נשימה אוסף ילדים למען גילוי סמן מחלה

סמנים ביולוגיים יכולות להניב מידע חיוני על תהליכים ביולוגיים נורמליים ופתולוגיים שעשויים לתרום קלינית לזיהוי המחלה. לאחרונה, יש כבר עניין גובר בהערכה של נשימה שיכללו חומרים נדיפים כמו סמנים ביולוגיים למגוון רחב של מצבי מחלה, כולל זיהום, הפרעות מטבוליות סרטן ¹. והבל הפה מכיל רמות לכימות של תרכובות אורגניות נדיפות (Voc), תרכובות אורגניות נדיפות למחצה, microbially נגזרת חומר (למשל, חומצות גרעין מפני חיידקים ווירוסים). המטרה המרכזית של ניתוח והבל הפה הוא להשיג תובנה המצב של מצב רפואי ו/או חשיפות סביבתיות לא פולשני. ישנן שיטות שונות עבור איסוף וניתוח והבל הפה, בהתאם המרכיבים של עניין. כיום יש אין שיטה אוסף מתוקננת והבל הפה, אשר מסבך ניתוח השוואתי של תוצאות מעבר ללימודים. האחדת נשימה אוסף נהלים חיוני, כמו הליך הדגימה עצמה יש השפעה רבה על התוצאות במורד הזרם של נשימה ניתוחים.

במחקרים רבים, מאחר נשימה נשימה הדגימה הוא המועסקים^2,3. דגימה זו כרוכה השמטת את החלק הראשוני של והבל הפה (“שטח מת”), על מנת ללכוד את האוויר מעדיפים בסוף מחזור נשימה. היתרון של אסטרטגיה זו היא כי מצמצם את רמות VOC אקסוגני (למשל, איכות הסביבה Voc), תוך העשרת עבור Voc אנדוגני, מטופל ספציפי. שיטה זו אינה כוללת השניות הראשונות של נשיפה מאדם בודד לפני איסוף המדגם נשימה. חוקרים אחרים המועסקים חיישן לחץ כדי להפעיל את הדגימה במהלך תקופה מוגדרת מראש של תפוגה^4,5. מכיוון חיישני לחץ דורשים הנדסה מורכבים, שיטה חלופית זו דורשת מכשיר דגימה ייעודי ויקר יחסית.

דגימה נשימה בילדים יכול להיות מאתגר במיוחד. מופעיו היא ילדים צעירים עשויים להיות מסוגלים לשתף פעולה עם פרוטוקולים עבור מרצון נשיפה של אוויר “שטח מת”. מסיבה זו, קל יותר להשיג נשימה נשימה מעורבת של ילדים. אזהרה גדולה עם דגימות נשימה נשימה מעורבות זאת, הסיכון של זיהום סביבתי, החומרי. לכן, הכדאיות של אוסף ילדים היא דאגה נהיגה בשטח.

בנוסף, שיטות איסוף, אחסון של דגימות נשימה יכול להשפיע גם על איכות דגימת. הלחות הגבוהה exhalate נשימה, ריכוז נמוך במיוחד (חלקים-לכל-טריליון) נשימה אורגניים נדיפים תרכובות להפוך נשימה דגימות רגישים במיוחד לבעיות הקשורות לאחסון^6,7. למרות הפוטנציאל הגדול של טכניקות בזמן אמת כמו פרוטון העברה התגובה-ספקטרומטריית (PTR-MS), GC-MS עדיין תקן הזהב לניתוח של דגימות נשימה. מאז GC-MS ניתוח דוגמאות הנשימה הוא שיטת מנותק, זה משולב עם ריכוז קדם שיטות כגון צינורות התרמי desorption (TD), מיקרו-מיצוי מעבדתי והתקני מלכודת המחט. לפני קדם ריכוז, דגימות נשימה צריך להיות מאוחסנים באופן זמני בפולימר שקיות⁸. פולימר שקיות פופולריים בשל מחיר מתון שלהם, עמידות טובה יחסית, שימושית. בזמן ייתכן ניתנים לשימוש חוזר בתוך שקיות, זמן ומאמץ נדרשים על מנת להבטיח יעילות ניקוי^7,8. כל סוג תיק מסוים דורש גם נחושה מדעית ושגרות מתוקנן עבור בקרת איכות, שימושית ושחזור.

צינורות TD נמצאים בשימוש נרחב עבור הנשימה ריכוז מראש כי הם ללכוד מספר גדול של שיכללו חומרים נדיפים, יכול להיות מותאם אישית. החומרים סופג בהם אריזה צינורות TD עשוי להיות מותאם כדי שיכללו חומרים נדיפים מסויימת עניין ויישומים מסוימים. TD צינורות באופן משמעותי לשפר את הנוחות של מחקרים סמן נשימה, במיוחד באתרים מרחוק שדה, כי TD צינורות בבטחה לאחסן שיכללו חומרים נדיפים נשימה במשך לפחות שבועיים, בקרבת תחבורה³.

במאמץ לתקנן נשימה בילדים אוסף עבור גילוי סמן, כאן אנו מתארים שיטה פשוטה כדי לאסוף את הנשימה של ילדים צעירים. כדי להמחיש את התוצאות נציג של הפרוטוקולים מיושמים, מוצגים נתונים מבטל את שזוהה מ פוסקת קוהורטה של הילדים (גיל 8-17) שעברו הערכה למחלה ללא אלכוהול חומצת שומן בכבד (אלכוהולי NAFLD). תוצאות מלאות וניתוח של מחקר זה ידווחו בפרסום מאוחר יותר. בעבודה זאת, מדווחים ערכת משנה נתונים כדי להדגים את היישום של פרוטוקול שלנו. בקצרה, הילדים הורו נשוף בדרך כלל באמצעות פייה לשקית פולימר, כאילו “לפוצץ בלון”. התהליך חוזר על עצמו 2 – 4 פעמים עד 1 ליטר נשימה נאסף. המדגם הוא לאחר מכן הועבר לתוך צינור TD, המאוחסנים ב 5 ° C לפני ניתוח GC-MS.