在鼠害声不惊人死不休的习惯和前脉冲抑制

1。协议的设计 校准：一组实验前，校准扬声器。这是很重要的，使扬声器显示，被实验者设置的确切体积。此外校准灵敏度的传感器平台，根据供应商的手册惊吓箱。换能器转换成电压信号的垂直移动的平台。确保校准系统时，有没有正在进行的实验，所有箱子校准以同样的方式。 I / O功能：如果新菌株的小鼠或大鼠进行了测量，应建立一个输入/输出功能。一个恒定的背景白噪声65至68分贝（见下文）5-10分钟的驯化期后，应显示的惊吓刺激（20毫秒白噪声），每20秒，在70-75分贝左右开始。惊吓刺激的强度将增加2-5分贝，直到达到120-130分贝，在10-30试验造成惊吓刺激（见图1）彼此之间的刺激。 在一个协议，协议结构 ：习惯，前脉冲抑制可以测量。该协议是划分成一个驯化期间，块I（习惯），紧接着第二块（生产者价格指数，图2）。在测量前脉冲抑制，动物应始终接受不惊人死不休的习惯，使惊吓衰减由于习惯不干预与PPI测量。 驯化期间：每个动物进行测试的时候，它首先进行驯化阶段，以适应动物的持有人，惊跳框和背景噪音。在5-10分钟驯化期间，6568分贝白噪声恒定的背景噪声（取决于环境噪声）显示，但不惊人死不休的刺激。在这个阶段，动物会平静下来，停下来探索环境，并停止走动。 我习惯座：对于短期的习惯（运输及房屋局局长），30 -100之间的惊吓刺激，应根据申请的背景。惊吓刺激，通常持续时间为20毫秒的白噪声和非常陡峭的上升时间（0，如果可能的话）。坐落在I / O功能达到高原最大的惊吓反应，一般在105至115分贝的音量强度。单独审判之间的​​时间间隔应始终为20秒或随机在10和30秒（见讨论和图3）之间。 第二座前脉冲抑制：为了衡量PPI吓一跳脉冲单独与一个脉冲试验，试验是在第二座pseudorandomized。背景噪声和惊吓刺激块一脉冲是一个持续时间为4毫秒的白噪声也急剧上升时间。两个参数可以是多种多样的：不惊人死不休的脉冲强度的脉冲（见讨论）之间的脉冲刺激间隔。我们建议经常使用两个不同的脉冲强度（75和85分贝）和两个不同interstimulus的时间间隔（30毫秒，100毫秒）。因此，有四种不同的脉冲，脉冲试验加单独的惊跳脉冲试验pseudorandomized并显示各10次，总计50试验。审间的时间间隔可以为20秒或随机在10和30秒（见讨论）之间。在某些情况下，它可能是有益的添加一个第六种试验，这是一个脉冲单独审判（见讨论和图4）。 长期习惯：为了衡量LTH，整个协议是运行在随后至少5天。另外，只驯化阶段和块，我可以运行，但是，为了看到LTH，阻止我应该包含至少惊吓100刺激。介绍的每天30刺激导致很少或没有在大多数动物的LTH，尤其是在小鼠。运行应约每一天的同一时间，由于惊吓反应振幅与昼夜周期波动。 2。处理和动物驯化有很大的差异，在处理和大鼠与小鼠的驯化。老鼠将被放置到合适的动物2-5分钟的背景噪音，但没有惊吓刺激（驯化阶段程序）持有人（他们不应该受限制）。此过程应重复3-5次，每天一次或两次，直到排便和排尿鼠标持有人停止或大大降低。动物持有人应始终更换或清洗后的动物被删除。 应至少三次会议17处理大鼠。在第三处理会议结束时，它们被放置到一个合适的动物持有人（不限制）和背景噪音暴露几分钟。取出后，他们可以得到相应的回报以表格P葵花籽ositive协会与测试过程。重复此过程两次，逐渐扩大的驯化时间，整个协议运行之前。 对于测试会话，动物被放置到所有分庭，门窗紧闭，驯化阶段的协议，阻止我和二块运行。如果有不同的动物群体（注射剂，基因型），他们应该是混合型或随机在不同的运行和不同的盒子。如果动物反复测试（例如，具有不同的治疗方法），应重新测试，在同一个盒子。对于重复PPI大鼠测试，我们也建议运行一个完整的协议，实际的数据收集发生之前。 PPI往往提高之间的第一次和第二次测试会议（PPI学习），此后保持一致。它也消除了LTH的很大一部分。 3。数据分析 短期的习惯 ：对于短期的习惯分析，阻止所有惊吓的反应，我，绘制每个动物。如果一个组内的动物也有类似的惊吓反应幅度，值可以是动物之间的平均值。然而，在大多数情况下，绝对不惊人死不休的振幅不同动物之间和惊吓水平相当，一般都不会分布。在这种情况下，它是较为可行的正常化每个动物的数据，其第一或前两个，惊跳反应块的平均I（动物有时入睡，在驯化阶段低的惊吓反应和高第二个不惊人死不休）。平均规范化的数据，然后可以在所有动物，以积习惯的过程中。对于习惯金额的量化考核，得分可以计算出每种动物，如平均除以平均前两个反应（图6）在过去10惊跳反应。 前脉冲抑制：前脉冲抑制分析，第二块的数据进行排序，根据审判的类型（例如，通过脉冲ISI的强度和持续时间的所有相关数据列导出到Excel和排序）。每个审判类型的10个的痕迹，然后平均，脉冲，脉冲试验的结果值除以惊跳脉冲仅值乘以100。这揭示了不同的脉冲对每个动物的条件下不惊人死不休的剩余量（基准惊跳％）。基线不惊人死不休（单脉冲）是100％。这些值可以跨一组动物平均，并绘制（图7a）。另外，PPI的金额可以绘制减去100％（图7b），其余的惊吓反应。请注意：当你比较生产者价格指数在不同群体的动物，你应该也总是报告如比较惊跳脉冲单独试验的绝对不惊人死不休的振幅（或块我惊吓振幅）在基线不惊人死不休的振幅是否有差异， 。 长期习惯：为了分析LTH块的每一天我的前两个反应的平均值，并绘制在至少连续五次测试会议。这消除的可能性，在运输及房屋局局长的差异影响LTH分析的结果。如果已经建立，在不影响治疗/基因块及房屋局局长，或者所有响应，我可以简单地平均每天被绘制。 LTH可以量化的一个习惯得分最后的日子“价值的第一天”的价值除以，再乘以100计算，使初始吓一跳水平的剩余百分比显示LTH后。习惯的分数，然后可以平均跨动物（图8）。 4。代表性的成果： I / O功能：鼠害通常开始从85-90分贝的音量惊人死不休（20毫秒，白噪声） 。惊吓反应增加，数量不断增加，通常达到100-110分贝的最高。如果动物大大偏离这些价值观，动物可能会破坏听觉能力或运动能力。典型的I / O功能都显示在图5。 短期的习惯 ：处理得好大鼠正常habituate他们最初的惊吓反应的60％左右;但是，也有巨大的个体差异和应变差异。通常在发生前几个刺激最强的习惯效果。的小鼠一般不habituate小于大鼠（通常是80％左右），但应变的差异可能会非常大。一个典型的习惯当然是在图6所示。 前脉冲抑制：大多数老鼠显示出最佳的脉冲（85分贝，4毫秒，白噪声）的90％左右，PPI 。 PPI是非常强大的，个体差异与这些实验的设置相对较小。下卷prepulses产量少的生产者价格指数和多变性（甚至在一种动物），但似乎也更容易受到药物或遗传操作。不同的生产者价格指数结果如图7所示。 长期习惯：长期的习惯，可观察到了几个测试会话。 LTH是非常强大大鼠。在小鼠实验中，它往往需要很多的惊吓刺激，在每届会议的演示，以观察LTH。典型的LTH结果可以看出，在图8。 图1 I / O功能。刺激协议后5-10分钟的驯化期。 65分贝的声压等级（SPL）的背景噪声并没有惊吓刺激（未显示），20毫秒白噪声刺激是每20秒。从75至130 dB，5 dB增量（BG =背景噪音），强度逐渐增大。 图2：在整个协议的议定书“相结合的习惯和PPI测量结构。的，恒定的背景噪音为65分贝应用。有5-10分钟的驯化期。没有任何进一步的刺激。紧接着，习惯性测试30-100惊吓刺激（块I，见图3）。这是紧接着由PPI测试（二座，见图4）。 图3。刺激（块）协议，用于测量习惯。一个例子是一个典型的块，我测试的短期习惯。它由30 100 20毫秒105分贝0上升时间白噪声审间间隔20秒（ITI）的相同试验。本议定书的变化可能包括更高的惊人死不休的刺激强度或变量ITIS 图4。刺激测量PPI（第二座）的协议 。一种典型的一个BLOCK II测试PPI例子所示。第二座由5-6个不同的试验类型，各10次是在pseudorandomized为了。在这里，两个不同的脉冲强度（75分贝和85分贝）和两个不同interstimulus的时间间隔（ISIS，30和100 ms）进行测试。惊吓刺激的试验和脉冲单独试验穿插。此块将有6×10 = 60的试验。 Prepulses 0上升时间4毫秒白噪声脉冲。本议定书的变化将包括的变量ITIS，不惊人死不休的刺激强度较高，不同的脉冲强度和/或持续时间，和不同的脉冲和脉冲之间的交收指示。 图5。一个I / O功能。一脉相承的11个人小鼠的输入/输出曲线显示为灰色。在这种情况下，个人不惊人死不休的幅度有很大的不同（惊跳反应任意单位）。黑色实线显示的平均惊跳幅度在不同的惊吓刺激强度和标准错误。这些小鼠在105分贝达到其最大的惊吓反应。 图6，例如短期的习惯数据。一个典型的短期平均20只小鼠的习惯曲线所示。其前两个试验1和2的惊吓反应的平均每只小鼠惊跳幅度在30惊跳刺激正常化。跨小鼠和规范化的数据，然后平均计算标准错误。 图7例PPI数据答：平均的生产者价格指数的8只小鼠的数据显示。 10吓一跳第二块单独的试验，平均每个鼠标和其他审判类型的平均值作为刺激的惊吓振幅的百分比表示。该图显示了不同的脉冲条件下的惊吓反应振幅。两种不同的ISIS（30和100 ms）和两个不同的脉冲强度（75和85分贝）进行了测量。 B：在A，但PPI在基线吓一跳％量绘制相同的数据。如上图所示的数据是从100中减去。这些小鼠表现出最大的生产者价格指数在50％左右。请注意，相同的协议收益率大部分在90％左右的大鼠株PPI。 图8例如长期习惯的数据 ：18只小鼠均LTH数据显示。 T他第一次两个惊吓反应块中的每一天我的平均值在所有小鼠。主要是由于个别小鼠之间的绝对不惊人死不休的幅度差异比较大的标准误差棒。乙：归不惊人死不休的幅度超过5天的18只小鼠。为了降低噪声，连续6块我（30刺激）惊吓反应组始终平均每头牲畜，造成5块我为每个动物每天的值。这些被归为每个动物的第一天第一个值（100％）。在所有18只动物的平均显示。它显示及房屋局局长在每一天，以及跨5天的LTH。