내피 Keratoplasty을위한 각막 기증자 조직 준비

1. 설정 : 무균 기법 11 층류 후드 (LFH)를 켭니다. 질소 가스 제어 장치를 켭니다. 그 호스를 본체 유닛과 질소 탱크 사이에 연결되어 있는지 확인합니다. 에 가스를 켭니다. 기체 설정을 조절 탱크에서 50-60 PSI로 설정되어야합니다. 장치의 터빈 압력은 3.3-3.4 바 읽어야 할 것 같아. 테스트 버튼을 누릅니다. 대기 압력 아래에 200이어야합니다 700s와 펌프 1과 2에서 읽을 수 있습니다. 테스트가 완료되면 단위 삐됩니다. 눈 보호, 등 적용, 그리고 모자와 돈 마스크. 손과 돈 비 멸균 장갑을 씻으십시오. 멸균 필드를 설정하는 LFH 및 오픈 랩 내부 살균 키트를 놓습니다. 한 무균 의약품 컵과 안정적인 살균 필드 옆에 멸균 거즈 한 멸균 플라스틱 대야를 놓습니다. 의학 컵에 멸균 이소 프로필 알코올을 부어. 의학 컵로, 아래 팁을 알코올 면봉 / 패드 및 장소 프로브와 pachymetry 프로브를 닦아주십시오. 프로브 팁은 ​​10m 위해 이소 프로필 알코올에 담그다합니다inutes. pachymetry 프로브는 10 분 동안 배어 후에는 플라스틱 분지 알코올과 장소 프로브를 제거하는 prefilled 주사기의 멸균 물을 프로브 팁을 린스. 무균 기술을 사용하여 미리 만든 팩을 이미 일부 않는 멸균 분야에 무균 항목 (블레이드, 멸균 장갑, 그리고 각막보기 회의소) 열어 놓습니다. 보존 매체와 LFH 내부의 장소 (그림 2)에서 각막 조직을 얻습니다. 유리병 (들)을 열고 적절한 보호복 콘센트에 뚜껑 (들) 처분. 비 멸균 장갑을 폐기하십시오. 멸균 장갑을 '돈'이라. pachymeter가있는 필드의 측면에 미리 포장 플라스틱 대야를 놓습니다. 후드로 재입 및 멸균 필드를 만져서 후드 밖에서 라인을 방지하는 등의 방법으로 라인을 확보 후드 밖 꼭지 및 주입 라인 대신 스파이크 엔드에 주입 라인을 연결합니다. 각막 조직 전송을 수행합니다. 부드럽게 씨에서, 조직 및 매체를 따르다기존 유리병에서 멸균보기 챔버에 ngle 운동. 내피 측면을 깨어있게해야합니다. 챔버의 뚜껑을 놓습니다. 멸균 분야에 조직 및 미디어가 들어있는 챔버 보관하십시오. LFH에서 유리병 (들)을 제거합니다. 제거하고 멸균 장갑을 버리고. 스파이크 균형 소금 용액 (BSS) 주입 라인 병. 작업 영역 표면에서 멸균 BSS 약 4 피트 병을 잡아. 멸균 장갑과 수건과 멸균 가운의 두 쌍을 엽니다. 육분 외과 스크럽과 건조한 손을를 수행합니다. 두 쌍 멸균 장갑 후, 무균 가운 입어. 멸균 분야에 기기 상자와 장소 내용을 엽니다. 금속 그릇이나 의학 컵에 BSS 솔루션의 10-20 CC 하는걸. BSS 솔루션 멸균 피펫을 채웁니다. 꼭지와 앞쪽에 챔버 주입 포트에 주입 라인을 연결하고 작은 금액은 피스톤의 꼭대기에서 볼 수 있도록 BSS을 잔뜩. 에 LFH의 위치 인조 챔버거즈 위에. 그라 프트 타이트닝 반지 반시계 회전에 의한 낮은 피스톤. 2. 절차 포셉 사용하여 부드럽게 scleral 림에 의해 각막을 탄다. 조심스럽게 다운 내피 측면과 함께 피스톤 위에 홍채를 중심으로하면서 BSS와 시스템을 내리려고 꼭지를 엽니다. 거품이 각​​막 아래에 볼 수있는 경우 BSS와 기적과 약간 그들을 제거하는 각막을 이동 계속 진행합니다. 공기 거품이 제거되고 나면 주입을 중단. 각막이 피스톤 (그림 3A)를 중심으로되었는지 확인하십시오. 기본 잠금 링에 위치 앞쪽에 챔버 커버하므로베이스의 열린 공간으로 커버 끼워 맞춤 탭니다. 커버는 15 °를 시계 방향으로 회전하여 기지로 커버 조준. 피스톤을 올리고 (그림 3B)를 완전히 조입니다. 멸균 장갑 낀 손가락으로 절차를 수행하는 데 충분한 압력이있다는 것을 보장하기 위해 각막 위에 만지지. 표면 O에 프로브를 배치하여 pachymetry를 확인두께 독서를 얻을 수있는 F 각막 (그림 4). 표준 편차는 10 미만이어야합니다. 그렇지 않을 경우 측정을 재시험. pachymetry을 수행하는 데 사용되지 멸균 장갑 낀 손으로 pachymetry을 수행 손에 터빈 호스를 전달하고 제어 장치에 터빈 호스를 나사. 지원 기술자 기록 pachymetry 읽기 되세요. 오염된 장갑을 제거합니다. 멸균 마킹 펜 사용하여 각막의 중심 (또는 외과 의사가 더 표시를 선호하지 않는다면 표시하지 않음)쪽으로 limbus에서 4mm 라인을 그립니다. 각막 위에 BSS 다섯 방울을 배치 피펫을 사용합니다. 특정 지침은 외과 의사에 의해 제공되지 않는 한 사전 컷 pachymetry 측정 미만 600 μm의 경우 300 μm의 절단 헤드가 사용됩니다. 600 μm의 이상, 350 μm의 절단 헤드가 사용됩니다 바랍니다. 스레드가 당신과만은 번호 향해 마주보고를 통해, microkeratome 머리의 오른쪽에 날개를로드 1 단부를 지적, 연락처 WI을 피하고블레이드 일. 양쪽에서 머리를 개최하는 것은 터빈에 머리를 망치. 인공 챔버 손가락을 조여. 터빈 호스로 터빈을 보자. 5 초 동안 살균 물과 펄스 엔진에 절단 머리를 잠수함이 잠수 한 번 진공 페달을 눌러 블레이드 진동을 테스트합니다. 피스톤 Retighten. 5시에 장착 게시물과 자세와 기지쪽으로 장소 microkeratome. 눌러 블레이드 (그림 5A)를 진동하는 터빈 페달을 누르고 있습니다. 엄지와 검지를 사용하여베이스 및 터빈의 상단 사이에 microkeratome의 한가운데를 누르고 있습니다. 부드러운, 심지어 통해 그리고 각막을 가로질러 만들어 손목을 돌립니다. 릴리스 터빈은 페달과 직선 단위 해제 microkeratome 리프트. 진공 (그림 5B)을 해제하기 위해 진공 페달을 누르십시오. 멸균 장갑과 각막 뚜껑 후에 다시 확인 pachymetry 읽기를 '돈'이라하는 것은되는 초 두께 독서를 얻기 위해 각막 표면에 프로브를 삽입하여 제거된다조직은 매우 얇고 쉽게 손상될 것이 늘. 오염된 장갑을 제거합니다. 기술자 레코드 초 pachymetry 읽기를 지원합니다. 요청하신 경우에는 멸균 마킹 펜 사용, 인공 챔버의 잔류 stromal 침대 중반 주변 가장자리에, 외과의에 의해 마크를 넣습니다. 잔여 stromal 침대에 살균 BSS 몇 방울을 넣으십시오. microkeratome에서 앞쪽에 각막 뚜껑 (그림 6)을 제거하고 인공 앞쪽에 챔버로부터 각막을 제거하기 전에 각막에 그것을 대체합니다. 모자가 제대로 해당되는 경우 뚜껑을 정렬하는 데 마킹 주변 장치를 사용하여 각막 중심으로해야합니다. 부드럽게 각막에 뚜껑을 재배치 면봉의 창을 사용합니다. 앞쪽에 뚜껑 아래에있는 BSS를 흡수하기 위해 새로운 창을 사용합니다. 오픈 꼭지는 거꾸로 챔버를 켜고 낮은 피스톤은 deforming로부터 각막을 막기 위해 충분히 느리게. 베이스의 잠금을 해제하고 기지에서 인공 챔버 컵 밀어하기 BSS 흐름의 압력을 허용합니다. 집게로 부드럽게 당겨t 9시 각막 가장자리, 컵에서 풀어야 12 3시 위치. 일단 느슨하게, 각막을 제거하려면 12시 위치에 집게를 사용합니다. 보기 챔버, 내피 사이드까지 (그림 7)에서 각막를 놓습니다. 보기 챔버에 뚜껑을 놓습니다. 멸균 장갑을 제거합니다. 챔버 덮개를 보는 조이십시오. 포스트 컷 슬릿 램프 평가 및 각막 및 레코드 결과의 반사 현미경을 수행합니다. 냉장고의 적절한 섹션에 장소 챔버 (들). 외과로 이송하기위한 패키지 (그림 8). 3. 대표 결과 부드럽고 균일한 층상 각막 기증자 조직의 기증자 각막 결과의 적절한 기계적 microkeratome의 해부. 이것은 크로스 섹션의 각막의 광학 일관성 tomography (-10 월) 이미지 (그림 9)에 의해 표시됩니다. pachymet에 의해 측정된대로 최종 후부 각막 조직은 충분한 두께이어야합니다공예. 미시간 아이 뱅크에서 지난 6 개월 동안 평균 미리 처리 각막 두께는 558 미크론었고, 사후 각막 조직의 후처리 두께는 158 미크론했습니다. 87 살이 100-200 미크론, 10.9 % 측정한> 200 미크론 및 2.1 % 측정 <100 미크론 사이에 측정된 microkeratome – 해부하는 기증자 조직의 퍼센트. 사후 각막 조직은 이식받는 사람에게 향상된 내피 기능을 제공하는 높은 내피 세포 밀도 (ECD)를 유지합니다. 반사 현미경은 ECD를 측정하는 데 사용됩니다. 지난 6 개월 동안 미시간 안구 은행에서 내피 keratoplasty받을 수있는 것으로 간주 각막 조직의 모든 정보> 2,200 세포 / mm 2 ECD했다. precut DSAEK 조직 중 99 %는 후처리 ECD> 2,400 세포 / mm 2, 19 %는 ECD 있었> 3,000 세포 / mm 2를했다. 후처리 ECD 사전으로의 평균 변화는 1.2 % (P = 0.0003, 이점 두 꼬리 T-테스트)에서 무시할했습니다.절차를 수행하는 동안 발생할 수있는 합병증의 압력 손실, 비대칭 절개, 그리고 상당한 조직 들여쓰기를 (각막 내피 세포의 손실을 초래)가 있습니다. 부적 절한 해부도 조직 천공이 발생할 수 있습니다. 그림 1. 1E에 내피 Keratoplasty 그림 1a를위한 각막 조직의 준비 전반적인 제도 기증 각막 준비 단면의 표현입니다. 1i 대한 수치 층은 DSAEK 수술 중에 이식받는 사람의 각막의 단면 표현입니다. 공여 각막은 인공 앞쪽에 챔버에 탑재하고 microkeratome 머리를 해부한다. 조직 절개 후 두 lamellae 별도지만 앞부분은 얇은 판은 (캡) 외과에 대한 운송을 위해 남아 각막 침대에 다시 배치됩니다. 에방을 운영, 외과 앞부분과 뒷부분 모두 얇은 판을 통해 수직으로 중심 각막 조직을 절단하는 trephine을 사용합니다. trephine 절단 후 주변 기증자 각막은 현장에서 제거됩니다. 후부 얇은 판은 가볍게 주걱으로 앞쪽에 얇은 판에서 제거됩니다. 기증자 사후 얇은 판 (DSAEK 조직)은받는 사람 각막 (1i)의 병에 걸린 부분을 대체합니다. 환자는 제거하는 질병 사후 각막 있습니다. 병에 걸린 사후 각막은 대구경 원으로 intraocular 악기 (역방향 Sinsky 후크)와 함께 득점있다. 병에 걸린 각막 골을 후 사후 각막 멤브레인가 제거됩니다. 기증자 사후 얇은 판 (DSAEK 조직)가 수신자의 눈 속에 위치합니다. 그림 2. 미디어의 각막 조직이 있습니다. 각막 조직 헥타르 후 보존 매체에기증자로부터 rvesting. 그림 3. 인공 앞부분은 상공 회의소에 각막 조직. 각막 조직은 인공 앞쪽에 챔버 이전에 기본 잠금 링이나 조직 해부에 마운트됩니다. 각막 조직은 조직을 통해 봉인베이스 잠금 고리와 인공 앞쪽에 챔버에 마운트됩니다. 4 그림. 각막 조직 두께가 확인합니다. 각막 두께가 각막의 표면에 초음파 pachymetry 프로브를 사용하여 검사합니다. 그림 5. 각막 조직 해부. Microkeratome 블레이드는시 5 번 장착 게시물 및 위치와 기지에 배치됩니다. Microkeratome층상 절개를 만들기 위해 각막을 통해 전달됩니다. 6 그림. 절개 후 각막의 앞부분은 모자. 앞쪽에 각막 뚜껑이 microkeratome의 절개 후 무료가 완료된 것입니다. 그림 7. 상공 회의소보기에 각막를 해부. 절개가 완료되면 각막은 교통 보는 챔버에 반환됩니다. 그림 8. 운송을위한 포장의 각막은.보기 챔버의 각막 그런 다음 안전하게 외과 의사로 수송을위한 포장됩니다. 9 그림. 각막의 10월의 외관.의 10월최종 해부 각막이 (단면)을 각막 두 개의 반쪽으로 분할되어 있는지 보여줍니다. 인터페이스는 화살표로 표시대로 주변 조직보다 더 강렬한 반사이다.