在成年小鼠V-SVZ细胞的神经分析的稳定，高效的基因修饰干细胞自主和非自主的影响

鼠心室脑室下区（V-SVZ），在面对纹状体侧脑室的壁，是一种非常活跃的生发区域，其中在持久生产嗅球祖细胞复制和分化的结果的一个持续的过程（OB ）的interneurons和胼胝体少突胶质细胞^1。终身代这些细胞似乎是由在神经干细胞（NS​​Cs;也称为B1细胞）的此区域中的存在来支持，该表达星形细胞抗原胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和干细胞标记物如巢蛋白，ID1和Sox2 ^2。 GFAP表达B1细胞产生的过境放大祖（TAP）细胞（C细胞），表达转录因子DLX2（远端无同源2）和ASCL1（哺乳动物achaete-schute同源物1）和除法迅速几次就会使人产生之前在迁移神经母细胞（A细胞）或oligodendroblasts ^3。 prolif新生成erative神经细胞迁移前方，形成喙迁移流（RMS）的OB，在那里他们融入颗粒和肾小球层的分化抑制性。迁移年轻oligodendroblasts移动到CC，在那里他们成为未成熟的NG2阳性细胞继续分裂本地或分化为成熟的少突胶质细胞髓鞘形成^1,4。

B1细胞，胎儿放射状胶质细胞获得，留住他们的前辈的拉长和偏光形态和表现出与自己的优势高度专业化的关系。他们跨越室管膜哪些行了心室和血管灌溉V-SVZ利基的网络之间。 multiciliated室管膜细胞之间B1细胞插层的小心尖进程和单一非能动初级纤毛结束，而其基底处理延伸很长的距离接近平面血管丛，在将b灌溉这个利基结局丛毛细血管^2,5-8的荒漠和半荒漠层。

从非神经胶质细胞，这也是GFAP ⁺在完整的V-SVZ利基区分B1〜神经干细胞的最可靠的方法是基于整个安装由三维共聚焦显微镜心室侧壁的制剂和它们的分析后免疫染色GFAP标记薄B1-NSC心尖过程，β连环蛋白划定细胞膜，和任一γ微管蛋白作为纤毛基体或乙酰化α微管蛋白的标记物来标记每个纤毛^5,8的程度。从室面这些全坐骑观测表明，B1和室管膜细胞被布置在“风车^”5，其中一个或几个GFAP ^{+ B1}细胞的uniciliated根尖过程由multiciliated室管膜细胞的莲座包围。

B1细胞的形态特征与实验相关的证据我ndicating该血管/内皮细胞和心室脑脊液（CSF）构成作用于神经干细胞^2,6,9-11可溶性信号调节源。在心室的表面，同型和室管膜参与和B1细胞异型apico侧向相互作用包括紧密连接和粘着路口^5,12。此外，在B1和室管膜细胞，如N-钙粘蛋白和V-CAM之间的连接复合牵连粘附分子，已显示出调节不仅B1的高度组织定位在V SVZ小生，而且它们的静止^{12 13。}室管膜-B1细胞单层似乎充当扩散屏障，允许水和小分子从CSF调节的流量，但限制大蛋白^10,11的细胞间通道。实验证据表明，独特的定位B1根尖细胞纤毛可以发挥信令存在于CSF ²多肽的传感器^的作用，5-7。室管膜细胞本身，也具有在NSC行为^14,15的调节作用的可溶性和膜结合信号源。

可追踪核苷，如溴代脱氧尿苷（BrdU）标记，或逆转录病毒已被广泛地用于标记的祖细胞，包括神经干细胞， 在体内 。然而，这些方法不是最佳的长期命运跟踪因为BrdU的信号稀释经过反复的细胞分裂和逆转录病毒似乎优先靶向瞬时放大，由于其为转导^16,17的细胞增殖的必要条件的细胞。为了检查体内 NSC生理学，包括与小生组分的相互作用，这是至关重要的，以建立到标签和跟踪很少分裂细胞，如B1〜神经干细胞基本上是静止的和它们相邻室管膜细胞从未生理条件³下分割的方法。这里，我们表明，慢病毒载体（LVS）允许高效率基因标记ING和成人神经干细胞和非分裂室管膜细胞的长期维护，由于最合理其转导，并整合到靶细胞中的细胞周期无关的方式的基因组中的能力。此外，我们显示如何递送和病毒滴度的帮助路由特异性转导室管膜细胞，但不是B1细胞从而允许对神经干细胞生态位依赖性，室管膜影响的分析。