정위 적 입양 전송 Orthotopic 인간 세포종 님 Xenografts Murine 모델에서 세포 독성 면역 세포의

GBM (누가 학년 4 astrocytoma), 성인에서 가장 자주 하 고 공격적인 주 뇌 암 이다. 수술과 라디오 화학 요법을 결합 하는 적극적인 치료에도 불구 하 고 GBM는 매우 빈약한 예 지 (14.6 개월 및 2 년 사망률 > 73%의 메디아 생존)¹와 관련 남아 있습니다. 이 몇 가지 효율적인 치료 발전²지난 10 년 동안 검증 된 증거. 더 효과적인 치료 전략^3,,45의 디자인에 대 한 후보자, 중 immunotherapies⁶ 현재 탐험 추적 하 고 매우 침략과 라디오/항 암 치료-방지 종양 제거 셀, 신속 하 고 치명적인 종양 재발⁷에 그들의 주요 기여에 대 한 의심. 다양 한 잠재적인 면역 목표 식별 및 제안 immunotherapies, 자연 관련 된 또는 수정 된 αβ 또는 GBM 특정 종양 항 원 등 스트레스 유발 분자^{8,9, ϒδ T 림프 톨 했다 10}. 선택한 GBM 반응 면역 세포 이펙터 관리 가능성 잔여 악성의 사이트에 직접 효과 기 림프 톨의 높은 금액을 제공 하는 독특한 기회를 나타냅니다. 이 전략을 지원 하기 위해 우리가 최근에 나타났습니다 orthotopic 기본 인간의 GBM xenografts를 충실 하 게 수행 하는 immunodeficient 마우스에 따라 모델 GBM 환자^9,11에서 뇌 종양의 개발을 정리. 또한, 이러한 모델 adoptively 전송된 수용자 인간 Vϒ9Vδ2T 림프 톨의 강한 antitumor 효율을 보여 주기 위해 사용 되었다.

이 프로토콜 GBM, 수용자 T 림프 톨의 입양 이동에 따라 같은 뇌종양의 정위 적 immunotherapies를 달성 하기 위한 중요 한 실험 단계를 설명 합니다. 문서 쇼: (i) 인간 림프 톨 Vϒ9Vδ2T; 같은 치료 수용자 면역 효과 기 T 세포의 증폭 (ii) 분사;에 대 한 이러한 이펙터 T 림프 톨의 준비 (뇌 종양 근처에서 정위 적 관리를 위한 절차 iii). 이 문서는 또한 정위 적 주입 후 이러한 셀룰러 이펙터의 동작에 대 한 통찰력을 제공합니다.

여기에 제시 된 치료 방법은 20 x 10⁶ effector 세포 당 복용량의 각 뇌 종양 베어링 immunodeficient 마우스에 대 한 주입을 기반으로 합니다. 초기 생체 외에서 확장 단계는 면역 세포의 대량 생산 해야 합니다. 따라서, 일반적인 셀 확장 phytohemagglutinin (PHA-L)를 사용 하 여 수행 됩니다 및 수용자 피더 세포 반구: 건강 한 기증자와 엡 스타인 바 바이러스 EBV 변형 B lymphoblastoid 셀에서 주변 혈액 단 세포 (PBMCs) 라인 (BLCLs), 포함 하는 EBV 문화 비단 B95-8 셀 라인 1 µ g/mL cyclosporin A의 존재에서 표면에 뜨는 생체 외에서 감염에 의해 PBMCs에서 파생 된

GBM 반응 이펙터 면역 세포는 비교 하 고 분석 실험 체 외에 ⁹에서 선택. 이러한 효과 기 세포 활성화 되 고 증폭 된 표준 프로토콜을 사용 하 여 (예를 들어, 인간의 Vγ9Vδ2 T 림프 톨⁹ 또는 인간 항 헤 르 페 스 바이러스 αβ T 림프 톨¹²) 그들의 성격에 따라 정기적으로 > 80%의 최소 순도와 cytometric 분석에 의해 확인. 아래 상세한 셀 확장 프로시저는 다양 한 인간 림프 톨 부분 집합에 적용 됩니다.