Organ konditioneret Medium: Generering Medium fra høstede organceller til metastatisk cancer undersøgelser
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Piaseczny, M.M., et al. Generation of Organ-conditioned Media and Applications for Studying Organ-specific Influences on Breast Cancer Metastatic Behavior. J. Vis. Exp.(2016).
Denne video beskriver en metode til at generere et organ konditioneret medium afledt af museleveren. Dette modelsystem kan bruges til at identificere og studere organ-afledte opløselige faktorer og deres virkninger på organtropisme og metastatisk adfærd kræftceller.
Protocol
1. Generation af lunge- og hjernebetingede medier I en steril vævskultur hætte, invertere PBS rør, der indeholder lunge eller hjerne tre gange for at fjerne resterende blod fra organer og indsugning PBS indeholder blod. Gentag med frisk kold PBS, indtil opløsningen fremstår klar uden tegn på blod. Placer lunger og hjerner i separate 60 mm2 glas petriskåle. Ved hjælp af to sterile skalpelblade, hakkekød lunger eller hjerner ved gentagne gange udskæring frem og tilbage, indtil…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 1x Phosphate-buffered saline | ThermoFisher Scientific | 10010-023 | Keep sterile |
| 60 mm2 glass petri dishes | Sigma-Aldrich | CLS7016560 | Keep sterile |
| DMEM:F12 | Life Technologies | 21331-020 | Warm in 37 °C water bath before use, keep sterile |
| Penicillin-Streptomycin (10,000 U/ ml) | Life Technologies | 15140-122 | Keep sterile |
| 50 ml conical tubes | Thermo Scientific (Nunc) | 339652 | Keep sterile |
| 0.22 μm syringe filters | Sigma-Aldrich | Z359904 | Keep sterile |
| 6-well tissue culture plates | Thermo Scientific (Nunc) | 140675 | Keep sterile |
| Scalpel blades | Fisher Scientific | S95937A | Keep sterile |
Citer Cet Article
Organ Conditioned Medium: Generating Medium from Harvested Organ Cells for Metastatic Cancer Studies. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20218, doi: (2023).