تقطير ترانسوريثرال الداخلي في الماوس الذكور البالغين
Summary
تقطير transurethral هو إجراء صعبة ولا يوصف كذلك في الأدب. والهدف من هذه المخطوطة لوصف تقنية لإدخال قسطرة لتسليم إينترافيسيكال من السوائل المحتوية على المواد النشطة في المثانة و/أو البروستاتا في الفئران الذكور البالغين ترانسوريثرال.
Abstract
تقطير ترانسوريثرال يمكن استخدامها لتقديم حلول مختلفة مع المكونات النشطة (مثل المخدرات والمواد الكيميائية، البكتيريا والفيروسات) محلياً في المثانة البولية الحث على نماذج حيوانية من أمراض المثانة أو تقييم فعالية العلاجات إينترافيسيكال. هي الناجمين عن معظم القوارض نماذج لأمراض المسالك البولية (لوط) أقل في الفئران الإناث نظراً للتخفيف من تقطير إينترافيسيكال من المواد عن طريق الاحليل الإناث. ومع ذلك، نظراً للاختلافات التشريحية بين الإناث والذكور طرفية المستعملين المحليين، تقطير transurethral في ماوس ذكور قد اعتبر إجراء صعبة للغاية، وأنه لا قد وصف سابقا. في هذه المخطوطة، نحن نقدم وصفاً مفصلاً لكيفية إعداد أنابيب البولي إيثيلين (PE) للإدراج لاحقاً في مجرى البول بالماوس الذكور. وباﻹضافة إلى ذلك، ونحن نناقش أنواع مثالية من أنابيب PE لاستخدامها تبعاً للموقع المطلوب للتلقيح. وعلاوة على ذلك، يصف لنا نقطة بنقطة كيفية إعداد حيوان لتقطير transurethral ناجحة تجنب الإصابة بمجرى البول، وضمان تقديم الحل إلى الموقع المطلوب. بدء تشغيل الإجراء بواسطة سحب القلفة وحشفه لفضح افتتاح ماتيوس الاحليل. وبعد ذلك، يتم اغتنامها حشفة بالملقط حادة غير سحق لاستقرار القضيب وأنابيب PE. أولاً إدراج الأنبوب PE meatus الاحليل موازية لجسم الحيوان، ثم يتم ضبط الزاوية عن إمالة القسطرة للمناورة على تتبع الانحناء الطبيعي لمجرى البول. هذه التقنية يمكن أن تستخدم لنماذج مورين المستحث لأمراض المثانة و/أو تقييم فعالية العلاجات إينترافيسيكال في الفئران الذكور.
Introduction
أن النهج تقطير ترانسوريثرال قد استخدمت في الدراسات السابقة كإحدى الطرق لإنشاء نماذج القوارض من المثانة الأمراض1،2،،من34 ويمكن استخدامها لتقييم فعالية العلاجات تم تسليمها محلياً في الفئران. على الرغم من أن لا يمكن تلخيص نماذج حيوانية تماما الأمراض البشرية، تحديد الآليات الكامنة في الدراسات الحيوانية توفر فهم أفضل لاضطرابات طرفية البشرية مثل متلازمة الألم التهاب المثانة الخلالي/المثانة العصبية التهاب المثانة والتهاب المثانة المناعة الذاتية، والتهاب في البروستات5.
تقطير transurethral الإجراء يقوم على ماوس ذكور البالغين تحديا من الناحية التقنية أكثر من تقطير إينترافيسيكال في إطار ماوس الإناث البالغين6. تشريح المنحنى الطبيعي لمجرى البول الذكور جنبا إلى جنب مع قطرها صغير تجعل من الصعب من الناحية الفنية لإنجاز transurethral إدخال قسطرة. ولذلك، تعليمات مفصلة لتحريض transurethral الماوس المسالك البولية العدوى6 والطرفيات التهاب7،،من89،10،11 , 12 , 13 , 14 , وقد أوجزت 15 عن طريق قسطرة المثانة-إدراج سابقا للفئران الإناث فقط. هذه المخطوطة يهدف إلى تقديم وصف خطوة بخطوة للتقنية لتقطير ترانسوريثرال المواد في الفئران الذكور بما في ذلك مقاطع الفيديو، والصور والرسوم التوضيحية. تقطير transurethral الإجراءات ماوس ذكور البالغين يمكن أن يؤديها مع متغير إينوكولاتيس مماثلة لما سبق الموصوفة في الماوس الإناث7 واندمجت مع تقنيات إضافية مثل تسجيلات electromyogram الردود فيسسيروموتور (VMR)16.
Protocol
Representative Results
Discussion
هذه المخطوطة يصف بالتفصيل طريقة لتقطير transurethral في الماوس الذكور البالغين. يمكن الوصول إلى منطقة البذر الابتدائي التفاضلية باستخدام أنابيب PE من أقطار مختلفة. ويوصي PE-50 للتوصل بنجاح إلى التجويف المثانة، بينما يبلغ قطرها أكبر PE-10 يستخدم للوصول إلى وكالة اسوشييتد برس و SV (الشكل 3 أ</…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
المؤلفين لا تملك أي شكر وتقدير.
Materials
| BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 10 | BD Medical | 63019-004 | |
| BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 50 | BD Medical | 63019-048 | |
| BD Insyte-N Autoguard/ Angiocath | BD Medical | 311411 | |
| Ethanol (EtOH) | Fisher Scientific | BP2818500 | |
| BD Needle Only 22 Gauge (G) 1 inch | Becton Dickson | 205155 | |
| BD Needle Only 27 Gauge (G) 1/2 inch | Becton Dickson | 305129 | |
| Luer stub, 22 G X 0.5 in / Blunt Needle | Instech | LS22 | |
| Luer stub, 27 G X 0.5 in / Blunt Needle | Instech | LS27 | |
| 6" Long x 2" Wide x 1" Thick, Aluminum Oxide Sharpening Stone / Oil Stone | Norton | 40204034 | |
| Surgical Lubricant Sterile Bacteriostatic Folilpac | Surgilube | 281020543 | |
| Isoflurane | Fluriso | 13985-528-60 | |
| SomnoSuite Low-Flow Anesthesia System | Kent Scientific | SS-01 | |
| Dissecting Forceps, Curved | vwr | 82027-392 | |
| BD 1 ml Syringe | BD Medical | 309626 | |
| India Ink Solution., 0.2% in PBS buffer | Alfa Aesar | J61007 | |
| 8~12 weeks old male C57B/6 Mice | Jackson Lab | #000664 |
References
- Lee, S., Yang, G., Bushman, W. Prostatic inflammation induces urinary frequency in adult mice. PLoS One. 10 (2), e0116827 (2015).
- Wong, L., Hutson, P. R., Bushman, W. Prostatic inflammation induces fibrosis in a mouse model of chronic bacterial infection. PLoS One. 9 (6), e100770 (2014).
- Elkahwaji, J. E., Zhong, W., Hopkins, W. J., Bushman, W. Chronic bacterial infection and inflammation incite reactive hyperplasia in a mouse model of chronic prostatitis. Prostate. 67 (1), 14-21 (2007).
- Boehm, B. J., Colopy, S. A., Jerde, T. J., Loftus, C. J., Bushman, W. Acute bacterial inflammation of the mouse prostate. Prostate. 72 (3), 307-317 (2012).
- Bjorling, D. E., Wang, Z. Y., Bushman, W. Models of inflammation of the lower urinary tract. Neurourol Urodyn. 30 (5), 673-682 (2011).
- Thai, K. H., Thathireddy, A., Hsieh, M. H. Transurethral induction of mouse urinary tract infection. J Vis Exp. (42), (2010).
- Bjorling, D. E., Wang, Z. Y., Boldon, K., Bushman, W. Bacterial cystitis is accompanied by increased peripheral thermal sensitivity in mice. J Urol. 179 (2), 759-763 (2008).
- Hopkins, W. J., Gendron-Fitzpatrick, A., Balish, E., Uehling, D. T. Time course and host responses to Escherichia coli urinary tract infection in genetically distinct mouse strains. Infect Immun. 66 (6), 2798-2802 (1998).
- Dinis, P., Charrua, A., Avelino, A., Cruz, F. Intravesical resiniferatoxin decreases spinal c-fos expression and increases bladder volume to reflex micturition in rats with chronic inflamed urinary bladders. BJU Int. 94 (1), 153-157 (2004).
- Cayan, S., et al. Botulinum toxin type A may improve bladder function in a rat chemical cystitis model. Urol Res. 30 (6), 399-404 (2003).
- Jerde, T. J., Bjorling, D. E., Steinberg, H., Warner, T., Saban, R. Determination of mouse bladder inflammatory response to E. coli lipopolysaccharide. Urol Res. 28 (4), 269-273 (2000).
- Saban, M. R., et al. LPS-sensory peptide communication in experimental cystitis. Am J Physiol Renal Physiol. 282 (2), F202-F210 (2002).
- Schilling, J. D., Mulvey, M. A., Vincent, C. D., Lorenz, R. G., Hultgren, S. J. Bacterial invasion augments epithelial cytokine responses to Escherichia coli through a lipopolysaccharide-dependent mechanism. J Immunol. 166 (2), 1148-1155 (2001).
- Saban, M. R., et al. Discriminators of mouse bladder response to intravesical Bacillus Calmette-Guerin (BCG). BMC Immunol. 8, 6 (2007).
- Bjorling, D. E., et al. Acute acrolein-induced cystitis in mice. BJU Int. 99 (6), 1523-1529 (2007).
- Sadler, K. E., Stratton, J. M., Kolber, B. J. Urinary bladder distention evoked visceromotor responses as a model for bladder pain in mice. J Vis Exp. (86), (2014).
