Anaplastik Tiroid Kanseri Ortotopik Fare Modeli
Summary
Anaplastik tiroid kanseri ortotopik fare modeli Üretimi burada açıklanmıştır. Bu teknik böylece hastalığın ilerlemesi hem de ekran yenilikçi tedavi yaklaşımları incelemek için daha klinik ortam yaratan, bağışık yetmezliği olan farelerin tiroid, insan anaplastik tiroid kanser hücrelerinin cerrahi yerleştirme kullanır.
Abstract
Insan tiroid kanserlerinin hayvan modellerinde çeşitli deri altı ksenogreft ve bağışık yetmezliği olan farelere kanser hücrelerinin ortotopik implantasyonu da dahil olmak üzere, kurulmuştur. Cilt altı ksenogreft modelleri klinik öncesi tarama ve yeni tedavi tedavilerin değerlendirilmesi için değerli olmuştur. Deri altı bir modelini kullanarak bir çok avantaj bulunmaktadır: 1), hızlı, 2), yeniden üretilebilir, ve 3) tümör kurulması, büyüme ve terapötik ajanlara yanıt görsel muayene ile izlenebilir. Ancak, önemli kanıtlar 1-3 deri altı ksenogreft modellerinin kısa geliş ışık tutmuştur. Örneğin, deri altı ksenograft modellerinde tedavi edici özellikleri gösteren tıbbi tedaviler genellikle, insan hastalığı üzerinde kayda değer bir etkisi vardır. Xenographic nakli veya enjeksiyon sitenin mikro bu farklılık kalbinde yer alır.
Ortotopik tümör xenograft modelleri daha biolo sağlamakHastalığın incelemek için gically ilgili bağlam. Bir dizi hayvan içindeki anatomik kökenli eşdeğer içine hastalıklı hücre veya doku implante avantajları uygun bir tümör-konak etkileşimleri için site, hastalıkla ilgili metastaz geliştirme ve araştırma tedavi ilaçları üzerinde siteye özgü etkisini incelemek için yeteneğini de içerir. Onlar yakın insan hastalığı yeniden nedenle, ortotopik ksenogreft modelleri çok daha fazla klinik değeri liman. Bu nedenlerle, gruplar bir dizi bir araştırma aracı 4-7 olarak ortotopik tiroid kanseri modeli yararlanmaktadır.
Burada, biz, son derece invaziv anaplastik tiroid kanseri (ATC), çalışma için bir ortotopik modeli kurar tedavi direnir ve tüm tanısı alan hastalarda neredeyse ölümcül bir yaklaşım açıklar. Kültürlü hücreler, ATC taban membran matrisi içeren bir çözelti içinde bir ayrışmış hücresel süspansiyon olarak hazırlanır. Küçük bir hacim yavaş yavaş inj olansağ tiroid bezine ected. Farelerin genel görünüm ve sağlık minimal postoperatif komplikasyonlar sağlamak ve kanser patolojik penetranslı ölçmek için izlenir. Fareler 4 hafta sonra kurban edilir ve doku histolojik analiz için toplanır. Hayvanlar hastalığın daha ileri ilerleme incelemek için daha sonra-noktalarında alınabilir. Bizim ATC patoloji anlayış ve etkinliği için 2) ekran mevcut ve gelecekteki terapötik ajanlar ATC mücadelede daha 1): Bu ortotopik fare modeli üretimi iki amacı gerçekleştirir bir platform kurar.
Protocol
Representative Results
Discussion
Bizim modelde, hayvanlar 4 hafta sonrası enjeksiyon yoluyla kaşeksi ve solunum sıkıntısı ile ilgili tiroid tümör metastazı ve hastalık gösterdi. Diğer birçok ortotopik modellerinde hedef dışına yayılır çevreleyen doku ve enjeksiyon sonrası kaçak bir hücre süspansiyonu enjekte teslimat, enjeksiyon kullanan ile de mümkündür. Bu söyleniyor, bu işlem ile üretilen bir tanınabilir potansiyel bilinmeyen olmayan hastalığı ile ilgili metastaz veya komplikasyonlara kapalı hedef maruz kalma etkisidir. Bu durum, hastalığın araştırılmaktadır, çoğu xenographic nakli ile genel bir husustur. Bununla birlikte, metastaz gelen kasıtsız sonuçları önemli ölçüde rahatça tiroid bezi kaplayan zarın nüfuz iğne ucu, tüm konik sağlanması ve yavaş yavaş hücresel süspansiyon atarak en aza indirilebilir. Sızıntı enjeksiyon sırasında ya da sonrasında gözlenirse, bu hayvanlar çalışma atlanabilir.
<p class = "jove_content"> Bu hayvanlar tiroid / trakea ve diğer dokuları önce perfüze esastır. Yararları) iki kat, 1 olan kırmızı kan hücreleri) temizlenir ve histolojik örnekleri ve 2 karmakarışık olmaz doku morfolojisi ve bütünlüğü korunur. Ayrıca, rezeke tiroid / trakea bağlı ya bir tümöral kitle ya da anatomik histolojik hazırlanması için gömülü önce tespit edilebilir bir şekilde kesilmelidir içinde entombed olduğunu. Bu önemli ölçüde numune hazırlama süresini azaltır.Bu yazıda ATC hücrelerinin ortotopik enjeksiyonu takiben gelişmiş tiroid tümörün lokal büyüme ve invazyon açıklar. ATC metastaz gibi hematoksilen ve eozin gibi standart histolojik lekeleri, kullanan diğer dokuların histolojik hazırlıkları analiz ederek, ya da immünhistokimya hücre veya patoloji ilgili işaretleri kullanılarak incelenmiştir olabilir. Bu sistem daha g tarafından geliştirilebilircanlı görüntüleme metastaz ve tedavi tedavilerin etkinliğini izlemek için kullanılabilir, böylece enetically floresan gazetecilere tiroid kanser hücrelerini değiştirerek.
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Yazarlar Dr teşekkür etmek istiyorum. Cerrahi eğitim onların yardım için Wenjun Li ve Daniel Kreisel (St Louis Washington Üniversitesi Tıp Fakültesi). RYL Sağlık Hibe R01 DK068057 Ulusal Enstitüleri ve Saint Louis Üniversitesi Rektörlük Araştırma Fonu tarafından desteklenmektedir.
Materials
| Name of Reagent/Material | Company | Catalogue Number | Comments |
| RPMI 1640 cell culture media | Mediatech | 10-041-CV | Media and additives used depend on cell line |
| TC10 Automated Cell Counter | Bio-Rad | 145-0001 | |
| Matrigel | Becton, Dickinson and Company | 354234 | |
| Graefe Forceps, Serrated; Slight Curve, 4″ | Roboz | RS-5135 | |
| Disposable scalpel, No. 15 | Feather | 2975#15 | |
| Olsen Hegar Needle Holder – 4 ½” delicate serrated | gSource | gS 21.5400 | |
| 6-0 nylon black monofilament suture | Surgical Specialties Corporation | 1279B | |
| Heating Pad, reusable, 8″ x 12″ | |||
| Cloth tape, 1″ X 10 yds | Medline | MIINON260101 | For restraining anesthetized mouse |
| Peanut Clipper/Trimmer | Wahl | 8655 | For removing hair from surgical site |
| ChlorHex-Q SCRUB 2% | Penn Veterinary Supply | VED1222 | |
| Betadine | Henry Schein Company | 6906727 | |
| Petrolatum ophthalmic ointment | Dechra Veterinary Products | 17033-211-38 | |
| 2 x 2 gauze, 12-ply | Butler Animal Health Supply | 6936 | |
| Sterile Field, Barrier, 18″ x 26″ | Busse | 696 | |
| Drapes (CSR Wrap) | Cardinal Health | AT 21 412 | |
| 27G ½” needle | Becton, Dickinson and Company | 309623 | |
| 31G 5/16″ needle | Becton, Dickinson and Company | 328438 | |
| Ketamine (9 mg/ml) / xylazine (1 mg/ml) solution | |||
| Triple antibiotic ointment |
References
- Bibby, M. C. Orthotopic models of cancer for preclinical drug evaluation: advantages and disadvantages. Eur. J. Cancer. 40, 852-857 (2004).
- Hoffman, R. M. Orthotopic metastatic mouse models for anticancer drug discovery and evaluation: a bridge to the clinic. Invest. New Drugs. 17, 343-359 (1999).
- Killion, J. J., Radinsky, R., Fidler, I. J. Orthotopic models are necessary to predict therapy of transplantable tumors in mice. Cancer Metastasis Rev. 17, 279-284 (1998).
- Kim, S., et al. An orthotopic model of anaplastic thyroid carcinoma in athymic nude mice. Clin. Cancer Res. 11, 1713-1721 (2005).
- Nucera, C., et al. A novel orthotopic mouse model of human anaplastic thyroid carcinoma. Thyroid. 19, 1077-1084 (2009).
- Todaro, M., et al. Tumorigenic and metastatic activity of human thyroid cancer stem cells. Cancer Res. 70, 8874-8885 (2010).
- Tran Cao, H. S., et al. Real-time imaging of tumor progression in a fluorescent orthotopic mouse model of thyroid cancer. Anticancer Res. 30, 4415-4422 (2010).
- Marlow, L. A., et al. Detailed molecular fingerprinting of four new anaplastic thyroid carcinoma cell lines and their use for verification of RhoB as a molecular therapeutic target. J. Clin. Endocrinol. Metab. 95, 5338-5347 (2010).
- Nehs, M. A., et al. Late Intervention with anti-BRAF (V600E) therapy induces tumor regression in an orthotopic mouse model of human anaplastic thyroid cancer. Endocrinology. 153, 985-994 (2012).
- Nucera, C., et al. Targeting BRAFV600E with PLX4720 displays potent antimigratory and anti-invasive activity in preclinical models of human thyroid cancer. Oncologist. 16, 296-309 (2011).
