マウスにおけるオートファジーを研究するためのモデルとして、盲腸結紮穿刺誘発性敗血症

敗血症、感染に対する全身性炎症反応は、批判的に、重症患者¹における主な死亡原因を表します。最大60％ ^の2の相当な死亡率を持っていることが多い複数菌敗血症につながる腹腔内感染症、敗血症症例の20％を占め、。敗血症関連死亡率は、主に、その後の臓器不全^3,4で多臓器不全に起因する。この病気の発症メカニズムへの追加調査が緊急に新規でより効果的な治療法の開発を促進するために必要とされる。

盲腸結紮穿刺（CLP）法は、 生体内で敗血症をモデル化するための一般的に使用される手順です。盲腸のように、複数菌腹膜炎、血液（菌血症）、敗血症性ショック、多臓器不全への細菌の移動と、最終的には死を⁵年の穿刺の結果、細菌がいっぱいです。一般的には、CLPが臨床反映していると認められている現実をより正確なげっ歯類へのエンドトキシンあるいは精製された細菌の注射などの従来の技術よりも、このように、CLPは、したがって実験的誘導と、敗血症の発症機序の調査のためのゴールドスタンダード（非制限なくが^）6と考えられている。このモノグラフでは、敗血症の発症機序は、オートファジーを含めるかどうかを評価するために設計されたプロトコルを記述します。

オートファジー、進化的に保存された細胞プロセスは、損傷を受けたタンパク質やミトコンドリアなどの細胞小器官のターンオーバーを促進し、細菌^7,8を含む細胞内病原体のクリアランスに重要な役割を果たしている。オートファジーの際に細胞質タンパク質または細胞小器官は、その後、分解⁹リソソームに送られるオートファゴソームと呼ばれる二重膜結合小胞の中に隔離されている。多くのタンパク質は、オートファジー関連遺伝子の哺乳類相同体（ATG）として同定されている、もともとオートファジーの過程を制御する酵母で同定された。微小管関連タンパク質-1軽鎖3B（ホスファチジルエタノールアミン抱合体）-IIをLC3BするLC3B-I（フリー体）から（LC3B）（Atg8のホモログ）の変換は、オートファゴソームの形成⁹の主要なステップである。オートファジー機能不全は老化と癌や神経変性疾患¹⁰を含むヒトの疾患と関連している。さらに、オートファジーは、免疫細胞⁸による抗原提示、リンパ球の開発、サイトカイン分泌などの自然免疫と獲得免疫に影響を与えます。これにより、オートファジーはまた、感染に対する全身性炎症反応（ すなわち、敗血症における）において役割を果たし得ることが合理的と思われる。

現在までにいくつかの方法は、 インビボでの組織損傷におけるオートファジーの役割を評価するために記載されている。これらは、緑色蛍光タンパク質（GFP）-LC3発現マウスや車の定量化の使用を含む電子顕微鏡による組織内のファゴソーム（これらの2つの方法が、このモノグラフで説明します）。追加の方法は、組織ホモジネートにおけるオートファジータンパク質発現の定量化、および（他の箇所に記載されるように）自食フラックスの解析^11-13を含む。このレビューの目的は、実験的敗血症のコンテキストで、生体内でオートファジーを評価するための現在のプロトコルを提供することです。