Summary

Глубокая стимуляция мозга с одновременным МРТ в Грызуны

Published: February 15, 2014
doi:

Summary

Этот протокол описывает стандартный метод для одновременного функциональной магнитно-резонансной томографии и глубокой стимуляции мозга в грызуна. Комбинированное использование этих экспериментальных средств позволяет для исследования глобального нисходящего активности в ответ на электрическую стимуляцию практически в любой цели мозга.

Abstract

Для того чтобы визуализировать глобальные и вниз по течению нейронные ответов на глубокой стимуляции мозга (DBS) при различных целей, мы разработали протокол для использования уровень в крови кислорода зависит (жирный) функциональная магнитно-резонансная томография (МРТ) для изображения грызунов с одновременным DBS. DBS МРТ представляет ряд технических проблем, в том числе точности электрода имплантации, MR артефакты, созданные электрода, выбор анестезии и расслабленному, чтобы минимизировать любые нейронные эффекты, одновременно устраняя движение животных, и обслуживание физиологических параметров, отклонение от которых может поставить в тупик BOLD сигнал. Наша лаборатория разработала набор процедур, которые способны преодолеть большинство этих возможных проблем. Для электрической стимуляции, самодельный вольфрама биполярное микроэлектрод используется, вставляется стереотаксически на месте стимуляции в анестезированной теме. При подготовке к изображений, грызуны закреплены на пластиковой головной убор ипереданы в отверстие магнита. Для седации и паралича во время сканирования, коктейль дексмедетомидина и панкурония постоянно переплетаются, наряду с минимальной дозы изофлюрана; этот препарат минимизирует Смелый потолочный эффект летучих анестетиков. В этом примере эксперимента, стимулирование субталамического ядра (STN) дает жирный шрифт ответов, которые наблюдаются в основном в ипсилатеральных областях коры, с центром в моторной коре. Одновременное DBS и МРТ позволяет однозначным модуляция нейронных цепей в зависимости от местоположения стимуляции и параметров стимуляции, и позволяет наблюдать нейронных модуляций свободных регионального предвзятости. Этот метод может быть использован для изучения вниз по течению модулирования нейронной схемы на практически любой области мозга, с последствиями для обоих экспериментальной и клинической DBS.

Introduction

Определение глобальных вниз по течению нейронной активности замыкания представляет собой серьезную проблему и цель для многих областях систем нейронауки. Недостаток в средствах в настоящее время доступны, что удовлетворить эту потребность, и таким образом есть спрос для увеличения доступности соответствующих экспериментальных установок. Один из таких методов для оценки глобального следствие активации нервной цепи зависит от одновременного применения глубокой мозговой электрической стимуляции (DBS) и функциональной МРТ (фМРТ). DBS-МРТ позволяет для обнаружения последующих реакций на активацию схемы на большой пространственный масштаб, и может быть применен практически в любой цели стимуляции. Это набор инструментов очень хорошо подходит для трансляционных доклинических исследований, в том числе характеристики ответов на терапевтической стимуляции высоких частот.

В дополнение к доступу к подходящим МРТ сканера, успешные эксперименты DBS-МРТ требует рассмотрения ряда variablэс, в том числе типа электрода, метод седации и техническое обслуживание физиологических параметров. Например, выбор электрод должен быть основан на факторах, относящихся к стимуляции эффективности (например. Свинец размера и проводимости, моно-против биполярный), а также совместимость МР и электрода размером артефактов. Электродные артефакты варьироваться в зависимости от материала электрода и размера, а также последовательности, используемой сканирования; тщательного предварительного экспериментальной проверки должны быть использованы, чтобы определить соответствующий тип электрода для каждого исследования. В общем, вольфрам MICROWIRE электроды рекомендуются для этого протокола. Выбор расслабленному и седативное следует эффективно обездвижить животное и уменьшить подавляющий эффект некоторых седативных средств на крови кислородом в зависимости от уровня (жирный шрифт) сигнала. Наконец, крайне важно для поддержания животное в оптимальных физиологических параметров, включая температуру тела и насыщения кислородом.

Протокол, который мы разработали для DBS-МРТ преодолевает многие из этих потенциальных препятствий, и в наших руках, предоставляет надежные и стабильные результаты. Кроме того, эти экспериментальные методики могут быть легко приняты для комбинации с МРТ альтернативных методов интенсификации притока, в том числе optogenetic стимуляции.

Protocol

Заявление по этике: Эта процедура в соответствии с Национальными Институтами Руководства здравоохранения для исследований животных (Руководство по уходу и использованию лабораторных животных) и утверждается Университета Северной Каролины комитета уходу и использованию животных ин…

Representative Results

Типичные функциональные данные были получены в соответствии с приведенной выше протокола в одной крысы с стимулирующего электрода, имплантированного в субталамического ядра на правой стороне. Иллюстрация эфирного установки для DBS МРТ получения изображений представлена ​​на ри…

Discussion

Одновременное DBS и МРТ представляет собой многообещающую экспериментальный набор инструментальных средств для идентификации и характеризации глобальных последующих ответов на нервное возбуждение цепи, в естественных условиях. Основным преимуществом этого метода по сравнению …

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Мы благодарим Shaili Джа и Хизер Decot за помощь в съемках.

Materials

Isoflurane (Forane) Baxter 1001936060
Dexmedetomidine (Dexdomitor) Pfizer 145108-58-3
Pancuronium Bromide Selleckchem S2497
9.4T Small Animal MRI Bruker BioSpec System with BGA-9S gradient
Sterotactic Frame Kopf Model 962
Small Animal Ventilator CWE, Inc.  12-02100 Model SAR-830
Dental Cement A-M Systems 525000 Teets Cold Curing
MouseOx Plus System STARR Life Science Corp.
Capnometer Surgivet, Smith Medical V9004 Series
Stimulus Isolator World Precision Instruments Model A365
MR-compatible Brass Screws McMaster Carr 94070A031 0-80 thread size, 1/4 inch. Can be cut to desired length.
Tungsten Wire California Fine Wire Company 100211 Used to construct MR-compatible stimulating microelectrode
Syringe Pump Harvard Appartus Model PHD 2000 (not MRI-compatible)

References

  1. Paxinos, G., Watson, C. . The rat brain in stereotaxic coordinates, 5th edition. , (2004).
  2. Fukuda, M., Vazquez, A. L., Zong, X., Kim, S. G. Effects of the alpha(2)-adrenergic receptor agonist dexmedetomidine on neural, vascular and BOLD fMRI responses in the somatosensory cortex. Eur. J. Neurosci. 37 (2), 80-95 (2013).
  3. Lai, H. Y., Younce, J. R., Albaugh, D. L., Kao, Y. C., Shih, Y. Y. Functional MRI reveals frequency-dependent responses during deep brain stimulation at the subthalamic nucleus or internal globus pallidus. NeuroImage. In press, (2013).
  4. Frackowiak, R. S. J., et al. . Human Brain Function. , (2004).
  5. Poline, J. B., Brett, M. The general linear model and fMRI: does love last forever. NeuroImage. 62, 871-880 (2012).
  6. Min, H. K., et al. Deep brain stimulation induces BOLD activation in motor and non-motor networks: an fMRI comparison study of STN and EN/GPi DBS in large animals. NeuroImage. 63, 1408-1420 (2012).
  7. Lozano, A. M., Lipsman, N. Probing and Regulating Dysfunctional Circuits Using Deep Brain Stimulation. Neuron. 77, 406-424 (2013).
  8. DeLong, M., Wichmann, T. Deep brain stimulation for movement and other neurologic disorders. Ann. N.Y. Acad. Sci. 1265, 1-8 (2012).
  9. Goodman, W. K., Alterman, R. L. Deep brain stimulation for intractable psychiatric disorders. Ann. Rev. Med. 63, 511-524 (2012).
  10. Pizzolato, G., Mandat, T. Deep brain stimulation for movement disorders. Front. Integr. Neurosci. 6, 2 (2012).
  11. Logothetis, N. K. What we can do and what we cannot do with fMRI. Nature. 453, 869-878 (2008).
  12. Li, Q., et al. Therapeutic deep brain stimulation in Parkinsonian rats directly influences motor cortex. Neuron. 76, 1030-1041 (2012).
  13. Pan, W., Thompson, G., Magnuson, M., Majeed, W., Jaeger, D., Keilholz, S. . Simultaneous fMRI and Electrophysiology in the Rodent. (42), (2010).
  14. Huttunen, J. K., Grohn, O., Penttonen, M. Coupling between simultaneously recorded BOLD response and neuronal activity in the rat somatosensory cortex. NeuroImage. 39, 775-785 (2008).
  15. Logothetis, N. K., Pauls, J., Augath, M., Trinath, T., Oeltermann, A. Neurophysiological investigation of the basis of the fMRI signal. Nature. 412, 150-157 (2001).
  16. Shih, Y. Y., et al. A new scenario for negative functional magnetic resonance imaging signals: endogenous neurotransmission. J. Neurosci. 29, 3036-3044 (2009).
  17. Shih, Y. Y., Wey, H. Y., De La Garza, B. H., Duong, T. Q. Striatal and cortical BOLD, blood flow, blood volume, oxygen consumption, and glucose consumption changes in noxious forepaw electrical stimulation. J. Cereb. Blood Flow Metab. 31, 832-841 (2011).
  18. Shmuel, A., Augath, M., Oeltermann, A., Logothetis, N. K. Negative functional MRI response correlates with decreases in neuronal activity in monkey visual area V1. Nat. Neurosci. 9, 569-577 (2006).
  19. Schridde, U., et al. Negative BOLD with large increases in neuronal activity. Cereb. Cortex. 18, 1814-1827 (2008).
  20. Shmuel, A., et al. Sustained negative BOLD, blood flow and oxygen consumption response and its coupling to the positive response in the human brain. Neuron. 36, 1195-1210 (2002).
  21. Harel, N., Lee, S. -. P., Nagaoka, T., Kim, D. -. S., Kim, S. -. G. Origin of negative blood oxygenation level–dependent fMRI signals. J. Cereb. Blood Flow Metab. 22, 908-917 (2002).
  22. Lee, J. H., et al. Global and local fMRI signals driven by neurons defined optogenetically by type and wiring. Nature. 465, 788-792 (2010).
  23. Carmichael, D. W., et al. Functional MRI with active, fully implanted, deep brain stimulation systems: safety and experimental confounds. NeuroImage. 37, 508-517 (2007).
  24. Tagliati, M., et al. Safety of MRI in patients with implanted deep brain stimulation devices. NeuroImage. 47 Suppl 2, 53-57 (2009).
check_url/fr/51271?article_type=t

Play Video

Citer Cet Article
Younce, J. R., Albaugh, D. L., Shih, Y. I. Deep Brain Stimulation with Simultaneous fMRI in Rodents. J. Vis. Exp. (84), e51271, doi:10.3791/51271 (2014).

View Video