Batrachochytrium dendrobatidis инфекции у земноводных могут быть устранены с помощью пониженную концентрацию (0,0025%) и короткую продолжительность (пять минут ванны для шести дней) итраконазола, чем обычно используется. Менее смертность и меньше негативных побочных эффектов наблюдались с помощью этого протокола модифицированный лечения.
Амфибии испытывают наибольшее снижение любого класса позвоночных и основной причиной этих снижения является грибковая патоген, Batrachochytrium dendrobatidis (BD), что приводит к chytridiomycosis заболевания. Пленные колонии обеспечения важны во всем мире под угрозой видов амфибий и может быть единственным спасательным кругом для тех, кто в критической угрозой исчезновения. Поддержание болезни бесплатно колонии является одним из приоритетов в неволе менеджеров, пока безопасные и эффективные методы лечения всех видов и через стадиях жизни не были идентифицированы. Наиболее широко используется химиотерапевтическое лечение итраконазол, хотя дозировка обычно используется может быть вредным для некоторых особей и видов. Мы провели испытания клинического лечения для оценки, может ли быть найден ниже и безопаснее, но эффективная доза итраконазола вылечить Bd инфекций. Мы обнаружили, что за счет снижения концентрации лечения от 0.01-0.0025% и сокращения продолжительности лечения с 11-6 Дней 5 мин ванны, лягушки могут быть излечены от Bd инфекции с меньшим количеством побочных эффектов и менее связанной с лечением смертности.
Амфибии в настоящее время испытывают наибольшее сокращение биоразнообразия всех позвоночных таксонов 1. Chytridiomycosis, кожное заболевание вызвано хитридиевых грибковых патогенов Batrachochytrium dendrobatidis (BD), является одним из основных причин этих резкое снижение 2 Bd является худшим патоген на запись за причинение утраты биоразнообразия:. Он заражает более 600 видов амфибий и имеет вызвало снижение более чем 300 видов, из которых целых 200 видов стали на грани исчезновения или вымершие 2,3. Амфибия хитридиевых грибок не пройдет конкретных и неясно, какие качества хозяина позволяют Bd инфекции, чтобы прогрессировать в результате чего тяжелые заболевания. Chytridiomycosis приводит к смерти, нарушая ионные каналы в коже, что приводит к потере электролита и сердечной недостаточности 4. Кроме того, Bd супернатант (не содержащий Bd зооспор) вызывает иммунный ответ у головастиков 5 leadinг исследователи верить Bd производит токсичный побочный продукт 6.
Потому что многие виды которых резко сокращается, в неволе колонии обеспечения и селекционные программы являются важными меры по сохранению и может быть единственным спасательным кругом для некоторых видов. Установление и поддержание болезни бесплатно колонии является проблемой для амфибий объектов управления. Нынешние химиотерапевтические способы лечения Bd инфекции, хотя и эффективны, могут быть вредны для животных проходят лечение, и ни один метод единственного метода лечения был успешным у разных видов и возрастных классов амфибий 7.
Несколько клинических испытаний лечения Bd инфекции были выполнены 7. Три наиболее часто используемые методы лечения термотерапия, хлорамфеникол и итраконазол. Тепловая терапия является nonchemotherapeutic вариант лечения, который, кажется, имеет мало побочных эффектов, можно использовать на нескольких этапах жизни, и, вообще говорясоюзником эффективным. В исследовании лечения, Chatfield и Ричардс-Заваки 8 обнаружили, что 96% из обработанных животных рассеялся инфекции после того, как размещены при 30 ° С в течение 10 дней. Хотя этот процесс не был на 100% успешным, он обеспечивает основу для других, чтобы оценить тепла терапию для своего вида. Тепловая терапия, хотя и эффективны в течение многих видов, непрактично для многих горных пород, что не может оставаться при высоких температурах в течение продолжительного периода времени. Хлорамфеникол, антибактериальный, успешно используется для лечения Bd у многих видов, и ингибирует рост грибков в пробирке. В качестве антибактериальных, хлорамфеникол не разрушает грибок конкретно, но, как известно, вызывают апоптоз в клетках эукариот 9. Было предположение, что хлорамфеникол терапия вызывает апоптоз в коже, убив внутриклеточный спорангии, хотя точный механизм действия неизвестен. Хотя ни клинических испытаний не проводилось, и поэтомудоза и время обработки не были оценены, текущие протоколы лечения обычно требуют погружение в течение двух-четырех недель 10,11, что делает это лечение нецелесообразно для наземных амфибий. Хлорамфеникол также ограничен в некоторых странах для ветеринарного применения, потому что воздействие на человека было связано с редкой формой апластической анемии 12.
Итраконазол, азоловый противогрибковое, является наиболее широко используется для лечения Bd инфекции у амфибий в неволе. Наиболее широко используемый протокол для купания животных в 0,01% раствора итраконазола в течение пяти минут в день в течение 11 дней подряд. Этот протокол был получен из стандартов, используемых для управления млекопитающих, и, в то время как в силу для земноводных, она не основана на клинических испытаниях в амфибий 11,13. Этот протокол может вызвать негативные побочные эффекты у некоторых видов, особенно в рода Rana и в головастиков и последние оборотнями 11.Лечение Головастик был успешным использованием значительно более низкую концентрацию (0,0005%) итраконазола, но был связан с депигментации 14. Это же концентрация была опробована на последние оборотнями и признано неудачным при лечении инфекции 15. Потому что есть риск негативных побочных эффектов с итраконазол лечения, некоторые практикующие использовали половину обычной концентрации (0,005%) в течение 11 дней подряд и этот, чтобы быть успешным в лечении BD инфекциями 16.
Настоящее исследование представляет собой резюме судебного разбирательства клинического лечения с использованием итраконазола для лечения Bd инфекции 15. Протокол описывает попытку найти наименьшее время дозы и лечения, который является одновременно безопасным и эффективным для лечения Bd зараженных животных итраконазолом. Животные, используемые в этом исследовании, были недавние Metamorphs из Gulf Coast жаб, Incilius nebulifer.
Используя этот протокол мы смогли безопасно и эффективно уменьшить дозу лечения и время итраконазол лечения Bd у амфибий. Самая низкая доза и время (0,0025% в течение шести дней) лечение было успешным лечение бессимптомно инфицированных I. nebulifer. Эффективность как более низкой доз?…
The authors have nothing to disclose.
Я хотел бы поблагодарить CL Ричардс-Zawacki за помощью концептуализации опытно-конструкторских и оказание помощи с материалами, А. Pessier за помощью, устанавливающего режим лечения и вскрытия анализирует, МВТЧ Chatfield, МДж Робак, К. Таскер и D. Ленгерский за помощью в лабораторные и поддержка и М. Макфадден и П. Харлоу в Зоопарк Таронга за использование их пространства во время съемок. Проект был частично финансируется Луизиана Департамента дикой природы и рыболовства по гранту Луизиана комиссии по экологическому образованию, присужденной LA Brannelly и Life Technologies.
0.1% Aqueous Itraconazole, Sporonox | Janssen Pharmaceutica Inc. | |
NaCl | Fisher Scientific | S640-500 |
KCl | Fisher Scientific | BP366-1 |
CaCl2 | Fisher Scientific | BP510-100 |
NaHCO3 | Fisher Scientific | BP328-500 |
Sterile cotton swabs | Medical and Wire Equipment | MW113 |
1.5 ml micro tubes | Sarstedt | 73.703.217 |
Qiagen DNEasy Blood and Tissue Kit | Qiagen | 69581 |
7500 Real-time PCR | Applied Biosystems | 4351104 |
VIC IPC | Applied Biosystems | 4308323 |
BSA | Applied Biosystems | AM2618 |
Agar | Invitrogen | 30391023 |
Tryptone | Invitrogen | Q10029 |
Penicillin-streptomycin | Invitrogen | 15070-063 |
Petri Dish | Sigma Aldrich | CLS430589 |