Procedimiento transuretral instilación en ratón macho adulto
Summary
La instilación transuretral es un procedimiento difícil y no ha sido bien descrita en la literatura. El objetivo de este manuscrito es describir una técnica para la inserción transuretral de un catéter para la administración intravesical de líquidos con sustancias activas en la vejiga o la próstata en ratones macho adultos.
Abstract
Instilación transuretral puede utilizarse para ofrecer diferentes soluciones con principios activos (p. ej., drogas, productos químicos, bacterias y virus) localmente en la vejiga urinaria para inducir modelos animales de patologías de vejiga o evaluar la efectividad de los tratamientos intravesical. Más roedores modelos de patologías de vías urinarias (LUT) inferiores son inducidos en ratones hembra debido a la facilidad de instilación intravesical de las sustancias a través de la uretra femenina. Sin embargo, debido a las diferencias anatómicas entre el LUT femenina y masculina, instilación transuretral en un ratón macho ha sido considerada un procedimiento muy difícil, y no se ha descrito previamente. En este manuscrito, nos proporcionan una descripción detallada de cómo preparar tubería de polietileno (PE) para la posterior inserción en la uretra de un ratón macho. Además, discutimos los tipos ideales de la tubería de PE a utilizar dependiendo del sitio deseado de la inoculación. Además, se describe punto por punto cómo preparar un animal para un exitoso instilación transuretral evitar lesiones en la uretra y asegurar la entrega de la solución a la ubicación deseada. El procedimiento es iniciado por retraer el prepucio y el glande para exponer la apertura del meato uretral. A continuación, el glande son tomados por Roma fórceps no machacar para estabilizar el pene y la tubería de PE. La tubería de PE se inserta por primera vez en el meatus uretral paralelo al cuerpo animal, entonces su ángulo está ajustado inclinando el catéter para maniobrarlo para seguir la curvatura natural de la uretra. Esta técnica puede utilizarse en modelos murinos inducidos de patologías de vejiga o evaluar la efectividad de los tratamientos intravesical en ratones machos.
Introduction
El enfoque de instilación transuretral se ha utilizado en estudios anteriores como uno de los métodos para crear modelos de roedores de vejiga patologías1,2,3,4 y puede usarse para evaluar la efectividad de los tratamientos locales entregados en ratones. Aunque los modelos animales no pueden recapitular completamente patologías humanas, identificación de los mecanismos subyacentes en los estudios animales proporciona una mejor comprensión de los trastornos humanos de LUT como síndrome de dolor de la cistitis intersticial, vejiga, neurogénico cistitis, cistitis autoinmune e inflamación prostática5.
El procedimiento transuretral instilación realizado en un ratón macho adulto es técnicamente más difícil que la instilación intravesical de un ratón hembra adulto6. La anatomía naturalmente curvada de la uretra masculina junto con su pequeño diámetro hace técnicamente difícil de lograr la inserción transuretral de un catéter. Por lo tanto, instrucciones detalladas para la inducción transuretral de ratón de la infección de vías urinarias6 y LUT inflamación7,8,9,10,11 , 12 , 13 , 14 , 15 vía el catéter insertado en la vejiga se esbozaron anteriormente para ratones femeninos solamente. Este manuscrito tiene como objetivo proporcionar una descripción paso a paso de la técnica de transuretral instilación de sustancias en los ratones machos incluyendo los clips de vídeo, imágenes e ilustraciones. Transuretral instilación variable pueden realizar procedimientos en un ratón macho adulto inocula similar al anteriormente descrito en el ratón hembra7 y combinado con técnicas adicionales tales como grabaciones de Electromiograma de respuestas visceromotor (VMR)16.
Protocol
Representative Results
Discussion
Este manuscrito describe detalladamente un método de instilación transuretral en ratón macho adulto. Área siembra primaria diferencial puede llegar mediante el uso de tubería de PE de diferentes diámetros. PE-50 se recomienda para llegar con éxito a la luz de la vejiga urinaria, mientras que un diámetro mayor que PE-10 se utiliza para llegar a la AP y la SV (Figura 3A-B). Además de la elección del tamaño de la tubería de PE y órgano Diana para la inoculación, o…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Los autores no tienen ningún reconocimiento.
Materials
| BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 10 | BD Medical | 63019-004 | |
| BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 50 | BD Medical | 63019-048 | |
| BD Insyte-N Autoguard/ Angiocath | BD Medical | 311411 | |
| Ethanol (EtOH) | Fisher Scientific | BP2818500 | |
| BD Needle Only 22 Gauge (G) 1 inch | Becton Dickson | 205155 | |
| BD Needle Only 27 Gauge (G) 1/2 inch | Becton Dickson | 305129 | |
| Luer stub, 22 G X 0.5 in / Blunt Needle | Instech | LS22 | |
| Luer stub, 27 G X 0.5 in / Blunt Needle | Instech | LS27 | |
| 6" Long x 2" Wide x 1" Thick, Aluminum Oxide Sharpening Stone / Oil Stone | Norton | 40204034 | |
| Surgical Lubricant Sterile Bacteriostatic Folilpac | Surgilube | 281020543 | |
| Isoflurane | Fluriso | 13985-528-60 | |
| SomnoSuite Low-Flow Anesthesia System | Kent Scientific | SS-01 | |
| Dissecting Forceps, Curved | vwr | 82027-392 | |
| BD 1 ml Syringe | BD Medical | 309626 | |
| India Ink Solution., 0.2% in PBS buffer | Alfa Aesar | J61007 | |
| 8~12 weeks old male C57B/6 Mice | Jackson Lab | #000664 |
References
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