Summary

Diyabetik Sıçanlarda Termal Nosiseptif Eşik Hızlı Belirlenmesinde

Published: May 17, 2012
doi:

Summary

Burada, biz, sıçan ya da fare nocifensive davranışı göstermek olduğu en düşük sıcaklık belirlemek için hızlı, güvenilir ve basit bir prosedür tarif<em> Yani</em><em> Termal nosiseptif eşiği</em> (TNT). Eğer varsa bu yöntem hayvanlara, stres, en az TNTs hassas ve tekrarlanabilir bir tahmini sağlayan bir yavaş artan termal uyaran de geçerlidir.

Abstract

Ağrılı diyabetik nöropati (PDN) hiperaljezi, yani zararlı uyarana artmış duyarlılığı ve allodini yani, normalde zararsız 1 uyaranlara karşı aşırı duyarlılığı ile karakterize edilir. Hiperaljezi ve allodynia 2 diabetes mellitus, birçok farklı kemirgen modellerinde incelenmiştir. Ancak, Bölcskei ark, hayvan modellerinde "acı" nın belirlenmesi belirttiği kendi öznel doğası 3 dolayı zordur. Ayrıca, zararlı termal uyaranlara davranışsal tepkileri belirlemek için kullanılan geleneksel yöntemler genellikle tekrarlanabilirlik ve farmakolojik hassasiyeti 3 yoksundur. Örneğin, Ankier 4 arasında sıcak plaka yöntemi kullanılarak, kılını, yoksunluk ve / ya da arka-ve / veya ön-pençelerin yalamaya sabit bir yüksek ısı uyarıcılar (52-55 ° C) refleksi olarak ölçülür. Ancak, termal uyarana hiperaljezik hayvanların tekrarlanabilir yeniden farklılıklar görünmüyorbu supra-eşik sıcaklıkları 3,5 kullanarak esnek gecikmeleri. Bölcskei ve ark. 6 arasında yakın zamanda açıklanan bir yöntem olarak, burada açıklanan prosedürler farelerde ve sıçanlarda termal nosiseptif eşiklerinin hızlı, hassas ve kesin olarak belirlenmesi (TNTs) sağlar. Metodu fare / sıçan plantar yüzeyinin derisine uygulanmış çok yavaş artan termal uyaran kullanır. Yöntemi gibi PDN gibi hiperaljezik devletleri sırasında, anti-nosisepsiyon incelemek için duyarlıdır. Körük açıklanan prosedürler Almasi ark 5 ve Bölcskei ark 3 ile detaylı olarak yayınlanan olanlar dayanmaktadır. Prosedürler Laboratuar Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (LACUC), Wright State University onaylanmıştır Burada anlatılan.

Protocol

Fare ve sıçanların TNTs kullanılarak belirlenir artan sıcak-plate metre [iHPAM, IITC A.Ş. Yaşam Bilimleri (Woodland Hills, CA)]. ; Veri toplama için bir ısı kontrol ünitesi, yazılım (IITC Bölüm # Yumuşak Serisi 8), bir PC (kişisel altındaki ısıtma sistemi ve yukarıda bir pleksiglas gözlem odası ile bir alüminyum plaka (10 x 20 cm): ekipmanları birkaç bileşenden oluşur bilgisayar) ve bir ayak pedalı uzaktan başlangıç ​​için, durdurmak veya birimin kontrol sıfırlayın. Isıtma sistem…

Discussion

Benzer şekilde termal hiperaljezi 4,13 ölçmek için klasik hot plate testi, nosisepsiyon tayininde burada açıklanan sıçanlar ve fareler nocifensive davranışı ölçmek için hızlı ve güvenilir bir şekilde izin verir. Ancak, klasik test aksine, artan sıcak-levha yöntemi non-invaziv ve neredeyse stressiz olduğunu. Dizginlemek bazı (yani, hayvanın gözlem odasında olmalı) testi gerçekleştirmek için gerekli olmakla birlikte, sıçan ya da fare benzeri alanlarda (örneğin,

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Bu çalışma American Diabetes Association (ADA), Grant JF1-10-14 (MDiF) tarafından finanse edildi. Biz WSU az Hayvan Kaynakları Laboratuvarı personeline teşekkür etmek istiyorum. Yazarlar minnetle Neil Paton, doktora gelen verilerin istatistiksel analizi ile yardım kabul

Materials

Name Company Catalogue number
Incremental Hot-Plate Analgesia Meter IITC Inc. Life Science Part #PE34
Soft Series 8 IITC Inc. Life Science Part # Series8
Streptozotocin Calbiochem 572201

References

  1. Baron, R. Peripheral neuropathic pain: From mechanisms to symptoms. Clin. J. Pain. 16, S12-S20 (2000).
  2. Calcutt, N. A., Jorge, M. C., Yaksh, T. L., Chaplan, S. R. Tactile allodynia and formalin hyperalgesia in streptozotocin-diabetic rats: Effects of insulin, aldose reductase inhibition and lidocaine. Pain. 68, 293-299 (1996).
  3. Bolcskei, K., Petho, G., Szolcsanyi, J. Noxious heat threshold measured with slowly increasing temperatures: Novel rat thermal hyperalgesia models. Methods Mol. Biol. 617, 57-66 (2010).
  4. Ankier, S. I. New hot plate tests to quantify antinociceptive and narcotic antagonist activities. Eur. J. Pharmacol. 27, 1-4 (1974).
  5. Almasi, R., Petho, G., Bolcskei, K., Szolcsanyi, J. Effect of resiniferatoxin on the noxious heat threshold temperature in the rat: A novel heat allodynia model sensitive to analgesics. Br. J. Pharmacol. 139, 49-58 (2003).
  6. Bolcskei, K., Horvath, D., Szolcsanyi, J., Petho, G. Heat injury-induced drop of the noxious heat threshold measured with an increasing-temperature water bath: A novel rat thermal hyperalgesia model. Eur. J. Pharmacol. 564, 80-87 (2007).
  7. Chesler, E. J., Wilson, S. G., Lariviere, W. R., Rodriguez-Zas, S. L., Mogil, J. S. Identification and ranking of genetic and laboratory environment factors influencing a behavioral trait, thermal nociception, via computational analysis of a large data archive. Neurosci. Biobehav. Rev. 26, 907-923 (2002).
  8. Langford, D. J., Crager, S. E., Shehzad, Z., Smith, S. B., Sotocinal, S. G., Levenstadt, J. S., Chanda, M. L., Levitin, D. J., Mogil, J. S. Social modulation of pain as evidence for empathy in mice. Science. 312, 1967-1970 (2006).
  9. Hunt, S. P., Koltzenburg, M. . The neurobiology of pain. , (2005).
  10. Willis, W. D. . The pain system : The neural basis of nociceptive transmission in the mammalian nervous system. , (1985).
  11. Calcutt, N. . Modeling diabetic sensory neuropathy in rats. In: Methods in molecular medicine. Pain research: Methods and protocols. , (2004).
  12. Bars, D. L. e., Gozariu, M., Cadden, S. W. Animal models of nociception. Pharmacol. Rev. 53, 597-652 (2001).
  13. Shaikh, A. S., Somani, R. S. Animal models and biomarkers of neuropathy in diabetic rodents. Indian J. Pharmacol. 42, 129-134 (2010).
  14. Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia. Pain. 32, 77-88 (1988).
  15. Hardy, J. D. Method for the rapid measurement of skin temperature during exposure to intense thermal radiation. J. Appl. Physiol. 5, 559-566 (1953).
  16. Sumino, R., Dubner, R., Starkman, S. Responses of small myelinated &quot;warm&quot; fibers to noxious heat stimuli applied to the monkey’s face. Brain Res. 62, 260-263 (1973).
  17. Hammond, D. L., Ruda, M. A. Developmental alterations in thermal nociceptive threshold and the distribution of immunoreactive calcitonin gene-related peptide and substance p after neonatal administration of capsaicin in the rat. Neurosci. Lett. 97, 57-62 (1989).

Play Video

Citer Cet Article
Alshahrani, S., Fernandez-Conti, F., Araujo, A., DiFulvio, M. Rapid Determination of the Thermal Nociceptive Threshold in Diabetic Rats. J. Vis. Exp. (63), e3785, doi:10.3791/3785 (2012).

View Video