Summary

햄스터의 지느러미 피부에 피부 Leishmaniasis : Antileishmanial 약물의 상영을위한 유용한 모델

Published: April 21, 2012
doi:

Summary

의 intradermal 주입하여 피부 leishmaniasis에 대한 실험 햄스터 모델의 최적화<em> Leishmania</em> 지느러미 피부에 promastigotes. 이 방법은 접종시, 후속, 병변의 특성, 치료의 적용과 임상 샘플을 얻는 데 유용합니다. 음식과 물 공급을 위해 운동, 검색은 연극과 사회 활동이 보존됩니다.

Abstract

전통적으로, 햄스터는 실험적으로 주둥이이나 노상 강도에 주사한다. 그러나 이들 사이트에 궤양이 항상 발생하지, 병변 크기의 측정이 어려운 절차이며 동물 때문에 병변으로 인해 먹고 호흡하며 이동하기 어려움을 보여줍니다. 피부 leishmaniasis, 젊은 성인 남성과 여성의 골든 햄스터를위한 햄스터 모델을 최적화하기 위해서는 (Mesocricetus auratus) 1-1.5 X L0 7 Leishmania 종의 promastigotes 이후 병변의 진행과 함께 지느러미 피부에 intradermally 주입되었다이 최대에 대한 평가되었다 16주 게시물 감염. 그들은 다른 종족에 의해 감염에 감염될만큼 그것이 Leishmania 상대로 마약을 평가할 바이오 모델이 적절한 것으로 간주되기 때문에 골든 햄스터가 선택되었다. 만성하지만 제어 병변, 그리고 인간에서 관찰 이들과 유사한 증상과 임상 진화의 햄스터 결과의 피부 감염. 따라서 식당 Oindurations 및 궤양의 면적에 따라 병변의 크기를 측정하여 감염의 F 정도는 가능합니다. 이러한 접근 방식은 접종시의 다양성과 쉬운 관리를 입증되었습니다 다른 치료 후 임상 샘플을 다른 방법과 취득을 통해 전형적인 병변 (궤양), 트리 트먼트의 응용 프로그램을 후속 조치 및 특성. 이 방법은 운동과 관련하여 동물의 삶의 질, 음식, 물, 놀이와 isalso가 보존 사회 활동에 대한 검색을 사용함으로써.

Protocol

1. 햄스터의 감염 1. 동물 1백40-1백60g 무게 탐욕 암컷과 수컷 골든 햄스터 (Mesocricetus auratus), 6-8 주 동안 사용됩니다. 그들은 표준 설치류 말린 음식을 먹지 않나와 물 광고 libitum 함께 제공, 온도 제어 숙소에서 동물 시설에서 지내게됩니다. 동물과 관련된 모든 절차는 실험 동물의 이용 기관 윤리위원회의 승인을하고 있습니다. dermotropic Leishma…

Discussion

피부 leishmaniasis는 열대와 neotropics의 발병이다. 그것은 종종 있기 때문에 작은 피부 nodules에서 총 점막 조직 파괴에 이르기까지 임상 발현의 다양한 스펙트럼의 질병의 그룹로 언급됩니다. 대부분의 사용 가능한 약물은 비용이 많이 드는이며, 장기 치료 regimens가 필요하고 새로운 약물의 발견 necessitating, 점점 비효 해지고 있습니다.

마우스 모델은 널리 사용되고 있지만, 일부 …

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

COLCIENCIAS과 열대 질병에 대한 제품 개발을위한 센터 – – CIDEPRO이 연구는 Antioquia 대학 (CODI), 과학 기술 개발을위한 콜롬비아 연구소에서 연구위원회에서 교부금에 의해 지원되었다.

Materials

Name of the reagent Type Company Catalogue number
Ketamine Reagent Holliday –Scott S.A  
Xilacine Reagent Synthesis  
PBS Reagent GIBCO 14190-136
Digital caliper Equipment Fisher 15-077-958
Giemsa Reagent SIGMA GS1L-1L
Formalin Reagent Nova lab 11273
Paraffin Reagent Pechiney Plastic Packaging PM-996
Haemotoxilin Reagent Nova lab 10870103
Eosin   Nova lab 10870203
Kodak Ektachem dry chemistry Equipment Kodak Ektachem DT-60
meglumine antimoniate Reagent Aventis  
Microscopy Equipment Nikon YS2-T

References

  1. WHO. Control of the leishmaniasis. Report of a Meeting of the WHO Expert Committee on the Control of Leishmaniasis WHO. 949, (2010).
  2. Titus, R. G., Marchand, M., Boon, T., Louis, J. A. A limiting dilution assay for quantifying Leishmania major in tissues of infected mice. Parasite Immunol. 7, 545-555 (1985).
  3. Reynolds, K. M. The Kodak Ektachem dry layer technology for clinical chemistry. Upsala. J. Med. Sci. 91, 143-146 (1986).
  4. Handman, E., Ceredig, R., Mitchell, G. F. Murine cutaneous leishmaniasis: disease patterns in intact and nude mice of various genotypes and examination of some differences between normal and infected macrophages. Australian J. Exp. Biol. Med. Sci. 57, 9-29 (1979).
  5. Hanson, W., Chapman, W., Waits, V., Lovelace, J. Development of Leishmania (Viannia) panamensis lesions and relationship of numbers of amastigotes to lesion area antimony-treated and untreated hamsters. J. Parasitol. 77, 780-783 (1991).
  6. Henao, H. H., Osorio, Y., Saravia, N. G., Gómez, A., Travi, B. Efficacy and toxicity of pentavalentantimonials (Glucantime and Pentostam) in an American cutaneous leishmaniasis animal model: luminometry application. Biomédica. 24, 393-402 (2004).
  7. Travi, B. L., Martinez, J. E., Zea, A. Antimonial treatment of hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis: assessment of parasitological cure with different therapeutic schedules. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 87, 567-569 (1993).
  8. Hommel, M., jaffe, C. L., Travi, B., Milon, G. Experimental models for leishmaniasis and for testing anti-leishmanial vaccines. Ann. Trop. Med. Parasitol. 89, 55-73 (1995).
  9. Travi, B. L., Osorio, Y., Saravia, N. G. The inflammatory response promotes cutaneous metastasis in hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis. J. Parasitol. 82, 454-457 (1996).
  10. Travi, B. L., Osorio, Y. Failure of Albendazole as an alternative treatment of cutaneous Leishmaniasis in the hamster model. Memorias Instituto Oswaldo. 93, 515 (1998).
  11. Travi, B. L., Osorio, Y., Melby, P. C., Chandrasekar, B., Arteaga, L., Saravia, N. G. Gender is a major determinant of the clinical evolution and immune response in hamsters infected with Leishmania spp. Infect Immun. 70, 2288-2296 (2002).
  12. Osorio, Y., Melby, P. C., Pirmez, C., Chandrasekar, B., Guarín, N., Travi, B. L. The site of cutaneous infection influences the immunological response and clinical outcome of hamsters infected with Leishmania panamensis. Parasite Immunol. 25, 139-148 (2003).
  13. Osorio, Y., Bonilla, D. L., Peniche, A. G., Melby, P. C., Travi, B. L. Pregnancy enhances the innate immune response in experimental cutaneous leishmaniasis through hormone-modulated nitric oxide production. J. Leukoc. Biol. 83, 1413-1422 (2008).
  14. Espitia, C. M., Zhao, W., Saldarriaga, O., Osorio, Y., Harrison, L. M., Cappello, M., Travi, B. L., Melby, P. C. Duplex real-time reverse transcriptase PCR to determine cytokine mRNA expression in a hamster model of New World cutaneous leishmaniasis. BMC Immunol. 22, 11-31 (2010).

Play Video

Citer Cet Article
Robledo, S. M., Carrillo, L. M., Daza, A., Restrepo, A. M., Muñoz, D. L., Tobón, J., Murillo, J. D., López, A., Ríos, C., Mesa, C. V., Upegui, Y. A., Valencia-Tobón, A., Mondragón-Shem, K., RodrÍguez, B., Vélez, I. D. Cutaneous Leishmaniasis in the Dorsal Skin of Hamsters: a Useful Model for the Screening of Antileishmanial Drugs. J. Vis. Exp. (62), e3533, doi:10.3791/3533 (2012).

View Video