רשתית דגם ניתוק במכרסמים על ידי הזרקת subretinal של נתרן Hyaluronate

מספר שיטות להקמת מודל RD בעיני מכרסמים דווחו ^{3-15, 22.} רובם לנצל הזרקת subretinal של hyaluronate נתרן כי זה הוא חומר צמיג המשמש בדרך כלל במהלך הניתוח תוך עיני בבני אדם, וזה לא קשור עם כל רעילות עינית ידועה ^1-15. hyaluronate נתרן, ולא יותר מהרגיל מלח או פוספט שנאגרו מלוח (PBS), מגדיל את משך הזמן של RD.

השיטות להזרקת subretinal של hyaluronate נתרן להשתמש באחת משתי גישות: גישת transvitreal ^3-6 או גישת transscleral ^7-15. שני השיטות מבוצעות בהתבוננות בקרקעית העין. בגישת transvitreal, מזרק subretinal הוא הציג לתוך חלל הזגוגית, retinotomy נוצר ברשתית ההיקפית, וhyaluronate נתרן מוזרק לתוך חלל subretinal. בשיטה זו, שתי דמעות רשתית נעשות, מה שמגביר את הסיכון לרשתיתדימום ליטר שעשוי להיכנס למרחב subretinal. בנוסף, קיים סיכון של פגיעה בעדשה כאשר retinotomy נוצר. ישנן מספר שיטות שונה לגישת transscleral. ברוב השיטות האלה ^7-12, לאחר הפחתת לחץ התוך עיני עם לנקב לשכה קדמית, מחט G 30 מחוברת למזרק מלא hyaluronate נתרן מוכנס ישירות לתוך חלל subretinal דרך הלחמית, לובן העין, דמית העין, והרשתית. Hyaluronate נתרן מוזרק לאחר מכן לחלל subretinal. הסיכון לפציעה מדמיע ועדשת רשתית בשיטה transscleral זה הוא פחות מזה בגישת transvitreal. עם זאת, החור שנעשה בלובן העין על ידי מחט 30 G הוא גדול, במיוחד לעיני עכבר, וhyaluronate נתרן מוזרק לתוך חלל subretinal קלות דליפות מהעין דרך פצע scleral. זה מוביל ל, RD פחות עיקש נמוך יותר ומוות של תאי קולטי אור משתנה יותר. יתר על כן, אם דימום כורוידאלית מתרחש בצעד ניקוב scleral, הדימום יתפשט לחלל subretinal כי לחץ התוך עיני הופחת לפני הזרקת hyaluronate subretinal.

מספר גורמים יכולים להשפיע על ההשפעה של RD על הרשתית מנותקת, ובכלל זה גם דימום subretinal והגובה והתמדה של RD ^16-21. עליות מוות של תאי קולטי אור בגובה הולך וגדל של RD ^{16, 17,} ונזק לתאי קולטי אור עשויות להיות נרחבות יותר בגלל דיפוזיה מופחתת של חמצן וחומרים מזינים חיוניים מchoriocapillaris עם RD גבוה יותר בהשוואה לRD הרדוד. דימום subretinal הוא גם רעיל לתאי קולטי אור ^18-21; מנגנונים אפשריים של רעילות זו ברשתית מנותקת כוללים היפוקסיה ושיבוש מטבולים על ידי דימום subretinal כמחסום דיפוזיה, ורעילות עצבית ישירה הנגרמת על ידי מרכיבי דם (כגון ברזל). פציעת עדשה, אשר כבר דווחה לנו השפעה מגינה על retiתאי הגנגליון nal ^23, עשויים להשפיע גם על מוות של תאי קולטי אור אחרי הגיוס של RD. בנוסף, אם אתר פצע הכניסה אינו אטום, hyaluronate נתרן עלול לדלוף החוצה עם מניפולציה העין במהלך אנוקלאציה. זה עשוי להוביל לסיווג שגוי של RD הרדוד, שעשוי בתורו משפיע על הפרשנות של התוצאות.

אנחנו שינינו את שיטת transscleral להזרקת subretinal של hyaluronate נתרן כדי להגדיל את שחזור של RDS ולהפחית את שיעור דימום subretinal. השלב הקריטי של פרוטוקול זה הוא יצירת חתך scleral עצמית איטום באמצעות מחט G 30, המונעת דליפה של hyaluronate נתרן לאחר הזרקה. בניגוד לשיטות קודמות, פרוטוקול זה מבוצע ללא התבוננות בקרקעית כך תשומת לב רבה יותר מוקדשת לפצע scleral. יישום של דבק גם מונע hyaluronate נתרן מ דולף החוצה של העין. מניסיוננו, השיעור של דימום subretinal עם פרוטוקול זה wכמשמעותי פחות מזה עם פרוטוקולים אחרים. אם דימום כורוידאלית מתרחש במהלך שלב חתך scleral, זה יהיה לצאת מהעין דרך פצע scleral כי צעד זה מתבצע לפני הפחתת לחץ התוך עיני. אם דימום כורוידאלית מתרחש לאחר ההפחתה של הלחץ וניתוק של רשתית נוירו התוך עיני, הדם יהיה לנתח לחלל subretinal. מצאנו שזה יקרה בכ -5% מהמקרים בניגוד לכ 10-20% עם טכניקות האחרות. צריכים להיות שלילי בעלי חיים אלה מניתוח.

גם טכניקה זו יכולה לשמש להזרקת subretinal של העברת גנים בתיווך וקטור למקד תאי קולטי אור או הרשתית ^{24, 25.} בגלל הרכב הטיפוסי (PBS, מלוח) לזריקות הללו הוא באופן משמעותי פחות צמיג מ hyaluronate נתרן, טכניקות סטנדרטיות הם הטרידו יותר הדלפות. הטכניקה המתוארת במסמך, על ידי צמצום סיכון זה, עושה ניסויי העברת וקטור יותר לשחזור ואמין.