أجار تصاعد: طريقة أساسية لتركيب الأجنة حمار وحشي لايف للتصوير على المدى الطويل
Published: April 30, 2023
Abstract
المصدر: هاجيدورن إ. ج. وآخرون. جيل من أجنة حمار وحشي البارابيوتيك عن طريق الانصهار الجراحي لتطوير Blastulae. ج. فيس إكسب. (2016).
يصف هذا الفيديو تعليمات خطوة بخطوة حول تركيب أجنة حمار وحشي حية على 6 لوحة بئر باستخدام agarose منخفض الذوبان. كما يوفر عملية الحصول على صور الأجنة الحية وتحليلها باستخدام البرمجيات.
Protocol
1. إعداد المجهر ، الحصول على الصورة ، والمعالجة والتحليل إعداد 0.8٪ نقطة انصهار منخفضة (LMP) agarose: إضافة 0.8 غرام LMP agarose إلى 100 مل E3 والحرارة حتى يذوب تماما. في حين الساخنة، aliquot 1 مل من Agarose LMP في أنابيب ميكروفوج 1.5 مل في كتلة التدفئة 37 درجة مئوية. سيبقى Agarose LMP منصهرا عند 37 درجة مئوية. إض…
Materials
| LMP agarose (Ultrapure LMP agarose) | Invitrogen | 16520100 |
| Tricaine (powder) (Tricaine Methanesulfonato, Tricaine-S) | Western Chemical Inc | MS 222 |
| Glass-bottom 6-well plates used for imaging | MatTek | P06G1.5-20-F |
| 10 ml pipette pump (green) (Pipette Pump Pipettor) | Novatech International | F37898-0000 |
Citer Cet Article
Agar Mounting: A Basic Method of Mounting Live Zebrafish Embryos for Long-Term Imaging. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20187, doi: (2023).