Summary

Efeitos da exposição de formol para um modelo do rato da dermatite atópica, induzido pela capsaicina Neonatal tratamento

Published: September 27, 2017
doi:

Summary

Descrevemos aqui métodos para tratamento neonatal capsaicina induzir a dermatite atópica em ratos e exposição de formaldeído vaporizado para investigar os efeitos da inalação do formol na dermatite atópica.

Abstract

Dermatite atópica é cronicamente Policondrite eczema pruriginosa e prevalece em todo o mundo, especialmente nos países desenvolvidos. Interações complexas entre fatores genéticos e ambientais são conhecidas por desempenhar um papel importante na fisiopatologia da dermatite atópica. No entanto, ainda falta um quadro detalhado da patogênese desta doença. Assim, é de importância para desenvolver modelos animais apropriados para elucidar a progressão da dermatite atópica. Além disso, investigar o efeito de fatores ambientais, tais como poluentes atmosféricos na dermatite atópica amplia a compreensão da doença. Aqui, descrevemos um método para indução de dermatite atópica em ratos com tratamento neonatal capsaicina e um protocolo para a exposição de uma constante concentração de formaldeído para ratos para revelar os efeitos sobre o desenvolvimento da dermatite atópica em infantil e adolescente períodos. Estes protocolos foram aplicados com sucesso a vários experimentos e podem ser usados para outras substâncias.

Introduction

Para interrogar os efeitos da inalação de formaldeído (FA) na progressão da dermatite atópica (AD), temos estabelecido um protocolo para indução de AD e desenvolveu uma câmara de circulação convencional para exposição crônica de FA.

AD é uma doença de pele inflamatória crônica atribuída para as interações complexas entre a predisposição genética e gatilhos ambientais1,2. Um modelo animal adequado é necessário estudar a AD no estado pré-clínicos. Isso é mais importante quando a elucidação da patogenia da AD sob a influência de fatores ambientais. Além disso, para melhor investigar os efeitos dos gatilhos ambientais sobre a progressão de AD, é essencial para separar os fatores ambientais individuais e quantificar o grau de exposição.

Demonstrámos um modelo do rato de romance de AD induzida pelo tratamento neonatal capsaicina. Este modelo de AD3 tem alguns méritos sobre outros modelos de AD, como os modelos AD induzidos pela sensibilização epidérmica, os modelos AD geneticamente modificadas e os modelos de rato espontânea de AD4. Em primeiro lugar, este modelo desenvolve sintomas de AD na idade de 3 semanas, que corresponde ao Infante AD e é mais cedo do que outros modelos de rato espontânea de AD, tais como o rato NC/Nga. Em alguns casos, ao contrário dos modelos AD geneticamente modificadas, os sintomas dos modelos AD subside em recaída espontaneamente durante um período de 20 semanas. Além disso, o processo de indução de sintomas de AD no modelo é mais fácil do que o modelo de sensibilização epidérmica, que é mais parecido com a dermatite de contato alérgica, na perspectiva do processo de indução.

Nós introduzimos o romance protocolo para exposição de FA a um modelo animal por meio de uma câmara de vidro acrílico e um regulador de oxigênio médico convencional5 para estudar os efeitos da inalação de FA no desenvolvimento da AD em períodos infantis e adolescentes. O regulador nos permitiu expor os animais para uma concentração constante de gás, ajustando as taxas de fluxo e a concentração da solução. Estudos anteriores relataram várias maneiras de exposição de FA de modelos animais. Xu et al descreveram o método de exposição no qual FA solução foi diretamente aplicada a pele6. Outro estudo recente dirigida o protocolo de exposição de gás FA usando um gerador de solventes voláteis especializados, modelo 49127. Em comparação com métodos de estudos anteriores, o novo método está equipado mais facilmente e pode ser aplicado para outras soluções além de FA.

Protocol

todos os métodos descritos aqui foram aprovados pelo cuidado do Animal Internacional e Comité de uso (IACUC) de Coreia Universidade faculdade de medicina. 6 semanas após o nascimento, experimentadores podem induzir enthansasia e recolher vários exemplos como a pele e soro de ratos. 1. indução da AD por tratamento Neonatal de capsaicina para preparar a 5 mg/mL solução de capsaicina, adicionar 50 mg de capsaicina a 1 mL de Tween 80 e 1 mL de etanol 100% em um tubo cônico de …

Representative Results

A inflamação da pele AD-como o modelo de rato AD tratados com capsaicina em 7 semanas de idade é apresentada na figura 1A. Comportamentos arranhando robustos do modelo de ratos tratados com capsaicina AD é mostrado no vídeo 1. Tratamento neonatal capsaicina suscitou dermatite e agravada coçando comportamentos em ratos 3 semanas de idade, e AD-como os sintomas persistiram durante várias semanas (figura 1B<s…

Discussion

O protocolo descrito aqui para a indução de sintomas de AD em ratos pode ser adaptado para estudar a fisiopatologia do AD e usado como uma ferramenta de triagem para teste de drogas. O instrumento para a exposição de FA gasoso de ratos tratados com capsaicina pode ser aplicado para avaliar os efeitos da exposição a diversos gases em diversos modelos animais.

O modelo de AD tratados com capsaicina neonatal depende de um procedimento mais simples do que outros modelos atópicas como o DNCB…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Esta pesquisa foi apoiada pelo bem-estar público & programa de pesquisa de segurança através da nacional Research Foundation de Coreia (NRF) financiado pelo Ministério da educação, ciência e tecnologia (NRF-2014M3C8A5030612) e apoiado por The Chung Yang, Cha Young Sol, M.D. e Jang Oi Joo Yeu Sa Memorial fundo.

Materials

Medical Oxygen Regulator Yuyao Jiahua Medical manufacturer will not affect results
Tube manufacturer will not affect results
Acrylic Chamber Taejin Acryl manufacturer will not affect results
Plastic Chamber Taejin Acryl manufacturer will not affect results
Paraformaldehyde, powder Sigma 158127 manufacturer will not affect results
Wrap filme Uniwrap manufacturer will not affect results
Capsaicin Sigma M2028 manufacturer will not affect results
Tween80 Sigma P4780 manufacturer will not affect results
Digital Video Camera Sony HDR-CX380y manufacturer will not affect results
Isoflurane JW pharmaceutical manufacturer will not affect results

References

  1. Geha, R. S. Allergy and hypersensitivity. Nature versus nurture in allergy and hypersensitivity. Curr Opin Immunol. 15 (6), 603-608 (2003).
  2. Novak, N., Bieber, T., Leung, D. Y. Immune mechanisms leading to atopic dermatitis. The J Allergy Clin Immunol. 112 (Suppl 6), S128-S139 (2003).
  3. Back, S. K., et al. Chronically relapsing pruritic dermatitis in the rats treated as neonate with capsaicin; a potential rat model of human atopic dermatitis. J Dermatol Sci. 67 (2), 111-119 (2012).
  4. Jin, H., He, R., Oyoshi, M., Geha, R. S. Animal models of atopic dermatitis. J Invest Dermatol. 129 (1), 31-40 (2009).
  5. Han, R. T., et al. Formaldehyde-Induced Aggravation of Pruritus and Dermatitis Is Associated with the Elevated Expression of Th1 Cytokines in a Rat Model of Atopic Dermatitis. PLOS ONE. 11 (12), e0168466 (2016).
  6. Xu, B., Aoyama, K., Takeuchi, M., Matsushita, T., Takeuchi, T. Expression of cytokine mRNAs in mice cutaneously exposed to formaldehyde. Immunol Lett. 84 (1), 49-55 (2002).
  7. Kim, J. Y., Jeong, M. S., Park, K. Y., Seo, S. J. Aggravation of atopic dermatitis-like symptoms by consecutive low concentration of formaldehyde exposure in NC/Nga mice. Exp Dermatol. 22 (3), 219-221 (2013).
  8. Laske, N., Niggemann, B. Does the severity of atopic dermatitis correlate with serum IgE levels?. Pediatr Allergy Immunol. 15 (1), 86-88 (2004).
  9. Fujii, Y., Takeuchi, H., Sakuma, S., Sengoku, T., Takakura, S. Characterization of a 2,4-dinitrochlorobenzene-induced chronic dermatitis model in rats. Skin Pharmacol Physiol. 22 (5), 240-247 (2009).
  10. Sugimoto, T., Xiao, C., Ichikawa, H. Neonatal primary neuronal death induced by capsaicin and axotomy involves an apoptotic mechanism. Brain Res. 807 (1-2), 147-154 (1998).
  11. Saito, A., et al. Characterization of skin inflammation induced by repeated exposure of toluene, xylene, and formaldehyde in mice. Environ Toxicol. 26 (3), 224-232 (2011).
  12. Jung, W. W., et al. Formaldehyde exposure induces airway inflammation by increasing eosinophil infiltrations through the regulation of reactive oxygen species production. Environ Toixcol Pharmacol. 24 (2), 174-182 (2007).

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Citer Cet Article
Han, R. T., Back, S. K., Lee, J., Kim, H. y., Kim, H. J., Na, H. S. Effects of Exposure of Formaldehyde to a Rat Model of Atopic Dermatitis Induced by Neonatal Capsaicin Treatment. J. Vis. Exp. (127), e55987, doi:10.3791/55987 (2017).

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