Application d'une souris ligaturés Assay Peyer Patch anse intestinale pour évaluer absorption par les cellules bactériennes M

L'intérieur de notre intestin est habité avec un nombre énorme de bactéries commensales. La surface de la muqueuse du tractus gastro-intestinal est continuellement exposé à eux et occasionnellement à des agents pathogènes. Le tissu lymphoïde associé intestin (GALT) jouent un rôle clé pour l'induction de la réponse immunitaire muqueuse de ces microbes ^{1, 2.} Pour initier la réponse immunitaire muqueuse, les antigènes des muqueuses doivent être transportés de la lumière intestinale à travers la barrière épithéliale dans les follicules lymphoïdes organisés tels que les plaques de Peyer. Cette transcytose antigène est médiée par des cellules spécialisées épithéliales M ^{3, 4.} Cellules M sont atypiques des cellules épithéliales qui ont activement phagocyter macromolécules et les microbes. Contrairement aux cellules dendritiques (CD) et les macrophages, les antigènes cibles pour la dégradation des lysosomes, les cellules M transcytose essentiellement des antigènes internalisés. Cette transcytose macromoléculaires vigoureuse à travers les cellules M délivre antigène aux sous-jacente a organisé une follicules lymphoïdesD est considérée comme essentielle pour initier antigène spécifique la réponse immunitaire muqueuse. Cependant, les mécanismes moléculaires favorisant cette absorption d'antigène par les cellules M sont largement inconnus. Nous avons précédemment rapporté que la glycoprotéine 2 (GP2), spécifiquement exprimé sur la membrane plasmique apicale des cellules M des entérocytes, sert de récepteur transcytotiques pour un sous-ensemble de commensaux et entérobactéries pathogènes, dont Escherichia coli et Salmonella enterica sérotype Typhimurium (S. Typhimurium ), en reconnaissant FimH, un composant de type I pili sur la membrane bactérienne externe ^5. Ici, nous présentons une méthode pour l'application de doser un Peyer souris correctif anse intestinale afin d'évaluer l'absorption par les cellules bactériennes M. Cette méthode est une version améliorée du test en boucle intestinale de souris précédemment décrites ^{6, 7.} Les points sont améliorés comme suit: 1. L'isoflurane a été utilisé comme un agent anesthésique. 2. Environ 1 cm ligaturé y anse intestinalePatch ING Peyer a été mis en place. 3. Les bactéries absorbées par les cellules M ont été marquées par fluorescence par le réactif de marquage par fluorescence ou par surexpression de la protéine fluorescente comme la protéine fluorescente verte (GFP). 4. Cellules M dans l'épithélium du follicule associée couvrant les plaques de Peyer ont été détectées par l'ensemble de montage immunostainig avec Gp2 anticorps anti. 5. Fluorescent transcytose bactérienne par les cellules M ont été observées par l'analyse microscopique confocale. Le dosage de Peyer souris correctif anse intestinale pourrait fournir la réponse quel genre de bactéries pathogènes ou commensales transcytosed par les cellules M, et peut nous amener à comprendre le mécanisme moléculaire de la façon de stimuler le système immunitaire muqueux à travers les cellules M.