Keratitis חוזר herpetic סטרומה בעכברים, מודל ללימוד HSK אנוש
Summary
רוב המחקרים של מחלת קרנית herpetic משתמשים במודל זיהום עיקרי. עם זאת, זיהום ראשוני עם HSV-1 אינו בדרך כלל להוביל למחלות אנושיות. כאן אנו מתארים מודל חוזר של מחלה בקרנית herpetic, אשר באופן הדוק יותר מחקה מחלות אנושיות.
Abstract
מחל herpetic עין, קרנית סטרומה herpetic כינה (HSK), היא זיהום שעלול להיות מסנוור של הקרנית שגורמת ליותר מ -300,000 ביקורים קליניים בכל שנה לטיפול. בין 1 ל 2 אחוזים מחולים עם מחלה קלינית חווים אובדן הראייה של הקרנית הנגועה. הרוב המכריע של מקרים אלה הם התוצאה של הפעלה מחדש של זיהום סמוי על ידי הרפס סימפלקס סוג אני וירוס ולא כתוצאה ממחלה חריפה. מעניין, הזיהום החריף הוא המודל המשמש לרוב ללימודי מחלה זו. עם זאת, התחושה הייתה שמודל חוזר של HSK יהיה יותר משקף את מה שמתרחש במהלך מחלה קלינית. את המודלים של בעלי החיים חוזרים לHSK העסיקו שני ארנבות ועכברים. היתרון של ארנבים הוא שהם חווים מחדש מהשהית העדר כל גירוי ידוע. עם זאת, קשה לחקור את התפקיד שהרבה גורמים אימונולוגיים לשחק בHSK החוזר, משום שמודל הארנב אין immunמשאבי ological והגנטיים שיש עכבר. אנחנו בחרנו להשתמש במודל העכבר לHSK חוזר כי יש לו את היתרון של להיות שם משאבים רבים זמינים וגם אנחנו יודעים מתי נתרחש מחדש בגלל מחדש נגרמים עקב חשיפה לקרינת UV-B. עד כה, מודל זה אפשר מעבדות אלה משתמשים בו כדי לקבוע מספר גורמים חיסוניים שחשובים למחלה זו. זה גם אפשר לנו לבחון גם ריפוי ויעילותו.
Protocol
Discussion
הדגם החוזר של קרנית סטרומה herpetic (HSK) המתואר כאן מאפשר לחוקר ללמוד HSK האנושי במודל שהוא מתאים יותר למה שהוא ציין במהלך מחלה האנושית. לכן, העוצמות של המודל הן כי מחלה מתרחשת בהקשר של מערכת חיסון שיש כבר על ידי גירוי במחלה ראשונית. מאז העכברים האלה כבר יש תגובה חיסונית לHSV-1,…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
המחברים מבקשים להודות לד"ר ג'יי Pepose עזר ללמד את המודל אלינו. עבודה זו נתמכה על ידי המכון הלאומי לבריאות EY11885 מענקים (PMS), EY21247 (PMS) ומענק בלתי מוגבל של מחקר כדי למנוע עיוורון למחלקת עיניים.
Materials
| DMEM | Sigma | D5796 |
| Fetal Bovine Serum | Atlanta Biologicals | S11150 |
| Human Serum | Sigma | S7023 |
| L-Glutamine | Cellgro | 25-005-C1 |
| Pen/ Strep | Sigma | P4333 |
| Fungizone | Invitrogen | 15290018 |
| Centrifuge | Sorvall | Legend RT |
| Centrifuge | Beckman | 52-21 |
| Transilluminatior | UVP | 95-0452-02 |
| Sonicatior | Branson | Sonifier 450 |
| Oak Ridge Tubes | Nalgene | Z 720410 |
| Flasks- 7150 | Corning | 430823 |
| Plates- 12 well | Corning | CLS 3513 |
| Plates- 48 well | Corning | CLS 3548 |
| Sterile Conical Tubes- 30 ml | Corning | CLS 430828 |
| Sterile Cotton-tipped Applicators | Fisher | 23-400-125 |
| 30G Needles | Becton-Dickinson | 305106 |
| 25G Needles | BD | 305122 |
| 10 ml Syringe | BD | 309602 |
| 10 ml Syringe | BD | 309604 |
References
- Shimeld, C., Hill, T. J., Blyth, B., Easty, D. An improved model of recurrent herpetic eye disease in mice. Curr. Eye Res. 8, 1193-1205 (1989).
- Shimeld, C., Hill, T. J., Blyth, W. A., Easty, D. L. Reactivation of latent infection and induction of recurrent herpetic eye disease in mice. J. Gen. Virol. 71, 397-404 (1990).
- Shimeld, C., Hill, T. J., Blyth, W. A., Easty, D. L. Passive immunization protects the mouse eye from damage after herpes simplex virus infection by limiting spread of virus in the nervous system. J. Gen. Virol. 71, 681-687 (1990).
- Laycock, K. A., Lee, S. F., Brady, R. H., Pepose, J. S. Characterization of a murine model of recurrent herpes simplex viral keratitis induced by ultraviolet B radiation. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 32, 2741-2746 (1991).
- Keadle, T. L., Stuart, P. M. IL-10 ameliorates corneal disease in a mouse model of recurrent herpetic keratitis. Microbial Path. 38, 13-21 (2005).
- Keadle, T. L., Laycock, K. A., Miller, J. K., Hook, K. K., Fenoglio, E. D., Francotte, M., Slaoui, M., Stuart, P. M., Pepose, J. S. Efficacy of a recombinant glycoprotein D subunit vaccine on the development of primary and recurrent ocular infection with herpes simplex virus type 1 in mice. J. Inf. Dis. 176, 331-338 (1997).
- Keadle, T. L., Laycock, K. A., Pepose, J. S., Stuart, P. M. Proinflammatory cytokines IL-1 and TNF-a are required for recurrent herpetic keratitis in NIH mice. Invest. Ophth. Vis. Sci. 41, 96-102 (2000).
- Keadle, T. L., Usui, N., Laycock, K. A., Kumano, Y., Pepose, J. S., Stuart, P. M. Corneal cytokine expression in a murine model recurrent herpetic stromal keratitis. Ocular Immunol. Inflam. 9, 193-205 (2001).
- Keadle, T. L., Morris, J. L., Pepose, J. S., Stuart, P. M. CD4+ and CD8+ cells are key participants in the development of recurrent herpetic stromal keratitis in mice. Microbial Path. 32, 255-262 (2002).
- Keadle, T. L., Morrison, L. A., Morris, J. L., Pepose, J. S., Stuart, P. M. Therapeutic immunization with a virion host shutoff-defective, replication-incompetent herpes simplex virus type 1 strain limits recurrent herpetic ocular infection. J. Virol. 76, 3615-3625 (2002).
- Keadle, T. L., Laycock, K. A., Morris, J. L., Leib, D. A., Morrison, L. A., Pepose, J. S., Stuart, P. M. Therapeutic vaccination with vhs(-) herpes simplex virus reduces the severity of recurrent herpetic stromal keratitis in mice. J. Gen. Virol. 83, 2361-2365 (2002).
- Keadle, T. L., Morris, J. L., Stuart, P. M. The effects of aminoguanidine on primary and recurrent ocular herpes simplex virus infection. Nitric Oxide. 13, 247-253 (2005).
- Stuart, P. M., Morris, J. E., Sidhu, M., Keadle, T. L. CCL3 protects mice from corneal pathology during recurrent HSV-1 infection. Front. Biosci. 13, 4407-4415 (2008).
- Keadle, T. L., Alexander, D. E., Leib, D. A., Stuart, P. M. Interferon gamma is not required for recurrent herpetic stromal keratitis. Virology. 380, 46-51 (2008).
- Carr, D. J., Austin, B. A., Halford, W. P., Stuart, P. M. Delivery of Interferon-gamma by an adenovirus vector blocks herpes simplex virus Type 1 reactivation in vitro and in vivo independent of RNase L and double-stranded RNA-dependent protein kinase pathways. J. Neuroimmunol. 206, 39-43 (2009).
