في Vivo العدوى مع الأمازون الليشمانيا لتقييم الفش الطفيلي في الفئران

الليشمانيات هي الأمراض المعدية الطفيلية المنتشرة في جميع أنحاء العالم التي تمثل تحديات هامة في البلدان النامية، ومعترف بها كواحدة من أهم الأمراض المدارية المهملة من قبل منظمة الصحة العالمية^1،2. تتميز الليشمانيات بمظاهر جلدية و/ أو مخاطية و / أو حشوية. وعادة ما يكون سبب داء الليشمانيات الجلدي من قبل L. amazonensis, L. mexicana, L. braziliensis, L. guyanensis, L. major, L. tropica و L. aethiopica³. هذا الشكل من المرض هو في كثير من الأحيان الشفاء الذاتي في البشر بسبب تحريض الاستجابة المناعية الخلوية واقية. ومع ذلك ، قد تفشل الاستجابة المناعية الخلوية ، ويمكن أن يتطور المرض إلى انتشار داء الليشمانيات الجلدي^4،5. لا يوجد لقاح متاح بسبب التنوع بين أنواع الليشمانيا والخلفيات الوراثية المضيفة^6،7. خيارات العلاج محدودة أيضا لأن معظم الأدوية المتاحة حاليا هي إما مكلفة، سامة، و / أو قد تتطلب العلاج على المدى الطويل^8،9. الى جانب ذلك، كانت هناك تقارير عن مقاومة الدواء ضد العلاجات المتاحة^10،11.

العامل المسبب للليشمانيات هو طفيلي الليشمانياالبروتوزواني. يقدم الطفيلي شكلين مورفولوجية متميزين في دورة حياته: البروتماستيوجوت ، الشكل المشوه الموجود في ذبابة الوعيد. وamastigotes، شكل داخل الخلايا وجدت في vacuoles الطفيلية من الضامة المضيف الثدييات^12،13. أماستيوجوتس’ القدرة على غزو, البقاء على قيد الحياة, وتكرار على الرغم من آليات الدفاع من الضامة المضيف الفقارية تخضع للعديد من الدراسات^14,15,16,17. ونتيجة لذلك، كانت العديد من المجموعات البحثية تصف في المختبر تحليل العدوى الضامة لتقييم تأثير عوامل بيئية محددة، فضلا عن الطفيليات والجينات المضيفة على العدوى الطفيلية. يقدم هذا الطرح العديد من المزايا، مثل القدرة على تكييف الدراسات مع شكل إنتاجية عالية، وفترة زمنية أقصر نسبيا للحصول على النتائج، وانخفاض عدد الحيوانات المختبرية التي ضحت^{بـ 18.} ومع ذلك ، فإن نتائج المقالات المختبرية محدودة لأنها لا تتكرر دائمًا في دراسات الجسم الحي^{14،19،20،21.} في التجارب في الجسم الحي توفر نظرة عامة فيزيولوجية نظامية للتفاعل المضيف الطفيلي ، والتي لا يمكن محاكاة كاملة من خلال المقالات المختبرية. على سبيل المثال ، يمكن إجراء الدراسات المناعية من خلال الاختبارات الكيميائية المناعية من أقسام أنسجة لوحة القدم التي تم جمعها أو حتى من الغدد الليمفاوية البوليتية لتحليل الخلايا المناعية المستردة^22.

وغالبا ما تستخدم الحيوانات كنموذج للأمراض البشرية في البحوث البيولوجية والطبية الحيوية لفهم أفضل للآليات الفسيولوجية الكامنة وراء الأمراض^23. في حالة داء الليشمانيات ، يؤثر الطريق أو الموقع أو جرعة التطعيم على نتيجة المرض^{24،25،26،27.} وعلاوة على ذلك ، فإن قابلية العدوى في البشر والفئران ومقاومتها تنظمها الخلفيات الوراثية للمضيف والطفيلي^4،5،22،28،^29،30،31. فئران BALB/c معرضة بشدة للعدوى الجلدية ل. الأمازون، مما يظهر تطور ًا سريعًا للمرض مع انتشار الطفيليات إلى الغدد الليمفاوية والطحال والكبد^32. كما قد تقدم المرض إلى الانبثاث الجلدي، يمكن أن تكون العدوى قاتلة. في المقابل ، غالبًا ما تتطور فئران C57BL/6 إلى آفات مزمنة مع أحمال طفيلية مستمرة في الملوثات الضارة بمتلازمة الأمازون L. ³³. وبالتالي، L. عدوى الأمازون مع هذا النوع من الفئران خاصة وقد اعتبرت نموذجا ممتازا لدراسة الأشكال المزمنة من داء الليشمانيات الجلدي في البشر، لأنه يحاكي تطور المرض أفضل من التهاب الفئران BALB/c نموذج^5،34.

وبالتالي ، نقترح أن المورين في عدوى الجسم الحي هو وسيلة مفيدة للدراسات الفسيولوجية الليشمانية المنطبة المطبقة على الأمراض البشرية ، مما يسمح برؤية جهازية للتفاعل بين المضيف والطفيلي. إعادة النظر في المقالات الراسخة²²، نقدم هنا بروتوكولًا مجمعًا خطوة بخطوة من عدوى الجسم الحي لفئران C57BL/6 مع L. amazonensis التي تضم تمايز الطفيليات إلى amastigotes الفأسية ، تلقيح الفئران الجلدية ، تطور الآفات ، وتحديد حمولة الطفيليات. يمكن تكييف هذا البروتوكول مع سلالات الفئران الأخرى وأنواع الليشمانيا التي تسبب الليشمانيات الجلدية. في الختام ، فإن الطريقة المعروضة هنا حاسمة في تحديد أهداف ولقاحات جديدة للأدوية المضادةللليشمانيا ، وكذلك في الدراسات الفسيولوجية للاستجابات المناعية والأيضية المضيفة لعدوى الليشمانيا.