Psychology. 16 (1), 272-279 (1937).
  18. Skinner, B. F. . The behavior of organisms: An experimental analysis. , (1938).
  19. Pierce, W. D., Cheney, C. D. . Behavior analysis and learning: a biobehavioral approach. , (2017).
  20. Cooper, J. O., Heron, T. E., Heward, W. L. . Applied behavior analysis. , (2020).
  21. Pryor, K. . Don’t shoot the dog: The art of teaching and training. , (2019).
  22. Brando, S., Norman, M. Handling and training of wild animals: Evidence and ethics-based approaches and best practices in the modern zoo. Animals (Basel). 13 (14), (2023).
  23. Heidenreich, B. An introduction to positive reinforcement training and its benefits). Journal of Exotic Pet Medicine. 16 (1), 19-23 (2007).
  24. Vieira De Castro, A. C., et al. Does training method matter? Evidence for the negative impact of aversive-based methods on companion dog welfare. PLoS One. 15 (12), 0225023 (2020).
  25. Laule, G., Hubrecht, R. C., Kirkwook, J. . The UFAW Handbook on the care and management of laboratory and other research animals. , 206-218 (2010).
  26. Zimbardo, P. G., Gerrig, R. J. . Psychologie. 18th edition. , (2004).
  27. Powell, R. A., Honey, P. L., Symbaluk, D. G. . Introduction to learning and behavior. 5th edition. , (2017).
  28. Peterson, G. B. A day of great illumination: B. F. Skinner’s discovery of shaping. J Exp Anal Behav. 82 (3), 317-328 (2004).
  29. Skinner, B. F. How to teach animals. Scientific American. 185 (6), 26-29 (1951).
  30. Breland, K., Breland, M. A field of applied animal psychology. American Psychologist. 6 (6), 202-204 (1951).
  31. Fernandez, E. J., Martin, A. L. Animal training, environmental enrichment, and animal welfare: a history of behavior analysis in zoos. Journal of Zoological and Botanical Gardens. 2 (4), 531-543 (2021).
  32. Ferguson, D. L., Rosales-Ruiz, J. Loading the problem loader: The effects of target training and shaping on trailer-loading behavior of horses. J Appl Behav Anal. 34 (4), 409-423 (2001).
  33. Fernandez, E. J., Dorey, N. R. An examination of shaping with an african crested porcupine (hystrix cristata). J Appl Anim Welf Sci. 24 (4), 372-378 (2021).
  34. Fernandez, E. J., Rosales-Ruiz, J. A comparison of fixed-time food schedules and shaping involving a clicker for halter behavior in a petting zoo goat. The Psychological Record. 71 (3), 487-491 (2021).
  35. Slater, C., Dymond, S. Using differential reinforcement to improve equine welfare: shaping appropriate truck loading and feet handling. Behav Processes. 86 (3), 329-339 (2011).
  36. Pfaller-Sadovsky, N., Hurtado-Parrado, C., Cardillo, D., Medina, L. G., Friedman, S. G. What’s in a click? The efficacy of conditioned reinforcement in applied animal training: A systematic review and meta-analysis. Animals (Basel). 10 (10), (2020).
  37. Prescott, M., Bowell, V., Buchanan-Smith, H. Training laboratory-housed non-human primates, part 2: Resources for developing and implementing training programmes. Animal Technology and Welfare. 4 (3), 133-148 (2005).
  38. Prescott, M., Buchanan-Smith, H. Training laboratory-housed non-human primates, part i: A UK survey. Animal welfare. 16 (1), 21-36 (2007).
  39. Schapiro, S. J., Bloomsmith, M. A., Laule, G. E. Positive reinforcement training as a technique to alter nonhuman primate behavior: Quantitative assessments of effectiveness. Journal of Applied Animal Welfare Science. 6 (3), 175-187 (2003).
  40. Joint Working Group on Refinement. Refining dog husbandry and care. Eighth report of the BVAAWF/FRAME/RSPCA/UFAW joint working group on refinement. Laboratory Animals. 38, 1-94 (2004).
  41. Meunier, L. D. Selection, acclimation, training, and preparation of dogs for the research setting. ILAR Journal. 47 (4), 326-347 (2006).
  42. Thomsen, A. F., Kousholt, B. S. Transition of farm pigs to research pigs using a designated checklist followed by initiation of clicker training – a refinement initiative. Journal of Visualized Experiments. (174), e62099 (2021).
  43. Langbein, J., Siebert, K., Nuernberg, G., Manteuffel, G. The impact of acoustical secondary reinforcement during shape discrimination learning of dwarf goats (capra hircus). Applied Animal Behaviour Science. 103 (1), 35-44 (2007).
  44. Leidinger, C. S., Kaiser, N., Baumgart, N., Baumgart, J. Using clicker training and social observation to teach rats to voluntarily change cages. Journal of Visualized Experiments. (140), e58511 (2018).
  45. Poling, A., et al. Tuberculosis detection by giant african pouched rats. The Behavior Analyst. 34 (1), 47-54 (2011).
  46. Poling, A., et al. Using trained pouched rats to detect land mines: Another victory for operant conditioning. Journal of Applied Behavior Analysis. 44 (2), 351-355 (2011).
  47. Rubin, H. B., Brown, H. J. The rabbit as a subject in behavioral research. J Exp Anal Behav. 12 (4), 663-667 (1969).
  48. Müller, I. . Clickertraining: Für Kaninchen. , (2015).
  49. Bradbury, A. G., Dickens, G. J. Appropriate handling of pet rabbits: a literature review. J Small Anim Pract. 57 (10), 503-509 (2016).
  50. Mähler, M., et al. Felasa recommendations for the health monitoring of mouse, rat, hamster, guinea pig and rabbit colonies in breeding and experimental units. Laboratory Animals. 48 (3), 178-192 (2014).
  51. Faul, F., Erdfelder, E., Lang, A. G., Buchner, A. G*power 3: a flexible statistical power analysis program for the social, behavioral, and biomedical sciences. Behavior Research Methods. 39 (2), 175-191 (2007).
  52. Friard, O., Gamba, M. Boris: A free, versatile open-source event-logging software for video/audio coding and live observations. Methods in Ecology and Evolution. 7 (11), 1325-1330 (2016).
  53. Landis, J. R., Koch, G. G. The measurement of observer agreement for categorical data. Biometrics. 33 (1), 159-174 (1977).
  54. Réale, D., Dingemanse, N. J., Kazem, A. J., Wright, J. Evolutionary and ecological approaches to the study of personality. Philosophical transactions of the Royal Society of London. Series B, Biological sciences. 365 (1560), 3937-3946 (2010).
  55. Mullan, S. M., Main, D. C. Behaviour and personality of pet rabbits and their interactions with their owners. Veterinary Record. 160 (15), 516-520 (2007).
  56. Mackie, J., Patel, C., Rendle, M., Hinde-Megarity, J. . Bsava manual of practical veterinary welfare. , 146-165 (2022).
  57. Dhondt, K. P., Rabany, B., Méon, B., Leal, A., Paillet, G. Rabbit human habituation program during breeding reduced significantly stress related signs during acclimatization period. In Abstracts of 15th FELASA congress 2022. Laboratory Animals. 56, 23 (2022).
  58. Jezierski, T. A., Konecka, A. M. Handling and rearing results in young rabbits. Applied Animal Behaviour Science. 46 (3), 243-250 (1996).
  59. Davis, H., Taylor, A. A., Norris, C. Preference for familiar humans by rats. Psychonomic Bulletin & Review. 4 (1), 118-120 (1997).
  60. Meier, J., Hillmann, E., Theby, V., Fischer-Tenhagen, C. Train the trainer: what is needed to train goats for experiments. In Abstracts of 15th FELASA congress 2022. Laboratory Animals. 56, 24 (2022).
  61. BGBL. I S. . Verordnung über die Berufsausbildung zum Tierpfleger/zur Tierpflegerin vom 3. , 1093 (2003).
  62. Pavlov, P. I. Conditioned reflexes: An investigation of the physiological activity of the cerebral cortex. Annals of Neurosciences. 17 (3), 136-141 (2010).
  63. Skinner, B. On the rate of extinction of a conditioned reflex. The Journal of General Psychology. 8 (1), 114-129 (1933).
  64. Directorate-General for Environment (European Commission). Caring for animals aiming for better science – directive 2010/63/eu on protection of animals used for scientific purposes – education and training framework. Directorate-General for Environment (European Commission). , (2018).
  65. Rault, J. L., Waiblinger, S., Boivin, X., Hemsworth, P. The power of a positive human-animal relationship for animal welfare). Frontiers in Veterinary Science. 7, 590867 (2020).
  66. Bayne, K. Development of the human-research animal bond and its impact on animal well-being. ILAR J. 43 (1), 4-9 (2002).
  67. Špinka, M. Animal agency, animal awareness and animal welfare. Animal Welfare. 28 (1), 11-20 (2019).
  68. Ellis, C. F. . Exploring domestic rabbit (oryctolagus cuniculus) personality utilising behaviour coding, behaviour testing and a novel behaviour rating tool. , (2020).
  69. Gomezdelatorre Clavel, M. G., Youngblood, M., Lahti, D. Relationship between personality and cognitive traits in domestic rabbits (Oryctolagus cuniculus). bioRxiv. , (2020).
  70. Pavlov, P. I. Conditioned reflexes: An investigation of the physiological activity of the cerebral cortex. Annals of Neurosciences. 17 (3), 136 (2010).

Play Video

Citer Cet Article
Hohlbaum, K., Kahnau, P., Wilzopolski, J., Fischer-Tenhagen, C. Training Laboratory Rabbits to Refine Routine Husbandry Procedures. J. Vis. Exp. (204), e66008, doi:10.3791/66008 (2024).

View Video