주파수 구성 요소를 사용하는 이온 채널 IV 곡선의 재현부

1. 소음 기능 및 입력 신호를 준비 원하는 주파수 구성 요소를 포함하는 노이즈 함수를 만듭니다. 이것은 주파수 영역에서 원하는 주파수 구성 요소를 설명하는 다음 역 고속 푸리에 변환을 계산하여 수행할 수 있습니다. 본 연구에서는 1 – 15 kHz에서 사용되었다. 모든 푸리에 변환이 연구에서 설명하는 역 푸리에 변환은 Matlab의 FFT 및 IFFT 함수를 사용하여 계산되었다. 적절하게 노이즈 함수의 진폭을 크기. 본 연구에서는 노이즈 함수는 노이즈 함수의 진폭을 최대로 제로가 50 또는 100 MV 것을 같은 크기를 조정했습니다. 사용중인 수집 소프트웨어에 대한 적절한 방법을 사용하여 자극 파일을 만듭니다. Clampex 8, 먼저 적당한 헤더와 텍스트 파일을 만듭니다. 머리글 아래의 첫 번째 열에 하나의 청소를위한 시간 증가를 삽입합니다. 시간 단위는 측정에 사용되는 샘플링 간격과 같은 시간적 간격이 있어야합니다. 전압 단계 프로토콜의 각 스위프 각 시간 단계에서 원하는 정확한 전압을 삽입합니다. 이것은 노이즈 함수를 포함해야합니다. 2. 전압 클램프 측정을 수행 이전에 생성된 자극 파일과 호환됩니다 수집 소프트웨어 내에서 측정 프로토콜을 만듭니다. Clampex에서는 사용자가 현재 프로토콜 자극 파일을 연결할 수있는 메뉴가 있습니다. 측정 장비에 세포 모델 (또는 생물학) 연결합니다. 예정대로 실험을 수행합니다. 제어 목적을 위해, 모든 노이즈 함수를 포함하지 정기적인 측정을 포함해야합니다. 3. 포스트 실험 분석 개인 기록에 대한 IV 곡선을 계산합니다. 녹음이 노이즈 기능이 적용되어 안정적인 상태에있는 경우, IV 곡선은 temporally 노이즈 함수의 범위 밖 녹음의 안정 상태 부분을 사용하여 만들 수 있습니다. 녹음이 안정 상태에 있지 않은 경우, 소음 기능이 IV 곡선의 계산을 방해할 수있는 두 번째 녹음이 존재하는 노이즈 기능없이해야한다. 녹음의 각 전압 단계에 대한 고속 푸리에 노이즈 함수를 삽입했던 녹음 부분의 변환을 계산합니다. amxn m는 FFT의 주파수의 숫자 매트릭스, 그리고 N으로 각 전압 단계에 대한 푸리에 변환을 결합하는 것은 전압 단계의 번호입니다. 이 구성에서는 행렬의 각 행이 실험의 모든 전압 단계에서 단일 주파수의 진폭을 나타냅니다. 각 주파수 (위의 행렬의 각 행이 IE) 3.1에서 생성된 IV 곡선으로 행을 상관 관계 및 상관 계수를 기록합니다. 높은 IV 커브와 연관 주파수를 시각화하기 위해 상관 계수 대 주파수를 플롯. DC 구성 요소는 FFT의 첫 번째 주파수에 포함된이므로이 주파수에 대한 상관 계수는 항상> 0.99되어야합니다. 4. 대표 결과 : 대표 전압 클램프 측정은하지 않고 (그림 1A) 및 전압 단계 프로토콜에 삽입 (그림 1B) 노이즈 기능 모델 셀에 표시됩니다. IV 곡선도 모델 세포 (그림 1C)를 계산했습니다. 각 스위프 들어, 그림 1에서 기록에서 FFT는 노이즈 함수를 삽입했던 시간 프레임 (그림 1A, 1B에 빨간색 상자 참조)를 통해 계산되었다. 그림 2A와 2B는 각각 그림 1A와 1B에 표시된 레코딩 계산 FFTs를 보여줍니다. 육안 검사시 DC 구성 요소 (빨간색으로 강조) IV 곡선의 모양을 모방하기 위해 나타납니다. 소음없는 함수, DC 위의 모든 주파수가 제로 (그림 2A) 근처 amplitudes을 가지고 나타납니다. 노이즈 함수가 삽입되면, 1 kHz에서 15 사이의 주파수는 시각적으로 눈에 띄는 amplitudes (그림 2B)를했습니다. 그림 3은 IV 곡선에 대한 전압 단계의 범위 개별 주파수 amplitudes을 연관의 결과를 보여줍니다. 그림 3A – C는 실험이 제어 조건 (없음 소음 기능)에 따라 각각 50과 100 뮤직 비디오의 노이즈 amplitudes와 함께 끝났다고 상관 계수를 보여줍니다. 모든 경우에 공지 사항, DC 구성 요소는 IV 곡선과 거의 완벽하게 연관시키는가 나타납니다. 사실, 모든 레코딩을 위해,이 주파수에 대한 상관 계수는 0.99 (R = 0.9996 ± 1E – 5, 말은 ± 표준 편차)보다되었습니다. 우리가 그림 3A (제어 조건)에 보면, 진폭 크게 IV 커브와 상호 DC 구성 요소 이외에는 주파수가 없습니다. 특히,이 주파수의 아무도는 0.5 이상의 상관 계수가 없습니다. 가장 낮은 진폭 노이즈 기능 (50 뮤직 비디오) 삽입시이 같은 주파수는 아직 0.5 이상의 상관 계수가 덜했다. 에 대한 상관 계수노이즈 진폭 100 뮤직 비디오로 증가되었을 때 SE 주파수는 0.5보다 큰이 없어요. . 그림 1 모델 셀 레코딩 : 전압 클램프 레코딩을하지 않고 (1A) 및 전압 단계 프로토콜에 포함 (1B) 노이즈 기능 모델 셀에 표시됩니다. 각 스위프의 첫 번째와 지난 20 MS에 대한, 가능성이 개최 가능성 (0 MV)에서 유지되었다. 각 전압 단계 80 MS 길이었고, 소음 기능 단계의 시작 후 40 MS를 삽입했습니다. 노이즈 함수는 30 MS의 기간을했다 1 15 kHz에서 사이의 주파수가 포함되어 있습니다. 전압이 서있는 다섯 MV 단위 -150에 50 MV를 강화했다. 모델 세포에 대한 IV 곡선도 (1C) 표시됩니다. 읽기 레코딩을보다 쉽게​​하기 위해, 오직 모든 다섯째 청소는 1A 및 1B에 포함되었지만, 모든 감시 장치는 1C에 포함되었습니다. 그림 2 레코딩 FFT :. FFT는 노이즈 함수 (그림 1A에 빨간색 상자 1B에 묶여 지역) 삽입하기 위해 각 스위프의 30 MS 부분에 대한 계산했다. 그림 2A와 2B는 FFTs가 각각 소음 기능없이 함께 계산 보여줍니다. 다시 한번, 명확성을 위해, 모든 다섯째 수색에서만 FFT는 그림에 포함되어 있지만, 모든 감시 장치는 앞으로 계산에 사용되었다. . 그림 3 IV 주파수 상관 관계 : 녹음의 IV 곡선 및 전압 단계의 범위에서 각각의 주파수의 진폭 사이의 상관 관계의 결과가 표시됩니다. 그림 1A – 1C는 각각 제어 조건 하에서 0에서 20 kHz에서하는 주파수에 대한 50 또는 100 MV 노이즈 기능의 존재의 상관 계수를 보여줍니다. 그림 4 IV 곡선의 재 창조 :. 모델 세포 (그림 1C와 같음) 두 주파수의 크기에 대한 IV 곡선이 겹쳐 있었다. 첫 번째 주파수는 DC 성분 (R = 0.995)이었고, 두 번째는 낮은 상관 관계 (R = 0.3212)으로 무작위로 선택된 주파수했다. 주파수 amplitudes는 IV 곡선으로 거의 같은 진폭을 축소했다.