Staphylococcus aureus crescita con emoglobina umana come fonte di ferro

S. aureus è un batterio patogeno che richiede ferro a svolgere funzioni vitali metaboliche e causare la malattia. Il serbatoio più abbondante di ferro all'interno dell'ospite umano è eme, che è il cofattore di emoglobina. Per acquisire ferro da emoglobina, S. aureus utilizza un complesso sistema noto come il ferro regolato determinante superficie (Isd) sistema ^1. Componenti della Isd emoglobina legano primo sistema host, quindi estrarre e importare eme, e infine liberare ferro eme nel citoplasma batterico ^2,3. Questo percorso è stato sezionato attraverso numerosi studi in vitro ^4-9. Inoltre, il contributo del sistema Isd di infezione è stato ripetutamente dimostrato in modelli murini ^8,10-14. Stabilire il contributo del sistema Isd all'emoglobina derivato acquisizione di ferro e la crescita ha dimostrato di essere più impegnativo. Saggi di crescita che utilizzano l'emoglobina come fonte unica di ferro sono complicate by dell'instabilità dell'emoglobina commercialmente disponibile, contaminando ferro libero nel terreno di crescita, e la tossicità associata con chelanti del ferro. Qui vi presentiamo un metodo che supera queste limitazioni. Emoglobina alta qualità è preparato da sangue fresco e conservate in azoto liquido. Emoglobina purificata è integrato in ferro riducono medio mimando il ferro-poveri ambiente incontrate dagli agenti patogeni all'interno del ospite vertebrato. Di fame S. aureus di ferro libero e integrando con una forma minimamente manipolato dell'emoglobina ci indurre la crescita in un modo che è interamente dipendente dalla capacità di legare l'emoglobina, estrarre eme, eme passare attraverso la busta cellula batterica e degradare eme nel citoplasma. Questo test sarà utile per i ricercatori che cercano di chiarire i meccanismi di acquisizione ferro hemoglobin-/heme-derived in S. aureus ed eventualmente di altri batteri patogeni.