Flight in insects is influenced by a number of factors and the propensity to disperse is an important variable in understanding insect ecology and biological control strategies. We describe the construction and use of a simple, relatively inexpensive, and flexible flight mill for measuring parameters of tethered flight in insects.
Flight in insects can be long-range migratory flights, intermediate-range dispersal flights, or short-range host-seeking flights. Previous studies have shown that flight mills are valuable tools for the experimental study of insect flight behavior, allowing researchers to examine how factors such as age, host plants, or population source can influence an insects’ propensity to disperse. Flight mills allow researchers to measure components of flight such as speed and distance flown. Lack of detailed information about how to build such a device can make their construction appear to be prohibitively complex. We present a simple and relatively inexpensive flight mill for the study of tethered flight in insects. Experimental insects can be tethered with non-toxic adhesives and revolve around an axis by means of a very low friction magnetic bearing. The mill is designed for the study of flight in controlled conditions as it can be used inside an incubator or environmental chamber. The strongest points are the very simple electronic circuitry, the design that allows sixteen insects to fly simultaneously allowing the collection and analysis of a large number of samples in a short time and the potential to use the device in a very limited workspace. This design is extremely flexible, and we have adjusted the mill to accommodate different species of insects of various sizes.
いくつかの実験技術は、昆虫の飛行行動1,2の研究のために開発されてきました。つなが昆虫5の移動の自由度を可能にする洗練されたデバイスへの単純な静的テザリング3,4からこれらの範囲。日付飛行室6-9への制御された条件での飛行の自由の最高レベルを可能にするデバイスを表します。この技術は、2つの主要な欠点がある:それは時間がかかり、大きな昆虫やデータ収集の手動手順の研究のために使用することは困難です。
フライトミルは、実験室条件下で昆虫の飛行10-12の研究のための最も一般的で手頃な価格のいずれかの方法を表します。それは刺激13を動かす提供しているため、この技術は、静的なテザリングに好適であるが、それは自由飛行行動反応14-16とは異なります。ミルの野生での飛行動作の一部はsimilaです渡り鳥の飛行タイプの場合のようにR 5,17ので 、いくつかの制限にもかかわらず、飛行ミルは、特定の飛行行動応答の発生に関する質問を調査するために実行可能な選択肢を表します。また、フライトミルは、風洞や飛行室より実現が容易であり、データ収集が容易に自動化することができます。したがって、飛行行動に興味を持って研究者は多くの場合、飛行工場は最良の選択であることがわかりますが、メソッドへの潜在的な制限に注意する必要があります。ここでは、柔軟でカスタマイズ可能なフライトミル設計は飛行挙動を調査するために飛行工場を活用することを選択した研究者のために提示されます。
いくつかの著者は、代替フライトミルの設計について説明します。一般的に飛行ミルシステムの主要部分、 すなわち 、ピボットミルの腕は、実現するのは非常に簡単です。以下簡単なデータの記録を可能にする飛行ミルシステムの電子部品です。エルの対処ectronic回路の設計は、特に昆虫学者や電子機器の背景知識に欠けた行動生態学者のために、挑戦することができます。何人かの著者は彼らの飛行ミル設計18-21、または22,23が欠落しているフライトミルの電子部品の説明では、複雑な日付や電子回路部品のうちを記述する。他の設計は実現するのは非常に複雑であるが、より複雑な行動観察5に着手する研究者を助けることができ、機械的に複雑actographsを、説明します。
シンプルな設計を構築するために本論文では、昆虫でつなが飛行の研究のための比較的安価なフライトミルが記載されています。一緒に非常に簡単な電子部品を用いて、デザインは、多くの利点を有します。フライトミルは、標準的な昆虫生態学研究室で一般的に利用可能なスペースに制約で使用されるように設計されています。構造は、透明なアクリルPから作られます単一の光源を均一に粉砕機の別々のチャンバ内のすべての個々に到達できるようにラスチック。材料及び小型の透明性を与え、飛行ミルは、標準化された光および温度条件のためにインキュベーターに使用することができます。最後に、全体の構造が組み立てと分解を容易と、一度分解することができ、それは、小さなスペースに格納することができます。構造の設計に対する別の利点は、飛行ミルは、異なるサイズ、異なる回転距離を使用する昆虫の研究を可能にするように改変することができるということです。この飛行ミルはトウワタのバグ、Oncopeltus fasciatus 24、葛のバグ、 タイワンマルカメムシ 、およびカブトムシ、Nicrophorusのvespilloidesを埋め込 むよう大きさや形状が多様な昆虫に関するデータを収集するために使用されています。フライトミルデザインも大きなサンプルサイズを必要とする研究のために必要なスループット高を可能にします。データは、データロガーUのそれぞれに対して8同時チャネルを使用して収集することができ個人の高い数を同時に分析することができ、多数のサンプルを同じ日に扱うことができるようにsedの。高価なソフトウェアは、データを記録し、可視化するために必要とされず、データ解析のためのカスタム書かれたスクリプトは、実験計画の具体的なニーズ以下の変更することができます。フライト応答が異なる昆虫種で非常に可変です。このように、フルフライトミル実験を行う前に、焦点昆虫モデルの飛行応答の予備試験をお勧めします。これらは、記録時間や飛行速度範囲として飛行解析の微調整の側面に使用される飛行応答の行動変化の程度の理解を提供します。
、手頃な価格で柔軟、そして調節可能なフライトミル設計 。
昆虫の飛行動作条件が分散する害虫種の傾向に影響を与えるかを理解する必要が生物防除の専門家への変数の環境下での昆虫の基本的な動作に興味のある人から、科学者の範囲に関心があります。飛行行動は、飛行「トレッドミル」とおおよそのフィールド条件がつなが飛行デバイスをstaticに風洞の範囲で種々の方法により研究することができます。係留飛行工場は、ここに提示されている1つのように、14を測定することができない、そのような高度の変化など、フライトの特定の側面に限定されています。しかし、繋留飛行工場は虫が中断飛ぶので、研究者は、このような飛行速度、距離や周期などのパラメータを定量化することを可能にし、環境条件、生理学、およびmのこれらのパラメータを相関させることができますorphology。
ここで紹介するフライトミルは、エレクトロニクスの専門知識がなくても、研究者が昆虫で飛行挙動を研究するために繋留飛行工場を建設し、使用できるように設計されました。この設計の一つの利点は、飛行ミルの全体のコストは他の設計に比べて低いことです。全体的なコストは、よく300ドル未満に維持することができます。プラスチックアクリルシートは最も高価なアイテムです。第2の利点は、特殊な風洞とは対照的に、フライトミルは、多くの研究室で利用可能な制限され制御された状態のワークスペースに適応であるということです。厚さ3mmの透明なアクリルプラスチックシートの使用は、飛行試験のための適切な場所に移動する飛行ミルを可能にする、昆虫の容易な観察、また軽量化を可能にするために、構造体は、透明でもあることを意味します。足を最小限に抑えながら飛行ミルセルの積層構造は、実行のサンプルの数を最大化しますデバイスの印刷。さらに、装置を容易に保管するために分解することができます。また、フライトミルは、個人の多くは、比較的容易にサンプリングすることができるように設計しました。各フライトミルは、同時に複数の個人の飛行活動を記録するために研究者を可能にする、8個の細胞が含まれています。個々の昆虫が中に入れ、急速にフライトミルから除去するために虫ピンを介して回動アームに間接的に昆虫を取り付けることができます。最後に、データ記録用電子機器は、データ分析のために自由に利用可能なソフトウェアと、シンプルで使いやすいです。組み立てた後、飛行ミルは、フライトの活動を記録するために、単純なIRセンサを使用しています。赤外線ビームを介して、アームの端部におけるホイルフラグの通路は、アームの各回転を記録することを可能にします。革命の速度は、速度、距離などのデータは、データロガーへの入力として記録するフライトの総飛行時間やパターンを旅することを可能にします。
フライトミル昆虫の異なる種類の数に適合させることが可能です。重い、生産ドラッグが狭い直径減少していても、ため、ピボットアームのための皮下鋼管の使用は、小さな昆虫は飛行試験することができるように、そのような木の棒やストローなどの他のオプション、より有効です。近年、光ファイバの小片は、小昆虫飛行25ミルで使用されてきました。アームの屈曲終了は、その天然の飛行方向で実験昆虫を位置決めするために支持軸に対して異なる角度で、電機子に接着することができます。半径は長さ10cmである提示の設計では、一回転で旅全体の距離は62.8センチメートルです。中央垂直壁を削除すると、アームの半径が大きくなる昆虫や革命1.20メートルまでの距離に対応するために、長さが倍増することができるフライトミルの別の構成が可能になります。この場合には、より強力な磁石はrecommenあります長い工場のアームに対応し、安定させるためにDED。
全体で述べたように、フライトミルのデザインは、柔軟で、関心の昆虫種に適応可能であると研究者は、彼らの特定のニーズに合わせてカスタマイズすることができます。これは、サイズ、消費電力、キューティクルの構造だけでなく、種間の生物学的な違いのようなパラメータを含む昆虫の物理的なニーズだけでなく、含まれています。すべてのフライト工場への一つの潜在的な欠点は、足根サポート「軍の昆虫の欠如は、おそらく枯渇に、飛ぶことということです。これはいくつかの種では事実ですが、例えば、私たちはトウワタバグ試験で自動飛行応答は、それは我々が(例えばN.のvespilloidesのために)テストしたすべての昆虫には当てはまりません観察しました。記録時間の私達は昆虫の生態に適応することを選んだので、しかし、自動応答で、我々は、部分的に、枯渇または死に飛翔昆虫を観察することはありません。したがって、それは行うことが重要です興味のある昆虫の予備的観察は、データ収集を最適化するために、飛行ミルでその挙動を理解します。フライト工場と追加、よく知られた問題で、慣性が昆虫が積極的に飛行を停止した後も運動を維持することができるということです。スクリプトは、飛行速度の急激な低下を特徴とし、ピーク間の距離を増加させ、原因飛行ミルの慣性に誤読のアカウントを提供しました。スクリプト「flight_analysis.py 'は、これらの「偽ピーク」を破棄し、分析のための新しい信号を作成します。スクリプトで提供ノートで説明したように、ユーザは、補正のための速度閾値を選択することができます。
5 V電源は、しかし、可変出力電圧電源装置は、電力入力を変化させ、したがって、各センサのための動作電圧を最適化できるように動力源として使用することができ、読み取り可能な電圧信号を得るのに十分です。このような溶液はまた、視覚化品質Oを高めるのを助けることができますソフトウェアの記録インタフェースのピークfの信号。ベース電圧がピーク電圧がベース電圧から上昇している間(IRビームが遮断されていない)安静時のセンサからの最低出力電圧を表し、ベースピーク電圧によって形成されるように、センサの出力は、ソフトウェアインタフェースに表示されアームがビームを通過するように赤外線ビームが遮断されたときに発生します。 7 Vへの入力を増加させながら、5 Vの入力電圧は、ベースとピーク電圧のより明確な区別を可能にする300 mVのピークの上昇が増加し、約100 mVの上昇を提供します。選択したブレッドボードの大きさは、多くの飛行細胞を収容することができる方法を決定します。複数のセンサからの記録時の電圧信号の低下を最小限に抑えるためには、( 図3Cを参照)ブレッドボードに沿って交互の列に抵抗を配置することが推奨されます。
カスタマイズ可能な信号の標準化とanalysiオープンアクセスプログラミング言語のPython用に書かれたのスクリプト。
電圧信号の標準化と解析は、フリー、広く使用されている汎用および高レベルのプログラミング言語ではPythonで書かれたカスタムスクリプトを使用して行われます。エンドユーザーが簡単に自分の指定した設定で動作するようにスクリプトをカスタマイズすることができます。カスタマイズは、単に数値や変数の名前を変更することによって達成されます。パラメータをカスタマイズする方法についての注意事項は、スクリプト自身の中に見つけることができます。スクリプトのデフォルト値を微調整信号の標準化を提供するために設定されているが、ユーザーは各チャンネルの平均電圧の値に応じて、任意の所望のしきい値を定義することができます。飛行解析スクリプトでは、ライン105からの機能flying_boutsは、最長の秒単位の持続時間と最短飛行発作、総記録時間にわたって飛行に費やした時間の割合とイベント試合飛行の数を計算します指定された期間の範囲の秒。範囲は、ユーザーの実験の要件に応じて変更することができます。そうするためには、関数内のすべての数値は、(変数「flight_300_900」で、たとえば変数名でものを、含まれている)を所望の値に変更する必要があります。範囲の数とその期間は、単にユーザーの仕様に依存します。このスクリプトは、画面上の各チャネルの解析結果を出力します。これらには、平均飛行速度、総飛行時間、走行距離、最短と最長の飛行発作と飛行組成を。また、スクリプトは、各チャネルの* .datファイルを返し、ユーザが指定した出力フォルダに保存します。各* .DATファイルには、2つの列があります。最初のものは、ピークイベントの相対時間を表し、第二は、2つの連続したピークのイベント間の詳細な速度変化です。このファイルは、上で速度変化のグラフを作成するために、ExcelまたはRにインポートすることができます時間や飛行活動パターンを可視化します。
結論として、これらの結果は、このフライトミルの設計を容易にし、正常に異なる昆虫モデルにおいて活動パターンを飛行見行動研究のためのデータを収集するために実施することができることを示しています。このようなデータは、生理学および形態学上の例のように依存する移動パターン内の個々の変化を調査するために使用することができます。これは、最終的に全体として人口に影響を与える採餌や遊走活性などの動きのパターンには個人差を決定する基礎となる生理学的および形態学的な特性に優れた洞察力を提供することができます。経時的な詳細な速度変動は、リソース消費のパターンまたは飛行活性に対する身体部分の形態の変化の影響を研究するためのツールを提供し、詳細な生理学的および形態学的測定と組み合わせて使用することができます。
The authors have nothing to disclose.
Alfredo Attisano was supported by a European Social Fund studentship. James T. Murphy is supported by USDA-NIFA Award 2013-34103-21437.
Data Logger | DATAQ Instruments, Ohio, USA | DI-149 | These particular data loggers were chosen because they can be easily connected via USB to a computer and come with free proprietary software (WinDaq/Lite, DATAQ Instruments, Ohio, USA) to visualize and record the sensor's output, increasing the affordability of the flight mill design. |
Data Logger – potential alternative | A potential alternative to the DATAQ data loggers is an RS232 to USB adaptor, readily available through office or electronic supply stores. These should be able to read data directly from the serial port via the pyserial module. | ||
Entomological pins | BioQuip | ||
Hypodermic steel tubing 19 guage | Small Parts | B000FN5Q3I | Available through Amazon.com; other suppliers are available but be sure to purchase austenitic steel tubing to ensure the arm in non-magnetic |
IR Sensors | Optek Technology Inc., Texas USA | OPB800W | |
N42 neodymium magnets | Readily available; can be purchased through specialized magnet suppliers, hobby stores or Amazon | ||
Plexiglass/perspex | Readily available at any hardware store | ||
Polystyrene columns for support | Any polystyrene or styrofoam packing materials that might otherwise be discarded or recycled can be used to fashion the support columns for the flight mill. Otherwise, styrofoam insulation sheets are available at any hardware store. | ||
Solderless Breadboard Power Supply Module | Arrela | MB102 | The 5V power unit, breadboard and solderless male-male jumper wires can be easily purchased as a kit. |