犬と猫における腫瘍の治療のための電気化学の操作手順

このプロトコルは、農林食品省の倫理委員会によって承認され、そのガイドラインに従いました。プロトコルは、80以上の犬や猫20で検証しました。 注：ECT治療は、シスプラチンまたはブレオマイシン及び電気パルスに腫瘍結節の暴露の投与からなります。 1.患者の選択注：患者の選択は、医師は、患者がこの治療の恩恵を受けるのに適しているか否かを判断することができます。 患者の病歴（再発の年齢、品種、性別および任意の同時疾患の存在、腫瘍の種類、時間とともに腫瘍の進展、以前の治療とその結果、再発と速度に関する一般的なデータを評価し、のsuccessfulnessについて所有者の期待療法）。 患者の身体検査を行いますメートルために詳細には腫瘍を評価します潜在的に侵襲性の腫瘍が提示される場合、広いマージンが（サイズについて決定を下す治療：AKE可能臨床鑑別診断とは、治療領域を決定するために、組織学的評価のために細胞学評価及び可能な組織生検用の細針吸引を行います、1cmのマージンが扱われるべき腫瘍、 例えば 、≤1センチメートル2R肥満細胞腫瘍の同じタイプのための任意の他の治療のための勧告に従って処理マージン; R -半径）。 治療アプローチを調製するために結節の数と大きさを評価します。 一般的な検査疾患の病期分類を行い、確認するために完全な一般的な検査を実装します。 患者が血液学的またはcoagulatを変える可能性の慢性感染症の歴史（特定の地域で疫学に従って）または免疫媒介性疾患を持っている場合は、治療を妨げる可能性があり、他の同時疾患が存在しない場合イオンの変化（特定のテストを実行する）、動物は、患者がシスプラチンに対する感受性を持っている場合、深いsedationsおよび/または全身麻酔の一連に耐えることができる場合（標準用量は、60〜70ミリグラム/ m 2体表面積/ 21でありますD）またはブレオマイシンまたはすでに400.000 IU / m 2とを超えるブレオマイシンの累積線量を受けています。 腫瘍の種類に応じて任意の可能な転移を確認するために、画像診断技術（腹部の胸部や超音波検査のX線撮影）を使用します。 2.研究所の分析血液検査血中尿素窒素（BUN）の生化学パネル、クレアチニン、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ALT）、アルカリホスファターゼ（AF）とを決定するために、高度な慢性腎臓および肝臓疾患および可能な最も頻繁な腫瘍随伴症候群を除外するカルシウムと分析完了血液を行いますEFを有していてもよい臨床病期予後にfect。 追加の特定の血液分析を行います。 患者が潜在的に凝固能の変化を変更する可能性のある薬を与えられた場合、凝固プロフィールをチェックしてください。 侵襲的治療（針電極）を使用している場合、血小板数を確認してください。血小板の数は> 100であるべきかの場合には、<100、凝固プロファイル（PT、APTT、フィブリノゲン、Dダイマー）が正常であるべきです。 特定の場合では、腫瘍性疾患及び患者の臨床状態に応じて、総タンパク質、アルブミン、蛍光体、ナトリウム（Na）、カリウム（K）をチェックし、塩化物（CL）およびリパーゼ濃度。 腫瘍（単数または複数）の組織学的分析細胞学的診断は、以前に実行された場合、組織学分析は不要です。組織学的グレードが重要な予後因子である特定の腫瘍タイプ（ 例えば、肥満細胞腫瘍）の場合には、ヘマトキシリンおよびエオシン駅を行いますining 16。 注：生検（切開または「パンチ」）は、同じ訪問中にECTの前に行うことができます。いずれの場合においては、腫瘍型を診断するための優れた臨床診療です。 注：ケースを完全に評価された後、動物の所有者との徹底的な議論と明確化が必要です。臨床結果の面でECTから期待できるものECTとは何か、所有者に説明してください。全身麻酔や深い鎮静、治療の全期間、治療費、再発の可能性下ECTセッションの数：所有者と治療経過について話し合います。患者が実際に資格がある場合は、ECTの臨床試験中の患者を含める場合には、所有者の書面による同意を得ます。 治療モダリティの3選択肢注：犬はシスプラチンおよびブレオマイシンを使用ECTのために。シスプラチンは、猫には禁忌であるようネコにおけるECTのために、唯一のブレオマイシンを使用します。 <li>個別に各腫瘍を扱います。場所と各結節の大きさと治療プロトコルの概要を説明するための結節の数を決定します。 式V =ab²π/ 6（ ""より大きな腫瘍結節の直径と「B」「A」に対して垂直に腫瘍結節の直径である）、またはV =abcπ/ 6（ "を使用して腫瘍結節の体積を計算しますA」、「B」および「C」）は、腫瘍結節の三垂直直径です。 営業モダリティの4選択肢電極の選択注：電極構成は、組織内の電場分布に影響を与えるように最適な電極の種類を選択することが重要です。電極の2つのタイプが使用されています。プレートと針電極を。プレート電極は、並列ステンレス板を持っている：電極間の内側の距離は、腫瘍の大きさや電気パルスの発電機の容量に依存します。通常、距離があること電極をトゥイーン6〜8ミリメートルです。針電極は、行（平行配列）または六角形の幾何学形状に配置することができます。六角形の電極は、円形アレイ内の中央針と6針を持っています。パルスは、円形配列で、それらと中央1間に電極間に印加されています。パルスは、電極の各対の間の両方向に適用されます。腫瘍結節の深さに応じて電極の種類を選択して、全体の目的の治療部位に適切なエレクトロポレーションを提供します。特定の標的組織に応じて電極を選択してください。一般に、電極の両方のタイプは、治療に使用することができます。 シスプラチンまたはブレオマイシンの選択と準備注：ECTは、シスプラチンまたはブレオマイシンまたはブレオマイシン及び電気パルスに腫瘍結節の暴露の静脈内投与の腫瘍内投与からなります。 適切な細胞増殖抑制性およびその投与経路を選択します。 CIを溶かします1mg / mlの濃度で蒸留水に粉末として得られた場合splatin（シス – ジアミンジクロロ白金II）、（そうでなければ薬学的に調製した溶液を使用することができます）。腫瘍内シスプラチンを与えます。 3mg / mlの濃度で生理食塩水中のブレオマイシンを溶解し、腫瘍内または静脈内に与えます。 麻酔注：オペレーティング・モダリティに依存した （ 表1）深い鎮静状態または全身麻酔を使用することができます。 米国麻酔学会」（ASA）のための可能な腫瘍随伴症候群の腫瘍の種類に応じて物理的な状態の分類とに応じて患者を評価します。 ディープ鎮静犬に酒石酸ブトルファノール（0.1ミリグラム/ kg）でメデトミジン（0.08ミリグラム/ kg）または二重の組み合わせメデトミジン（0.025ミリグラム/キログラム）を使用するか、特定の病院で深い鎮静のための標準的な手順に従ってください。 全身麻酔 <li>アセプロマジン（0.02ミリグラム/キログラム）とメタドン（2ミリグラム/キログラム）でPremedicate。 三十分後チオペンタール（5ミリグラム/ kg）またはプロポフォール（1ミリグラム/ kg）で全身麻酔を誘導します。 気管内チューブを配置し、Tピース麻酔回路を介して配信酸素にイソフルランで麻酔を維持します。 麻酔中に非ステロイド鎮痛薬（ 例えば、カルプロフェン2-4ミリグラム/キログラム）の単回投与で10ml / kg /時間および鎮痛の割合でハルトマンの溶液と流体支援処理を使用しています。 麻酔下ながら乾燥を防ぐために、眼軟膏を使用してください。それは胸骨横臥位に十分な意識を取り戻すまで処理した後、患者を監督。約2〜4時間のための診療所で患者をしてください。 注：特定の病院で全身麻酔のための標準手順も続くことができます。 動作環境注：オペレーティング人事は、訓練を受けたECT演算子（DVM）、麻酔科医とアシスタントです。 <li> ECTが深い鎮静下で実行される任意の救急室や全身麻酔が許可されている任意の外科手術用の部屋を使用してください。 麻酔のための手順に従って、鎮静および/または全身麻酔の使用のために必要なすべての機器。 ECTの手順については物質一覧で必要なすべての資料を参照してください。 オペレータと周囲の人員保護注：抗腫瘍薬に対する皮膚の液滴露出はほとんど深刻な問題を引き起こしません。シスプラチンおよびブレオマイシンは、無傷の皮膚から吸収されていません。シスプラチンは唯一の刺激を引き起こすことがあります。会社結節または腫瘍を注入する際シスプラチンおよびブレオマイシン漏れが発生する可能性があります。針刺し損傷の場合には、水の豊富で洗浄し、標準的な医療行為に従って傷の世話をします。 マスクと手袋とオペレータと周囲のアシスタントを保護します。シスプラチンまたはブレオマイシン溶液への皮膚暴露の場合には、すぐに水でかつ豊富にすすぎます。 </li> もしあれば、抗がん剤の使用状況に関する現地の規制を遵守品質保険プログラムに従ってバイオセーフティ対策を設定します。 電気パルスの発生注：電気パルスの適用は、電気パルスの発生器で行うことができます。一般的に、装置は、統合されたソフトウェアと事前設計された電気パルスを選択するためのタッチスクリーンインターフェースを有する方形波パルス発生器です。これは、コードによって発電機に取り付けられたパルス活性化ボタンで手持ち電極ホルダーが装備されています。電気パルスの送達は、フットスイッチによって制御することができます。電気パルスの発生装置は、欧州連合（EU）の基準を満たさなければならない：2006/95 / CE電磁適合性および準拠すべきであるに関する2004年12月15日から特定の電圧限度内で使用される電子材料に関する2006年12月12日、2004/108 / CEからFDAの規制。 電気パルスの印加手順注：番目電気パルスの電子アプリケーションは、シスプラチンまたはブレオマイシンの腫瘍内投与、またはブレオマイシンの静脈内投与の後に続きます。腫瘍内の細胞増殖抑制投与する場合漏れを防ぐためにゆっくりと適用されるべきです。静脈内の管理細胞増殖抑制剤は、約30秒を持続ボーラスに適用されるべきです。水ベースのゲルは、皮膚と電極のいずれかのプレートまたは針との間の良好な接触を達成するために、より少ない不均質な電界分布を達成するために使用されます。ゲルの導電率は、0.5〜1 S /メートル17,18の間であるべきです。使用されるゲルの導電率は0.5 S / mでした。プレート電極は、腫瘍は、それらの間に含まれるように配置されるべきです。また、電界のより良好な分布を達成するために、電気パルスの印加は、垂直方向に2回実施されるべきです。腫瘍は、電極間の距離よりも大きい場合、電極の適用スターべき（安全マージンを含む）は、腫瘍の縁からtと腫瘍の中心に向かって進行。針電極の場合には、注意がすべての針が、電場の適切な分布を達成するために組織内に挿入されていることを注意すべきです。ゲルの適用が必要とされません。そうでなければ、手順は、板状電極の場合と同様です。 電気パルスの適用領域で皮膚を脱毛しますシスプラチンまたはブレオマイシンを管理します。細胞増殖抑制剤を投与された場合に、静脈内に8分間待ち、電気パルスの送達のための時間間隔は20分です。細胞増殖抑制が腫瘍内に投与された場合は、直ちに電気パルスのアプリケーションで始まる（注射後1分以内）。 電気パルスを印加する前に脱毛皮膚に水ベースのゲルを適用します。 1300 V /距離比率を電極にパルス持続時間100μ秒、振幅：プレート電極は、これらのパルスパラメータを使用するためcmで、周波数1 Hzまたは5 kHzの。 2垂直方向に、1秒間隔で、4つのパルスの2系列で8単極性電気パルスの各実行を提供します。 パルス持続時間100μ秒、距離比千V / cmで、周波数1または5キロヘルツを電極に振幅：行のための針電極は、パルスパラメータを使用します。単極性電気パルスの各実行は、8つのパルスで構成されています。 針電極の場合は、六角形の設定と使用パルスパラメータにアレンジ：パルス持続時間100μ秒。 （電極間の距離は7mmであれば、1040 V / cm）の六角形電極730 Vの定電圧を有し、5キロヘルツの周波数とパルス数と針の数に依存します。 7針の場合には24パルスが印加されます汚染物質の処分。 焼却のために意図されたコンテナ内のすべての汚染物質（注射器、針、バイアル、ガーゼ、手袋）を処分。 <p class="jove_title"> 5。ファローアップ注：各来院時に、腫瘍結節は、ノギスや撮影で測定されています。これらの訪問も可能で局所および全身性の副作用を評価するために役立ちます。完全寛解（CR）などの治療への応答"固形腫瘍における応答評価基準」の基準に基づいて、4週間後に採点さを（RECIST）19 -結節の消失、パーシャルレスポンス（PR） -少なくとも30％参照として、ベースライン合計直径を取って、標的病変の直径の合計の減少、進行性疾患（PD） – 標的病変の直径の合計における少なくとも20％の増加を基準として最小を取ります合計で検討し、安定な疾患（SD） – PRのために修飾するために十分な収縮、も参照最小合計直径としたPDのために修飾するための十分な増加、どちらも。すべての応答の定義については、最低4週間の期間はquのために必要とされます応答の各タイプをalifying。観測時間は、最初の処置の日付と患者の最後の検査の日付の間の間隔として計算されます。各フォローアップ検査時20 -可能性のある副作用は、獣医共同腫瘍学グループの毒性尺度（CTCAE VCOG）に応じて決定されます。 治療後の予定1週間のスケジュールを設定します。 2週間の治療後に予定をスケジュールします。 4週間の治療後に予定をスケジュールします。 4週間後、月に一度の予定をスケジュールします。