הליך ההתקנה-transurethral עכבר זכר בוגר
Summary
החדרה-transurethral תהליך מאתגר, לא טוב תואר בספרות. מטרתו של כתב יד זה הוא לתיאור טכניקה עבור החדרת צנתר למסירה intravesical של נוזלים עם חומרים פעילים אל תוך שלפוחית השתן ו/או הערמונית בעכברים זכרים בוגרים של-transurethral.
Abstract
החדרה-transurethral יכול לשמש כדי לספק פתרונות שונים עם חומרים פעילים (למשל, תרופות, כימיקלים, בקטריה, וירוסים) באופן מקומי לתוך שלפוחית השתן זירוז מודלים חייתיים של פתולוגיות בשלפוחית השתן או להעריך יעילות הטיפולים intravesical. ביותר מכרסמים מודלים של פתולוגיות בדרכי השתן (LUT) התחתון הם המושרה בעכברים הנשי בשל הקלות של intravesical החדרה של החומרים באמצעות לשופכה הנשית. עם זאת, בשל ההבדלים אנטומיים בין LUT נשי, החדרה-transurethral ב עכבר זכר שסברו שהוא הליך מאוד מאתגר, זה לא תוארה בעבר. כתב יד זה, אנו מספקים תיאור מפורט של איך להכין צינורות פוליאתילן (PE) עבור הכניסה הבאים לתוך השופכה של עכבר זכר. בנוסף, נדון בסוגי צינורות PE כדי לשמש בהתאם האתר הרצוי של חיסון אידיאלי. יתר על כן, אנו מתארים נקודת בנקודה כיצד להכין חיה על החדרה-transurethral מוצלח למנוע פציעה של השופכה ולהבטיח המסירה של הפתרון למיקום הרצוי. ההליך מופעל על ידי מפסק את העורלה, העטרה לחשוף את הפתיחה של meatus השופכה. בשלב הבא, העטרה הם אחז על ידי מלקחיים בוטה שאינו מוחצת לייצב את הפין, לאורך צינור PE. צינורות PE הוכנס לראשונה meatus השופכה מקבילה לגוף בעלי חיים, אז הזווית שלו מכוונן בהטיית הקטטר לתמרן אותו ללכת בעקבות את עקמומיות טבעית של השופכה. טכניקה זו יכולה לשמש המושרה מאתר מודלים של פתולוגיות בשלפוחית השתן ו/או להעריך את האפקטיביות של טיפולים intravesical בעכברים זכרים.
Introduction
הגישה החדרה-transurethral שימשה במחקרים קודמים באחת השיטות ליצירת מודלים מכרסם של שלפוחית השתן פתולוגיות1,2,3,4 והוא יכול לשמש כדי להעריך יעילות הטיפולים באופן מקומי ונמסרו בעכברים. למרות בבעלי חיים לא יכול לסכם באופן מלא פתולוגיות אנושי, זיהוי של המנגנונים שבבסיס במחקרים שנעשו בבעלי חיים מספקת הבנה טובה יותר של הפרעות LUT אנושיים כגון תסמונת כאב דלקת שלפוחית השתן interstitial/שלפוחית השתן, neurogenic דלקת שלפוחית השתן, דלקת שלפוחית השתן אוטואימוניות ו דלקת הערמונית5.
ההליך החדרה-transurethral לבצע על העכבר זכר בוגר הוא מאתגר יותר מבחינה טכנית מאשר intravesical החדרה העכבר נקבה בוגרת6. באופן טבעי מעוקל האנטומיה של השופכה הגברית יחד עם קוטר קטן שלה להקשות טכנית לבצע החדרת קטטר-transurethral. לכן, מפורטות הוראות אינדוקציה-transurethral של זיהום בדרכי השתן העכבר6 ו LUT דלקת7,8,9,10,11 , 12 , 13 , 14 , 15 באמצעות קטטר מוכנס לשלפוחית השתן היו בעבר המתוארים עבור עכברים נקבה בלבד. כתב יד זה שואפת לספק תיאור צעד אחר צעד של הטכניקה-transurethral החדרה של חומרים בעכברים זכרים, לרבות קטעי וידאו, תמונות, איורים. החדרה-transurethral הליכים עכבר זכר בוגר יכול להתבצע עם משתנה inoculates דומה לזה בעבר תיאר את העכבר נקבה7 , התמזגה עם טכניקות נוספות כגון electromyogram הקלטות של תגובות visceromotor (VMR)16.
Protocol
Representative Results
Discussion
כתב יד זה מתאר בפירוט שיטה של החדרה-transurethral עכבר זכר בוגר. דיפרנציאלית אזור זריעה הראשי ניתן להגיע באמצעות צינורות PE של קטרים שונים. PE-50 מומלץ להגיע בהצלחה לומן שלפוחית השתן, בעוד קוטר גדול יותר ש-PE-10 משמש כדי להגיע AP של SV (איור 3 א-ב). בנוסף, הבחירה של גודל של צינורות PE …
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
המחברים אין כל תודות.
Materials
| BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 10 | BD Medical | 63019-004 | |
| BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 50 | BD Medical | 63019-048 | |
| BD Insyte-N Autoguard/ Angiocath | BD Medical | 311411 | |
| Ethanol (EtOH) | Fisher Scientific | BP2818500 | |
| BD Needle Only 22 Gauge (G) 1 inch | Becton Dickson | 205155 | |
| BD Needle Only 27 Gauge (G) 1/2 inch | Becton Dickson | 305129 | |
| Luer stub, 22 G X 0.5 in / Blunt Needle | Instech | LS22 | |
| Luer stub, 27 G X 0.5 in / Blunt Needle | Instech | LS27 | |
| 6" Long x 2" Wide x 1" Thick, Aluminum Oxide Sharpening Stone / Oil Stone | Norton | 40204034 | |
| Surgical Lubricant Sterile Bacteriostatic Folilpac | Surgilube | 281020543 | |
| Isoflurane | Fluriso | 13985-528-60 | |
| SomnoSuite Low-Flow Anesthesia System | Kent Scientific | SS-01 | |
| Dissecting Forceps, Curved | vwr | 82027-392 | |
| BD 1 ml Syringe | BD Medical | 309626 | |
| India Ink Solution., 0.2% in PBS buffer | Alfa Aesar | J61007 | |
| 8~12 weeks old male C57B/6 Mice | Jackson Lab | #000664 |
References
- Lee, S., Yang, G., Bushman, W. Prostatic inflammation induces urinary frequency in adult mice. PLoS One. 10 (2), e0116827 (2015).
- Wong, L., Hutson, P. R., Bushman, W. Prostatic inflammation induces fibrosis in a mouse model of chronic bacterial infection. PLoS One. 9 (6), e100770 (2014).
- Elkahwaji, J. E., Zhong, W., Hopkins, W. J., Bushman, W. Chronic bacterial infection and inflammation incite reactive hyperplasia in a mouse model of chronic prostatitis. Prostate. 67 (1), 14-21 (2007).
- Boehm, B. J., Colopy, S. A., Jerde, T. J., Loftus, C. J., Bushman, W. Acute bacterial inflammation of the mouse prostate. Prostate. 72 (3), 307-317 (2012).
- Bjorling, D. E., Wang, Z. Y., Bushman, W. Models of inflammation of the lower urinary tract. Neurourol Urodyn. 30 (5), 673-682 (2011).
- Thai, K. H., Thathireddy, A., Hsieh, M. H. Transurethral induction of mouse urinary tract infection. J Vis Exp. (42), (2010).
- Bjorling, D. E., Wang, Z. Y., Boldon, K., Bushman, W. Bacterial cystitis is accompanied by increased peripheral thermal sensitivity in mice. J Urol. 179 (2), 759-763 (2008).
- Hopkins, W. J., Gendron-Fitzpatrick, A., Balish, E., Uehling, D. T. Time course and host responses to Escherichia coli urinary tract infection in genetically distinct mouse strains. Infect Immun. 66 (6), 2798-2802 (1998).
- Dinis, P., Charrua, A., Avelino, A., Cruz, F. Intravesical resiniferatoxin decreases spinal c-fos expression and increases bladder volume to reflex micturition in rats with chronic inflamed urinary bladders. BJU Int. 94 (1), 153-157 (2004).
- Cayan, S., et al. Botulinum toxin type A may improve bladder function in a rat chemical cystitis model. Urol Res. 30 (6), 399-404 (2003).
- Jerde, T. J., Bjorling, D. E., Steinberg, H., Warner, T., Saban, R. Determination of mouse bladder inflammatory response to E. coli lipopolysaccharide. Urol Res. 28 (4), 269-273 (2000).
- Saban, M. R., et al. LPS-sensory peptide communication in experimental cystitis. Am J Physiol Renal Physiol. 282 (2), F202-F210 (2002).
- Schilling, J. D., Mulvey, M. A., Vincent, C. D., Lorenz, R. G., Hultgren, S. J. Bacterial invasion augments epithelial cytokine responses to Escherichia coli through a lipopolysaccharide-dependent mechanism. J Immunol. 166 (2), 1148-1155 (2001).
- Saban, M. R., et al. Discriminators of mouse bladder response to intravesical Bacillus Calmette-Guerin (BCG). BMC Immunol. 8, 6 (2007).
- Bjorling, D. E., et al. Acute acrolein-induced cystitis in mice. BJU Int. 99 (6), 1523-1529 (2007).
- Sadler, K. E., Stratton, J. M., Kolber, B. J. Urinary bladder distention evoked visceromotor responses as a model for bladder pain in mice. J Vis Exp. (86), (2014).
