드로소필라 성인의 행동 연구를 위한 조정 가능한 고화질 화상 진찰 시스템
Summary
이 프로토콜은 간단한 성인 Drosophila 행동 관측실을 만드는 방법, 그리고 상대적으로 간단하고 저렴한 방법을 통해 관찰실에서 과일 파리의 다른 유형의 형태 또는 행동의 고화질 사진 / 비디오를 찍는 방법에 대해 설명합니다.
Abstract
Drosophila 멜라노가스터는 생물학적 연구에서 매우 강력한 모델이지만 사진이나 비디오 그래피에 대한 나쁜 모델입니다. 이 문서에서는 파리의 동작이나 형태를 관찰하고 문서화하는 간단하지만 효과적인 방법을 설명합니다. 파리는 반투명 관측실 c.a.a에 배치되었다. Ø15 x 5mm(내부 음식 없음) 또는 Ø15 x 12mm(내부에 8mm 높이의 음식). 자외선(UV)/투명 필터로 덮은 후, 챔버는 5-50x 줌 스테레오 현미경 아래에 배치되었고, 미니 발광 다이오드(LED) 비디오 라이트는 현미경의 양쪽에 배치되어 균일하고 부드럽고 밝으며 거의 그림자가 없는 빛을 얻기 위해 챔버를 조명하였다. 그런 다음, 1080 P 고화질 또는 고해상도 비디오(≥30fps의 프레임 속도로)를 녹화할 수 있는 3-5배 광학 줌을 갖춘 컴팩트한 디지털 카메라가 브래킷을 통해 현미경의 안면에 연결되었고, 사진이나 비디오는 접안을 통해 촬영되었다. 줌 스테레오 현미경의 줌 노브를 조정함으로써, 카메라가 현미경으로 모든 것을 기록하는 동안, 파리를 추적하고 필요에 따라 파노라마 또는 상세한 클로즈업 이미지를 취할 매우 쉬웠다. 파리는 챔버의 모든 위치에 머물 수 있기 때문에, 그들은 관찰하고 모든 방향에서 기록 할 수 있습니다. 찍은 사진이나 비디오는 좋은 이미지 품질입니다. 이 방법은 과학 연구와 교육에 모두 사용할 수 있습니다.
Introduction
드로소필라 멜라노가스터는 생물학적 연구에서 뛰어난 모델입니다. 그러나 카메라나 캠코더에 너무 작고 화합물 현미경1에너무 크기 때문에 사진이나 비디오 그래피에 대한 나쁜 모델이다. 문학에 설명 된 우수한 연구에도 불구하고, 대부분의 연구는 설명되는 비행 행동을 설명하는 명확한 세부 사항을 가진 명확하고 날카로운 사진보다는 흐릿하고 불분명한 이미지만 제공했습니다. 또한, 비행 행동은 광범위하게 연구되었지만 (예 : 구애와 싸움), 이러한 논문의 대부분은 독자에게 자신의 연구를 설명하기 위해 그림을 사용했다.
이 논문은 간단하고 경제적인 접근 방식을 설명합니다. 이 방법을 이용하여, Drosophila의 다양한 행동뿐만 아니라 스테레오 줌 현미경하에서 관찰 될 수있는 모든 세부 사항을 명확하고 날카롭게 기록 할 수 있습니다. 물론,이 방법은 또한 그들이 수면 또는 반 수면 상태에 들어갈 때와 같이, 파리의 형태를 기록하는 데 사용할 수 있습니다, 고정 모델은 사용자가 사진이나 다른 초점 평면과 사진의 스택을 취할 수 있습니다 필드 사진의 확장 깊이를 얻을 수 있습니다. 이러한 방법은 복잡한 기술과 고가의 장비 또는 뛰어난 수동 기술없이 실현 될 수있다.
이 문서의 비디오 구성 요소는 파리의 몇 가지 일반적인 동작의 비디오를 보여줍니다. 이 동영상을 보여주는 목적은 두 가지입니다: 하나는 관객에게 캡처할 수 있는 것을 알리고 이 방법을 사용하여 얻은 이미지 품질을 제시하는 것입니다. 다른 하나는 Drosophila에 관심이있는 새로운 학생들을 허용하지만, 지금까지 실제로 파리의 행동을 관찰 할 수있는 기회를 갖지 못했습니다 (예 : 구애, 싸움)이 명확한 비디오를 통해 그림이나 흐린 이미지보다.
추가 비디오 : 과일 비행 행동: 이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.
Protocol
Representative Results
Discussion
빛은 사진과 비디오 그래피의 중심에 있으며 고품질 이미지16을획득하는 데 결정적인 요소입니다. 여기서, 조절 가능한 밝기와 색 온도를 가진 두 개의 LED 비디오 조명이 조명기로 사용되었고, 반투명 소재가 선택되어 FBOC를 만들었다. 양쪽의 LED 라이트 패널은 충분한 밝기를 제공했고, 반투명 재료는 부드러워지고 흩어져 있었고, 결국 불쾌한 과노출 또는 노출부족 영역을 생성?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
리샹동 교수님과 사진작가 청징 씨에게 도움이 되는 토론과 제안에 감사드립니다. 이 작품은 중국 농업 대학의 생명 과학 실험 교육 데모 센터의 탐사 프로젝트 (20200101)에 의해 지원되었다.
Materials
| compact camera, Nikon P310 | Nikon | 3-5x optical zoom, cam record 1080 P HD video | |
| ethylamine foam | 60 mm x 60 mm x 15 mm | ||
| Food Blue No 1 | CAS 3844-45-9 | ||
| mini LED lights and transformer | GODOX | LED-P120 | have 5000-5600 K color temperature |
| small container (e.g. bottle cap) | about Ø 15 mm x 20 mm | ||
| UV / Clear filter | high-quality UV/Clear filter with high transmittance, 30-40 mm | ||
| zoom stereo microscope | 5-50x zoom |
References
- Chyb, S., Gompel, N. . Atlas of Drosophila morphology: Wild-type and classical mutants. , (2013).
- Yang, D. Carnivory in the larvae of Drosophila melanogaster and other Drosophila species. Scientific Reports. 8, 15484 (2018).
- Piper, M. D., et al. A holidic medium for Drosophila melanogaster. Nature Methods. 11, 100-105 (2014).
- Shiraiwa, T., Carlson, J. R. Proboscis extension response (PER) assay in Drosophila. Journal of visualized experiments : JoVE. (3), e193 (2007).
- Yang, C. -. H., Belawat, P., Hafen, E., Jan, L. Y., Jan, Y. -. N. Drosophila egg-laying site selection as a system to study simple decision-making processes. Science. 319 (5870), 1679-1683 (2008).
- Yang, D. Simple homemade tools to handle fruit flies-Drosophila melanogaster. Journal Of Visualized Experiments: JoVE. (149), e59613 (2019).
- Nichols, C. D., Becnel, J., Pandey, U. B. Methods to assay Drosophila behavior. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (61), e3795 (2012).
- Barron, A. B. Anesthetizing Drosophila for behavioural studies. Journal of Insect Physiology. 46 (4), 439-442 (2000).
- . My not quite complete protective filter article Available from: https://www.lensrentals.com/blog/2017/06/the-comprehensive-ranking-of-the-major-uv-filters-on-the-market (2017)
- . UV and clear lens protection filters review Available from: https://www.the-digital-picture.com/Reviews/UV-and-Clear-Lens-Protection-Filters.aspx (2013)
- Shaw, P. J., Cirelli, C., Greenspan, R. J., Tononi, G. Correlates of sleep and waking in Drosophila melanogaster. Science. 287 (5459), 1834-1837 (2000).
- Barradale, F., Sinha, K., Lebestky, T. Quantification of Drosophila grooming behavior. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (125), e55231 (2017).
- Szebenyi, A. L. Cleaning behaviour in Drosophila melanogaster. Animal Behaviour. 17 (4), 641-651 (1969).
- . Plexiglas : optical and transmission characteristics Available from: https://www.plexiglas.com/export/sites/plexiglas/.content/medias/downloads/sheet-docs/plexiglas-optical-and-transmission-characteristics.pdf (2000)
- . Calculation of the light reflection and transmission Available from: https://www.glassproperties.com/reflection/ (2007)
- Hunter, F., Biver, S., Fuqua, P. . Light science & magic: an introduction to photographic Lighting. , (2015).
- Hendricks, J. C., et al. Rest in Drosophila is a sleep-like state. Neuron. 25 (1), 129-138 (2000).
- Rieger, D., et al. The fruit fly Drosophila melangaster favors dim light and times its activity peaks to early dawn and late dusk. Journal of Biological Rhythms. 22 (5), 387-399 (2007).
