Organbetingat medium: Generera medium från skördade organceller för metastaserade cancerstudier
Published: April 30, 2023
Abstract
Källa: Piaseczny, M.M., m.fl. Generation av organbetingade medier och applikationer för studier av organspecifika influenser på bröstcancermetastatiskt beteende. J. Vis. Exp.(2016).
Denna video beskriver en metod för att generera ett organ konditionerat medium härrör från mus levern. Detta modellsystem kan användas för att identifiera och studera organbaserade lösliga faktorer och deras effekter på cancercellernas organtropism och metastaserande beteende.
Protocol
1. Generering av lung- och hjärnbetingade medier I en steril vävnadskulturhuv, invertera PBS-rör som innehåller lungor eller hjärna tre gånger för att avlägsna kvarvarande blod från organ och aspirera PBS som innehåller blod. Upprepa med färsk kall PBS tills lösningen verkar klar utan tecken på blod. Placera lungor och hjärnor i separata 60 mm2 glas petriskålar. Använd två sterila skalpellblad, köttfärslungor eller hjärnor genom att upprepade gånger skära fram oc…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 1x Phosphate-buffered saline | ThermoFisher Scientific | 10010-023 | Keep sterile |
| 60 mm2 glass petri dishes | Sigma-Aldrich | CLS7016560 | Keep sterile |
| DMEM:F12 | Life Technologies | 21331-020 | Warm in 37 °C water bath before use, keep sterile |
| Penicillin-Streptomycin (10,000 U/ ml) | Life Technologies | 15140-122 | Keep sterile |
| 50 ml conical tubes | Thermo Scientific (Nunc) | 339652 | Keep sterile |
| 0.22 μm syringe filters | Sigma-Aldrich | Z359904 | Keep sterile |
| 6-well tissue culture plates | Thermo Scientific (Nunc) | 140675 | Keep sterile |
| Scalpel blades | Fisher Scientific | S95937A | Keep sterile |
Citer Cet Article
Organ Conditioned Medium: Generating Medium from Harvested Organ Cells for Metastatic Cancer Studies. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20218, doi: (2023).