Detecção biomolecular quantitativos, de alto rendimento, em tempo real, sem rótulo e (DNA, proteínas, etc) em SiO<sub> 2</sub> Superfícies pode ser conseguido usando uma técnica simples interferométricos que depende de iluminação LED, o mínimo de componentes ópticos, e uma câmera. O sensor de imagem Interferometric Reflectância (IRIS) é barato, simples de usar, e passíveis de microarray formatos.
A medição sensíveis de interações biomoleculares tem uso em muitos campos e indústrias como a biologia básica e microbiologia, monitoramento ambiental / agrícola / biodefesa, nanobiotecnologia, e muito mais. Para aplicações de diagnóstico, monitoramento (detectar) a presença, ausência, ou a expressão anormal de biomarcadores de proteômica alvo ou genômico encontrado em amostras de pacientes pode ser usado para determinar abordagens de tratamento ou eficácia terapêutica. Na área da pesquisa, a informação sobre afinidades e especificidades molecular são úteis para a plena caracterização dos sistemas sob investigação.
Muitos dos sistemas atuais empregados para determinar as concentrações moleculares ou afinidades contam com o uso de etiquetas. Exemplos desses sistemas incluem imunoensaios tais como o ensaio imunoenzimático (ELISA), reação em cadeia da polimerase (PCR), ensaios de eletroforese em gel e espectrometria de massa (MS). Geralmente, esses rótulos são fluorescentes, radiológicas, ou colorimétrico na natureza e estão directa ou indirectamente ligados ao alvo molecular de interesse. Embora o uso de etiquetas é amplamente aceito e tem algumas vantagens, há desvantagens que estão estimulando o desenvolvimento de novas rótulo sem métodos para medir essas interações. Estas desvantagens incluem aspectos práticos, tais como o custo aumentou ensaio, reagentes vida e as preocupações de armazenamento, usabilidade e segurança, desperdício de tempo e esforço na rotulagem, ea variabilidade entre os reagentes diferentes devido aos processos de rotulagem ou rótulos próprios. Em uma base de pesquisa científica, o uso desses rótulos também pode introduzir dificuldades, tais como preocupações com os efeitos sobre a funcionalidade de proteínas / estrutura devido à presença dos rótulos anexados ea incapacidade de medir diretamente as interações em tempo real.
Aqui apresentada é a utilização de um biosensor rótulo sem nova ótica que é passível de microarray estudos, denominado o Imaging Sensor Interferometric Reflectância (IRIS), para detecção de proteínas, DNA, material antigênico, patógenos todo (virions) e outro material biológico. O sistema IRIS tem sido demonstrado ter alta sensibilidade, precisão e reprodutibilidade de interações biomoleculares diferentes [1-3]. Benefícios incluem a capacidade multiplex de imagem, em tempo real e capacidades de medição endpoint, e outros de alto rendimento atributos, tais como consumo de reagente, bem como diminuição nos tempos de ensaio. Além disso, a plataforma IRIS é simples de usar, requer equipamento barato, e utiliza silício baseados em componentes do ensaio em fase sólida tornando-o compatível com muitas abordagens contemporâneas de química de superfície.
Aqui, apresentamos o uso do sistema IRIS, desde a preparação de matrizes de sonda para incubação e medição de meta vinculativa para a análise dos resultados em formato de ponto de extremidade. O sistema modelo será a captura de anticorpos alvo, que são específicas para albumina sérica humana (HSA), em HSA-spotted substratos.
A plataforma IRIS é um sistema simples e rápido de usar para a recolha de high-throughput de ligação de dados em um formato de microarray. Por imobilizar covalentemente diferentes sondas funcionais de proteínas ou DNA em uma superfície antígenos alvo / biomarcadores / etc. podem ser capturados a partir de solução, como em um imunoensaio. Medição dessas interações entre as condições sonda em um terminal ou em tempo real formato com o sistema IRIS permite que a informação altamente sensível e quantitativos a serem coletados para cada interação. O experimento representante detalhado aqui é apenas um exemplo dos tipos de interações que podem ser estudados com esta técnica. Detecção de fatores de transcrição, os antígenos virais, vírus e todo tem sido demonstrado anteriormente e representa apenas alguns exemplos dos tipos de análises que o IRIS pode facilmente manipular.
The authors have nothing to disclose.
Os autores agradecem a Zoiray Technologies Inc., um parceiro co-patrocinador e comercialização, por seu apoio.