Summary

Subkutan Enfeksiyon Metisiline Dirençli Stafilokok Aureus (MRSA)

Published: February 09, 2011
doi:

Summary

Murin deri ve yumuşak doku enfeksiyonu modeli metisiline dirençli Staphylococcus aureus (MRSA) ve ev sahibi immünolojik yanıtlar virülans fonksiyonu değerlendirmek için kullanılmaktadır. Burada, biz, deri ve yumuşak doku enfeksiyonu için bir deri altı enfeksiyon modeli sundu.

Abstract

MRSA, halk sağlığı için dünya çapında bir bir tehdit ve MRSA deri ve yumuşak doku enfeksiyonları, şimdi Amerika Birleşik Devletleri'nde tüm yumuşak doku enfeksiyonları yarısından fazlasının hesabı. Yumuşak doku enfeksiyonları arasında, miyozit, pyomyositis ve nekrotizan fasiit giderek MRSA toplum kaynaklanan ilişkili olarak rapor edilmiştir. MRSA ve daha şiddetli enfeksiyonlara yol açan ev sahibi bağışıklık arasındaki etkileşimi anlamak için, host ve bakteriyel faktörler çalışma izin, hayvan modellerinde durumu kritik öneme sahiptir. S. patogenezinde değerlendirmek için birçok enfeksiyon modelleri tanıtıldı yüzeyel cilt enfeksiyonu sırasında aureus. Burada, deri, derialtı ve kas patolojileri inceleyen bir subkutan enfeksiyon modeli açıklanmaktadır.

Protocol

1. Enfeksiyon MRSA (Enfeksiyon önce iki Gün) Hazırlama Bir hisse senedi kültürünün bir kan agar (Triptikaz Soya Agar (TSA)) plaka MRSA loopful İnokülasyon. Kanlı agar plaka üzerinde hemoliz fenotip (her koloni etrafında açık bir bölge) kontrol edin. Diğer deneylerin tutarlı bir hemolitik fenotip bir koloni seçin. 15 ml snap-kapaklı tüp, tahsis antibiyotik gerektiğinde, 3 ml Todd Hewitt Broth (THB) koloni İnokülasyon. 37 ° ° C'de 220 rpm'…

Discussion

  1. Fare deri ve yumuşak doku enfeksiyonu modeli bir patojenin in vivo virülans değerlendirmesi için güçlü bir araçtır. S. patojenite aureus, deri ve yumuşak doku enfeksiyonu, bir takım parametreler bağlı olarak değişebilir . Bunlar inokulum büyüklüğü, bakteriyel büyüme aşamasında, aşılama derinliği, fareler yaş, ve farenin genetik arka plan 7, 8. Bu model kullanılarak virülans işlevini incelerken, sonuçları tutarlı olacağını sağlamak için bu parametreler…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Bu çalışma, Burroughs-Wellcome Kariyer Ödülü ve GY Liu Sağlık hibe AI074832 Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından desteklenmiştir.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
THB   VWR 95025-314  
DPBS   Invitrogen 21-031-CV  
1 ml syringe   BD 309602  
27G1/2 needle   BD 305109  
Sheep Blood Agar (TSA)   VWR 90004-328  

References

  1. Ahn, J. Y., Song, J. Y., Yun, Y. S., Jeong, G., Choi, I. S. Protection of Staphylococcus aureus-infected septic mice by suppression of early acute inflammation and enhanced antimicrobial activity by ginsan. FEMS Immunol Med Microbiol. 46, 187-197 (2006).
  2. Girish, V., Vijayalakshmi, A. Affordable image analysis using NIH Image/ImageJ. Indian J Cancer. 41, 47-47 (2004).
  3. Hahn, B. L., Onunkwo, C. C., Watts, C. J., Sohnle, P. G. Systemic dissemination and cutaneous damage in a mouse model of staphylococcal skin infections. Microb Pathog. 47, 16-23 (2009).
  4. Hruz, P., Zinkernagel, A. S., Jenikova, G., Botwin, G. J., Hugot, J. P., Karin, M., Nizet, V., Eckmann, L. NOD2 contributes to cutaneous defense against Staphylococcus aureus through alpha-toxin-dependent innate immune activation. Proc Natl Acad Sci U S A. 106, 12873-12878 (2009).
  5. Ji, Y., Zhang, B., Van, S. F., Horn, P. W. a. r. r. e. n., Woodnutt, G., Burnham, M. K., Rosenberg, M. Identification of critical staphylococcal genes using conditional phenotypes generated by antisense RNA. Science. 293, 2266-2269 (2001).
  6. Somerville, G. A., Beres, S. B., Fitzgerald, J. R., DeLeo, F. R., Cole, R. L., Hoff, J. S., Musser, J. M. In vitro serial passage of Staphylococcus aureus: changes in physiology, virulence factor production, and agr nucleotide sequence. J Bacteriol. 184, 1430-1437 (2002).
  7. Tseng, C. W., Kyme, P., Low, J., Rocha, M. A., Alsabeh, R., Miller, L. G., Otto, M., Arditi, M., Diep, B. A., Nizet, V., Doherty, T. M., Beenhouwer, D. O., Liu, G. Y. Staphylococcus aureus Panton-Valentine leukocidin contributes to inflammation and muscle tissue injury. PLoS One. 4, e6387-e6387 (2009).
  8. von Kockritz-Blickwede, M., Rohde, M., Oehmcke, S., Miller, L. S., Cheung, A. L., Herwald, H., Foster, S., Medina, E. Immunological mechanisms underlying the genetic predisposition to severe Staphylococcus aureus infection in the mouse model. Am J Pathol. 173, 1657-1668 (2008).

Play Video

Citer Cet Article
Tseng, C. W., Sanchez-Martinez, M., Arruda, A., Liu, G. Y. Subcutaneous Infection of Methicillin Resistant Staphylococcus Aureus (MRSA). J. Vis. Exp. (48), e2528, doi:10.3791/2528 (2011).

View Video