Snelle bepaling van de thermische Nociceptieve drempel in diabetische ratten
Summary
Hier wordt beschreven snel betrouwbare en eenvoudige procedure om de laagste temperatuur waarbij ratten of muizen tonen nocifensive gedrag bepalen,<em> Dat wil zeggen</em> De<em> Thermische nociceptieve drempel</em> (TNT). Deze methode is een langzaam toenemende thermische stimulus zodat een nauwkeurige en reproduceerbare schatting van TNTs minimale eventuele stress bij de dieren.
Abstract
Pijnlijke diabetische neuropathie (PDN) wordt gekenmerkt door hyperalgesie dat wil zeggen, een verhoogde gevoeligheid voor schadelijke stimulus, en allodynie dat wil zeggen, overgevoeligheid voor normaal onschadelijke stimuli 1. Hyperalgesie en allodynie zijn onderzocht in verschillende diermodellen van diabetes mellitus 2. Echter, zoals door Bölcskei et al., bepaling van de "pijn" in diermodellen uitdagend vanwege de subjectieve aard 3. Bovendien is de traditionele methoden gebruikt om gedragsreacties aan schadelijke thermische stimuli te bepalen meestal ontbreekt de reproduceerbaarheid en de farmacologische gevoeligheid 3. Bijvoorbeeld door het gebruik van de hot-plate methode van Ankier 4, krimp, is de handel nemen en / of likken van een van beide achterpoten en / of voorpoten gekwantificeerd als reflex latency bij constante hoge thermische stimuli (52-55 ° C). Echter, dieren die hyperalgesisch aan thermische stimulus niet reproduceerbaar verschil te bestaan in herflex latencies het gebruik van deze supra-drempel temperaturen 3,5. Aangezien de recent beschreven werkwijze Bölcskei et al.. 6 de hier beschreven maakt een snelle, gevoelige en reproduceerbare bepaling van thermische nociceptieve drempelwaarden (TNTs) bij muizen en ratten. De methode gebruikt langzaam toenemende thermische stimulus meestal op de huid van de muis / rat voetzool. De methode is bijzonder gevoelig voor anti-nociceptie bestuderen tijdens hyperalgetische staten zoals PDN. De procedures balg beschreven zijn gebaseerd op die welke gepubliceerd in detail Almasi et al. 5 en Bölcskei et al. 3. De hier beschreven procedures zijn goedgekeurd het Laboratory Animal Care en gebruik Comite (LACUC), Wright State University.
Protocol
Discussion
Net zoals bij de klassieke hete plaat test om thermische hyperalgesie 4,13 kwantificeren, de bepaling van nociceptie hier beschreven staat een snelle en betrouwbare manier om nocifensive gedrag in ratten en muizen te kwantificeren. In tegenstelling tot klassieke test, de incrementele kookplaat methode is niet-invasief en vrijwel zonder stress. Hoewel weerhouden een aantal is nodig om de test uit te voeren (dat wil zeggen, moet het dier in de observatie kamer), zijn ratten of muizen gewend zijn aan ve…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Dit werk werd gefinancierd door de American Diabetes Association (ADA), Grant JF1-10-14 (MDiF). We willen het personeel van het Laboratorium van Animal Resources bedanken WSU. Auteurs dankbaar erkennen hulp bij de statistische analyse van gegevens van Neil Paton, Ph.D.
Materials
| Name | Company | Catalogue number |
| Incremental Hot-Plate Analgesia Meter | IITC Inc. Life Science | Part #PE34 |
| Soft Series 8 | IITC Inc. Life Science | Part # Series8 |
| Streptozotocin | Calbiochem | 572201 |
References
- Baron, R. Peripheral neuropathic pain: From mechanisms to symptoms. Clin. J. Pain. 16, S12-S20 (2000).
- Calcutt, N. A., Jorge, M. C., Yaksh, T. L., Chaplan, S. R. Tactile allodynia and formalin hyperalgesia in streptozotocin-diabetic rats: Effects of insulin, aldose reductase inhibition and lidocaine. Pain. 68, 293-299 (1996).
- Bolcskei, K., Petho, G., Szolcsanyi, J. Noxious heat threshold measured with slowly increasing temperatures: Novel rat thermal hyperalgesia models. Methods Mol. Biol. 617, 57-66 (2010).
- Ankier, S. I. New hot plate tests to quantify antinociceptive and narcotic antagonist activities. Eur. J. Pharmacol. 27, 1-4 (1974).
- Almasi, R., Petho, G., Bolcskei, K., Szolcsanyi, J. Effect of resiniferatoxin on the noxious heat threshold temperature in the rat: A novel heat allodynia model sensitive to analgesics. Br. J. Pharmacol. 139, 49-58 (2003).
- Bolcskei, K., Horvath, D., Szolcsanyi, J., Petho, G. Heat injury-induced drop of the noxious heat threshold measured with an increasing-temperature water bath: A novel rat thermal hyperalgesia model. Eur. J. Pharmacol. 564, 80-87 (2007).
- Chesler, E. J., Wilson, S. G., Lariviere, W. R., Rodriguez-Zas, S. L., Mogil, J. S. Identification and ranking of genetic and laboratory environment factors influencing a behavioral trait, thermal nociception, via computational analysis of a large data archive. Neurosci. Biobehav. Rev. 26, 907-923 (2002).
- Langford, D. J., Crager, S. E., Shehzad, Z., Smith, S. B., Sotocinal, S. G., Levenstadt, J. S., Chanda, M. L., Levitin, D. J., Mogil, J. S. Social modulation of pain as evidence for empathy in mice. Science. 312, 1967-1970 (2006).
- Hunt, S. P., Koltzenburg, M. . The neurobiology of pain. , (2005).
- Willis, W. D. . The pain system : The neural basis of nociceptive transmission in the mammalian nervous system. , (1985).
- Calcutt, N. . Modeling diabetic sensory neuropathy in rats. In: Methods in molecular medicine. Pain research: Methods and protocols. , (2004).
- Bars, D. L. e., Gozariu, M., Cadden, S. W. Animal models of nociception. Pharmacol. Rev. 53, 597-652 (2001).
- Shaikh, A. S., Somani, R. S. Animal models and biomarkers of neuropathy in diabetic rodents. Indian J. Pharmacol. 42, 129-134 (2010).
- Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia. Pain. 32, 77-88 (1988).
- Hardy, J. D. Method for the rapid measurement of skin temperature during exposure to intense thermal radiation. J. Appl. Physiol. 5, 559-566 (1953).
- Sumino, R., Dubner, R., Starkman, S. Responses of small myelinated "warm" fibers to noxious heat stimuli applied to the monkey’s face. Brain Res. 62, 260-263 (1973).
- Hammond, D. L., Ruda, M. A. Developmental alterations in thermal nociceptive threshold and the distribution of immunoreactive calcitonin gene-related peptide and substance p after neonatal administration of capsaicin in the rat. Neurosci. Lett. 97, 57-62 (1989).
