في العمل التالي، ونحن وصف الخطوات المتتالية اللازمة لإنشاء بنك حيوي كبير من سرطان القولون والمستقيم والبنكرياس.
في ضوء المعرفة المتزايدة حول الخصائص الفردية و عدم تجانس السرطانات ، يتطلب المجال الناشئ للطب الشخصي منصة للبحث قبل السريري. على مدى السنوات الأخيرة، أنشأنا بنك حيوي من سرطان القولون والمستقيم وسرطان البنكرياس التي تتألف من أنسجة الورم الأولية، والأنسجة العادية، والسايا، وخلايا الدم الطرفية المعزولة (PBL)، xenografts المستمدة من المريض (PDX)، فضلا عن خطوط الخلايا السرطانية الأولية والثانوية. منذ أنسجة الورم الأصلي محدودة ومعدل إنشاء خطوط الخلايا السرطانية الأولية لا تزال منخفضة نسبيا، PDX تسمح ليس فقط الحفاظ على وتوسيع بيوبانك ولكن أيضا توليد خطوط الخلايا السرطانية الثانوية. وعلاوة على ذلك، وقد ثبت أن نماذج PDX لتكون مثالية في نموذج vivo لاختبار المخدرات قبل الفحص. ومع ذلك، يتطلب العمل المصرفي البيولوجي إعداداً دقيقاً ومبادئ توجيهية صارمة وبنية تحتية منسجمة جيداً. يتم جمع عينات استئصال القولون أو استئصال الاثنيات أو استئصال الانبثاثات مباشرة بعد استئصالها ونقلها إلى قسم علم الأمراض. احترام أولوية تقرير الهدولوجي غير المتحيز ، بناء على تقدير الطبيب الشرعي الذي يقوم بالتشريح ، يتم حصاد قطع الورم الصغيرة والأنسجة غير الورمية.
يتم التخلص من الأجزاء النخرية ويتم قطع أنسجة الورم المتبقية إلى مكعبات صغيرة ومتطابقة ويتم تقديمها للتبريد لاستخدامها لاحقًا. بالإضافة إلى ذلك، يتم مفر جزء صغير من الورم وتوتر لثقافة الخلايا السرطانية الأولية. بالإضافة إلى ذلك، يتم معالجة عينات الدم المسحوبة من المريض قبل الجراحة وما بعدها، للحصول على المصل و PBLs. بالنسبة لـ PDX engraftment ، يتم إذابة العينات المبردة وزرعها تحت الجلد في أجنحة الفئران المناعية. و PDX الناتجة عن قرب تَلخيص الأنسجة للأورام “المانحة” ويمكن استخدامها إما ل xenografting اللاحقة أو cryopreserved للاستخدام في وقت لاحق. في العمل التالي، ونحن وصف الخطوات الفردية لخلق، وصيانة وإدارة البنك الحيوي كبير من سرطان القولون والمستقيم والبنكرياس. وعلاوة على ذلك، فإننا نسلط الضوء على التفاصيل والمحاذير الحاسمة المرتبطة بالبنوك الحيوية.
في السنوات الأخيرة، أدت المعرفة المتراكمة لخصائص السرطانات السريرية والجينية إلى تصور السرطان كمرض فردي غير متجانس. وبالتالي، اكتسب توصيف الطفرات للأورام، بالإضافة إلى الميزات السريرية والمرضية، أهمية لاتخاذ القرارات السريرية وتم تطوير العديد من العلاجات المستهدفة لمختلف التعديلات الجزيئية. على سبيل المثال، يمكن التنبؤ بفعالية cetuximab في علاج سرطان القولون والمستقيم من خلال تحليل حالة الطفرات KRAS وPIK3CA 1. الطب الدقيق يهدف إلى اتباع نهج مصمم خصيصا لتوفير أعلى استجابة العلاج في كل مريض وتجنب سمية العلاجات غير المهينة2. تحتوي البنوك الحيوية على الأنسجة والدم والمواد البيولوجية الأخرى لمرضى السرطان ، والتي ترتبط بالبيانات السريرية ، وبالتالي فهي أداة ممتازة لأبحاث السرطان الترجمية. نظراً للعدد الكبير من العينات السريرية، تمكن البنوك الحيوية من الكشف عن الطفرات النادرة، ولكن يحتمل أن تكون قابلة للأدوية، والتي توفر فرص علاج جديدة للمريض الفردي3.
لتغطية أوسع قدر ممكن من طيف البحوث الأورام، ونحن لم تقييد نشاطنا على حصاد العينة وحدها، ولكن ركزت على إنشاء خطوط الخلايا السرطانية المستمدة من المريض وxenografts (PDX). تبقى خطوط الخلايا 2D التقليدية حجر الزاوية في البحوث في المختبر وهي الخيار الرئيسي لفحوصات المخدرات على نطاق واسع4,5. وعلاوة على ذلك، غالبا ما يكون تحليل خط الخلية أسهل وأرخص وأكثر سهولة. بالإضافة إلى ذلك ، منذ المريض المستمدة من الخلايا الليمفاوية في الدم الطرفية (PBL) متوفرة ، كما يمكن دراسة علم المناعة الورم في المختبر6. ومع ذلك، فإن غالبية الأدوية المطورة حديثا مع الأثرية قبل السريرية واعدة في الخلية القائمة في المختبر أو في التجارب الحية، أظهرت نتائج مخيبة للآمال في التجارب السريرية7. في المقابل، وقد عكست الدراسات قبل السريرية على أساس PDX في الدراسات الجسمية النشاط السريري للعوامل antineoplastic أكثر من ذلك بكثيربأمانة 8. منذ أنسجة PDX يعكس عن كثب الخصائص النسيجية والجزيئية للورم المانح، نماذج PDX هي وسيلة جيدة لنشر كميات محدودة جدا في كثير من الأحيان من أنسجة الورم قابلة للحياة للحفاظ على سلامة البنك الحيوي والسماح لتبادل العينات بين مجموعات البحوث والمؤسسات. وعلاوة على ذلك، يمكن تأسيس خطوط الخلايا السرطانية المستمدة من أنسجة PDX أسهل بكثير من خطوط الخلايا السرطانية الأولية9. في السنوات الأخيرة، أنشأت مجموعة العمل لدينا متكاملة متكاملة القولون والمستقيم والبنكرياس السرطان البيولوجية عن طريق توحيد الخطوة وتعظيم تدفق العمل لجميع العينات البيولوجية في السؤال(الشكل 1).
الشكل 1: سير العمل وتنظيم البنك الحيوي الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
إن توليد بنك حيوي حي يفترض مسبقاً، إلى جانب الامتثال للأنظمة القانونية للخصوصية والقانون الطبي ورعاية الحيوان، وجود بنية تحتية جيدة وفريق منسق تنسيقاً جيداً. وقد ثبت من المفيد أن تشارك مباشرة جزءا من الطاقم الجراحي في إجراءات البحث، لأنها يمكن أن تقيم بشكل جيد جدا مدى ملاءمة المريض الفرد للتبرع الأنسجة. وعلاوة على ذلك، يميل المرضى إلى الموافقة على البنوك الحيوية بشكل أكثر تواترا، عندما يتم الحصول على موافقتهم الخطية في غضون مناقشة الموافقة المستنيرة الجراحية. لتوفير الوقت والموارد، لا ينبغي اختيار الحالات التي من المفترض أن تسفر عن كميات غير كافية من أنسجة الورم للبنوك الحيوية. عندما يتعلق الأمر بالحصول على العينة ، فإن مقولة “التواصل هو المفتاح” هي حقيقة بسيطة ، ولكن غالبًا ما يتم تجاهلها. يستغرق فقط ممرضة مسرح واحدة غير مطلعة أو زميل الجراحية لتدمير الحق في العينة في البداية من خلال المضي قدما كالمعتاد وإضافة الفورمالديهايد إلى عينة استئصال. ولذلك، من الأهمية بمكان أن يتعرف كل فرد من الموظفين المعنيين على نظام العمل الموحد للبنوك الحيوية. يجب أن يكون لاحظت الجراحين في اليوم السابق والحق في بداية العملية حول جمع الأنسجة المقررة. وعلاوة على ذلك، ينبغي إبراز الحالات المختارة للبنوك الحيوية في الخطة الإلكترونية أو الإلكترونية. وينبغي أن يتم حصاد الأنسجة من العينة الجراحية من قبل أخصائي علم الأمراض. أولاً ، سيضمن هذا أن حصاد الأنسجة لا يتعارض مع التقرير المرضي النهائي. ثانيًا، يزيد هذا من احتمال تلقي الأنسجة بكميات كافية من الأنسجة السرطانية القابلة للحياة. خاصة في سرطان البنكرياس مع رد فعل دفكي واضح والمناطق النخرية المتكررة ، من الصعب تحديد الأجزاء القابلة للحياة بشكل جُعمي للعين غير المدربة. وكستثناء لهذه القاعدة، كتل الأنسجة من الانبثاث الكبدي أو الوثنية الوثنية الكبيرة، في بعض الأحيان يمكن استئصال “الطاولة الخلفية” من قبل الجراح، إذا كان يمكن تحديد الهوامش الجراحية العيانية. سرطان المستقيم استئصاله عن طريق استئصال الميزوركتال الكلي (TME) ، قد لا تكون مناسبة للبنوك الحيوية ، لأن حصاد الأنسجة من العينة التي تم استئصالها قبل تضمين البارافين قد تتداخل مع تقييم جودة TME. بدلا من ذلك، يمكن الحصول على الأنسجة للبنوك الحيوية عن طريق خزعة عبر الشرج من سرطان المستقيم.
معدلات إنشاء الثقافات الخلية الأولية المستمدة من الورم الأصلي منخفضة عموما. يمكن أن يكون من المحتمل أن يتم تأسيس البيانات الموروثة الخلايا الثانوية المشتقة من PDX بنجاح. نوصي باختبار وسائل الإعلام المختلفة لكل حالة واستخدام مكملات المضادات الحيوية لالممرات الأولى للحد من التلوث إلى أدنى حد لأن الأنسجة التي يتم حصادها نادرا ما تكون معقمة. بعد الانتشار الناجح، ينبغي تأكيد كل خط خلية على حدة كخط خلية سرطانية بواسطة تحليل FACS واختباره بانتظام للتلوث الميكوبلازما. لاستبعاد التلوث المتبادل، من المستحسن إجراء تحليل منتظم لـ STR. وتجدر الإشارة إلى أن بروتوكول إنشاء خطوط الخلايا الأولية والثانوية يخضع باستمرار للتحسين. ومن الواضح أن التفاصيل المتعلقة بتكوين وسائط الإعلام الواحدة ومعدلات نجاحها تتجاوز نطاق هذا العمل وستنشر بشكل منفصل.
لPDX engraftment, يمكن زرع أنسجة الورم إما مباشرة بعد استئصال أو cryopreserved في مصل العجول الجنينية مع 10٪ DMSO أو وسائل الإعلام تجميد مماثلة لتأخر زرع. زرع مباشرة على أنسجة الورم الحصاد يضع ضغطا على موظفي الخدمات اللوجستية والمختبر، ونتائج xenografting بعد حفظ التبريد ليست أدنى في جميع 10. وعلاوة على ذلك، حضانة الأنسجة في Matrigel قبل زرع الورم، يزيد بشكل كبير معدلات engraftment12. نوصي بتأخر الحفر بعد اكتشاف مرضي محدد والتخلص الفوري من عينات الأنسجة التي تم جمعها خطأً. منذ معدل نجاح engraftment الأولية يزيد مع نقص المناعة من الماوس المتلقي، ونحن نميل إلى استخدام الفئران NSG لمرور PDX الأولى جدا. بعد أول نجاح PDX engraftment، يمكن وينبغي أن تستخدم الفئران NMRInu/nu لممرات لاحقة وتوسيع الأنسجة. هذه السلالة هي أكثر قوة وأرخص وأسهل في التكاثر مقارنة مع NSG أو سلالات المناعة المماثلة ، ولكنها لا تزال تظهر معدلات معقولة للانجرافت. وعلاوة على ذلك، فإن التعري يسهل الزرع ورصد نمو الورم. لزيادة معدلات engraftment في الممرات اللاحقة، نوصي النقل المباشر للأنسجة PDX حصادها حديثا لاستضافة الفئران كلما كان ذلك ممكنا، وخاصة بالنسبة لبطء النمو PDX والحالات مع انخفاض معدل نجاح engraftment الأولية. كولينز ولانغ استعرض مؤخرا 14 دراسات من إنشاء PDX القولون والمستقيم وأفادت معدلات engraftment تتفاوت من 14 إلى 100٪ مع متوسط معدل إنشاء PDX من 68٪، وهذا الأخير يتفق مع النتائج التيتوصلنا 13. تمشيا مع الأدب, لاحظنا انخفاض معدلات إنشاء البنكرياس مقارنة بسرطان القولون والمستقيم PDX14. بغض النظر عن سلالة الماوس المضيف والوريم الكيان، والخروج من الإنسان، Epstein-Barr فيروس (EBV) المرتبطة B-الخلايا اللمفوما والأورام اللمفاوية مورين في الجانب زرع يشكل مأزقا هاما15،16. إذا لم يتم التعرف عليها ، يمكن لمثل هذه الأورام “تلويث” المقاطع اللاحقة وبالتالي إرباك النتائج المتتالية. غير عادية نمو PDX السريع وتورم في عنق الرحم, الغدد الليمفاوية الإبطية والأربية هي مؤشرات قوية لنمو سرطان الغدد الليمفاوية مورين, ولكن الفحص النسيجي المنتظم من PDX ومع ذلك من المستحسن. وعلاوة على ذلك، ينبغي اختبار التوافق الجيني بين PDX والمريض المانح المقابل بانتظام عن طريق تحليل STR. ومن الناحية المثالية، ينبغي ربط البنك الحيوي بقاعدة بيانات سريرية تضم خصائص المرضى (المعلومات العامة، والبقاء على قيد الحياة، والانتكاس، والعلاج، والأورام الثانوية، وما إلى ذلك). نظرًا للأنظمة القانونية لحماية الخصوصية وعدم وجود قاعدة بيانات مجهولة المصدر ، يتم إدارة مجموعة البيانات السريرية الخاصة بنا وتحديثها يدويًا من قبل الأطباء المتعاونين.
وفي حين أن المصارف الأحيائية التقليدية تقتصر على بحوث المرصد، فإن المصرف الحيوي الحي يتيح الفرصة للتدخلات في المختبر وفي المختبرات الحية. خطوط الخلايا المستمدة من المريض هي أداة هامة للبحوث الأساسية، وارتفاع الإنتاجية فحص الأدوية وتقييم وكلاء الأدوية الجديدة4. نماذج PDX المقابلة، ومع ذلك، هي ذات أهمية متزايدة، لأنها تُستقَم عن كثب الأنسجة من الورم الأصلي17،18 وتظهر استقرار وراثي عالية على عدة مقاطع19،20. أثبت بنك PDX الحيوي نفسه كمنصة ممتازة للبحث قبل الكلينيكي والأساسي6،21. وعلاوة على ذلك، منذ مجموعات PDX كبيرة تعكس بشكل كاف التجانس بين الأفراد من السكان المرضى، وPX نهج التجارب السريرية (PCT) (حيوان واحد لكل نموذج لكل علاج) اكتسبت أهمية لتطوير المخدرات لأنه يسمح التنبؤ المؤمنين من الاستجابة السريرية للأدوية الجديدة ونظام الجمعبين 8. كما نقوم حالياً بتقييم العقاقير التجريبية الجديدة في تجارب معاهدة التعاون بشأن البراءات الصغيرة.
على الرغم من هذه النتائج الواعدة، وسيطة مدة إنشاء 12.2 الشهر، يعوق التطبيق السريري لنماذج PDX ك “الفئران الرمزية” لاختبار خيارات العلاج السرطاني، على الأقل بالنسبة لأولئك المرضى الذين يحتاجون إلى العلاج المساعد الفوري أو حتى neoadjuvant22. عيب إضافي من نماذج PDX القياسية هو عدم قابلية الاستخدام لاختبار العلاج المناعي بسبب نقص المناعة في الفئران المضيفة. للتغلب على هذه القيود، تم تطوير العديد من سلالات الماوس “الأنسانة”. هذه الفئران هي المناعية بشكل كبير، ولكن يمكن إعادة تشكيلها مع أنواع مختلفة من الخلايا المشتقة من نخاع العظام البشرية أو CD34+ الخلايا الجذعية الدموية اللاحقة لPDX خارج23، مما يسمح بتقييم السمية الخلوية التي تتوسطها الخلايا الليمفاوية والعلاج استجابة لعلاج مثبطات نقطة التفتيش المناعية24،25.
في السنوات الأخيرة، ظهرت الأجهزة العضوية المشتقة من المريض (PDO) كنماذج سرطانية مهمة تتنافس مع PDX. مشتقة من قطع الورم سليمة ومثقفة في سقالة مصفوفة خارج الخلية، وهذه الهياكل ثلاثية الأبعاد تعكس عن كثب الخصائص الهستوولوجي والوراثية للورم الأصلي. إمكانية التوسع على المدى الطويل والكوند إلى الحفظ يجعل PDO تكملة مثالية من26 ، 27من27. بالإضافة إلى معدل إنشاء مرتفع نسبيا, وقد تم الإبلاغ عن التنبؤ استجابة المخدرات موثوق بها لPDO من عدة كيانات الورم28. وعلاوة على ذلك، وقد ولدت حتى من خلايا الورم تعميم PDOs وأيضا إنشاء في وقت واحد من organoids من الأنسجة السليمة المقابلة من الممكن، مما يسمح لتقييم السمية ذات الصلة بالعلاج على أساس المريض الفردي29،30. ومع ذلك ، بالمقارنة مع الثقافات التقليدية الخلية 2D ، والثقافة العضوية هو الوقت والموارد المستهلكة ومركبات المصفوفة الاصطناعية خارج الخلية يمكن أن تتداخل مع بعض الإجراءات التحليلية31. وعلاوة على ذلك، فإن الأورام العضوية السرطانية عرضة للإفراط في النمو من خلال نمو أسرع، والأعضاء غير الخبيثة المستمدة من ظهارة صحية30. بسبب نقص الستروما والأوعية الدموية والخلايا المناعية ، فإن PDOs غير قابلة للتطبيق في الغالب لاختبار العوامل المناعية المضادة لمناعة الجهاز المناعي. حتى الآن، طرق جديدة زراعة تسمح نموس من الأورام microenvironment في المختبر،مما يجعل PDOs منافس حقيقي لنماذج PDX32. في المستقبل القريب، فإن نماذج الأورام بين المريض والأفراد، جنبا إلى جنب مع أدوات وراثية قوية مثل تسلسل الجيل القادم، ونأمل أن تمهد الطريق للطب الدقيق الحقيقي ونهج العلاج مصممة خصيصا.
The authors have nothing to disclose.
نحن نرحب بجيني بورمايستر، مساعدنا الرسومي، لتسجيل وتحرير الفيديو. وعلاوة على ذلك، نشكر زملاءنا في قسم الجراحة والمرض على التعاون الطويل الأمد. ونود أيضا أن نشكر ماركوس مولر، مدير الإنتاج في مركز تكنولوجيا المعلومات والإعلام، جامعة روستوك، لتوريد معدات التسجيل الصوتي وصقل جودة الصوت.
التمويل: المؤسسة الألمانية لمساعدة السرطان (DKH e.V.) ، وعدد المنح 108446 ، والمنحة رقم TBI -V-1-241-VBW-084 من ولاية مكلنبورغ فوربومرن مولت جزئيا هذا البحث.
Bacillol® AF; 1L | Bode, Hartmann | REF 973380 | desinfection |
PP centrifuge tube, 15ml; sterile | Greiner Bio One | GBO Cat. No.:188271 | centrifuge tube |
PP centrifuge tube, 50ml, sterile | Sarstedt | Order number: 62.547.254 | centrifuge tube |
BD DiscarditTM II Syringe 20ml | BD | REF 300296 | blood collection |
Serum 7,5ml Sarstedt Monovette | Sarstedt | Item number: 01.1601 | blood collection |
serological Pipette 10ml | Sarstedt | REF 86.1254.001 | liquid transfer |
Pipetboy ratiolab® accupetta | Ratiolab | Item number: RL3200300 | liquid transfer |
PIPETBOY acu 2 | Integra Biosciences | VWR Cat.No: 613-4438 | liquid transfer |
DPBS; w/o Ca & Mg | Pan Biotech | Cat. No.: P04-36500 | washing |
Pancoll human | Pan Biotech | Cat. No.: P04-60500 | density gradient centrifugation |
DMEM/F12 (Dulbecco’s Modified Eagle Medium) | PAN Biotech | Cat. No.: P04-41500 | cell cultivation |
FBS Good Forte (Filtrated Bovine Serum) | PAN Biotech | Cat. No.: P40-47500 | cell cultivation |
L-Glutamine 200mM | PAN Biotech | Cat. No.: P04-80100 | cell cultivation |
Trypsin / EDTA | PAN Biotech | Cat. No.: P10-023100 | cell cultivation |
DMSO (Dimethyl Sulfoxid for cell culture) | PanReac AppliChem | VWR Cat.No: A3672.0250 | cell freezing |
Freezer Medium (FCS with 10% DMSO) | selfmade | — | cell freezing |
cryotube- CryoPure 2ml | Sarstedt | 72380 | cell freezing |
6-Well cell culture plate; steril; with lid | Greiner bio-one | Cat.-No.: 657 160 | cell cultivation |
Petri dish 92 x 16 mm, PS, without cams | Sarstedt | Cat. No.: 82.1472.001 | tissue preparation |
sterile surgical blades | B.Braun (Aesculap) | REF BB510 | tissue preparation |
BD DiscarditTM II Syringe 10ml | BD | REF 309110 | tissue preparation |
cell strainer; yellow; 100µm | Falcon | REF 352360 | tissue preparation |
CoolCell | biocision | Item number: 210004 | cooling container with -1°C/min |
Dewar transport vessel type 27 B, 2 l, 138 mm | KGW | Cat. No.: HT39.1 | transport system |
Pipette tip 200µl | Sarstedt | REF 70.760.002 | liquid transfer |
Filter tip 1000µl | Sarstedt | REF 70.762.411 | liquid transfer |
Pipette 200µl, yellow | Eppendorf | Cat. No.: 3121 000.082 | liquid transfer |
Pipette 1000µl, blue | Eppendorf | Cat. No.: 3121 000.120 | liquid transfer |
incubator BB 6220 CU | Heraeus | Cat.-No.: 51012839 | cell cultivation |
heating plate PRÄZITHERM | Harry Gestigkeit GmbH | — | heating |
Microscope Zeiss Primo Vert | Carl Zeiss MicroImaging GmbH | Serial number. 3842000839 | imaging cell cultures |
Sterile bench Safe flow 1.8 nunc | nunc GmbH & Co. KG | — | sterile working bench |
freezer -80°C | Kryotec-Kryosafe GmbH | — | sample storage |
Electronic balance MP-300 | Chyo | — | Scale |
BD Micro-fine, U100 insulin syringe | BD | REF 324826 | injection anesthetic |
Rompun 2%; 25ml | Bayer | approval number: 6293841.00.00 | anesthesia |
Ketamin 100 mg/ml, 25ml | CP-Pharma GmbH | approval number: 401650.00.00 | anesthesia |
GES3S Reader | Datamars | not available | RFID reader |
ISO-Transponder FDX-B (1,4x8mm) | Peddymark | — | RFID chip |
Cotrim-ratiopharm® Ampullen SF 480 mg/5 ml | Ratiopharm | PZN-03928197 | antibiotic drinking water |
Heating plate #FM-20 42x28cm | Dragon | — | heating |
Heating lamp | Electric Petra, Burgau | — | heating |
Ointment for the eyes and nose (5% Dexpanthenol) Bepanthen | Bayer | PZN-01578675 | Eye protection |
anatomical tweezer | B.Braun Aesculap | BD21 OR | surgical instruments |
surgical tweezer | B.Braun Aesculap | BD50 1 R | surgical instruments |
scissors | B.Braun Aesculap | BC05 6R | surgical instruments |
needle holder | B.Braun Aesculap | BH1 1 OR | surgical instruments |
Prolene 5-0 | Ethicon | XN8870.P32 | surgical suture material |
Opsite moisture vapour permable spray dressing | Smith&Nephew | REF 66004978, PZN- 02063507 | surgical suture material |
Adhesive aperture drape | Barrier | REF 904622 | sterile OP tissue |
gauze swap Gazin®; steril; 10×10 cm | Lohmann&Rauscher | REF 18506 | sterile OP tissue |
Raucotupf cotton tipped applicators | Lohmann&Rauscher | REF 11969 | applicator |
Corning® Matrigel Basement Membrane Matrix | Corning | Cat.-No.: 354234 | Basement Membrane Matrix |
iodine solution Braunol (7,5g povidone iodine) | B.Braun Melsungen AG | Item number: 18839 | desinfection |
MACS® Tissue Storage Solution | Miltenyi Biotec GmbH | Order No.:130-100-008 | storage solution |
Formafix 4% | Grimm med. Logistik GmbH | Item number: F10010G | fixation solution |
Software FreezerworksBasic | Dataworks Development, Inc | — | sample organization |
Zebra TLP 2844 printer | Zebra | — | label printer |