Estrazione del DNA dalla clip di coda: un metodo utilizzato nel genotipizzazione del pesce zebra
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Xing L., et al. Genotipizzazione zebrafish rapida ed efficiente con PCR con analisi di fusione ad alta risoluzione. J. Vis. Exp. (2014).
Questo articolo descrive l’estrazione del DNA dalla clip di coda zebrafish. Il protocollo dimostra un metodo rapido ed efficiente per analizzare i genotipi zebrafish.
Protocol
1. Preparazione del DNA Preparare il tampone dilisi del DNA: 50 mM KCl, 10 mM Tris-HCl pH 8.3, 0.3% Tween 20, 0.3% NP40. Aggiungere proteinasi K fresca ad una concentrazione finale di 1 mg/ml il giorno dell’uso. Raccolta dei tessuti: Per clip di pinne di pesce adulto: Anestetizzare il pesce: Mettere il pesce in soluzione 0,004% MS-222 (tricaina). Aspetta che il movimento branchiali rallenti. Metti il pesce su una pila di 5-10 Kimwipes e taglia un piccolo pezzo di pinna caud…
Materials
| 100 Reaction LightScanner Master Mix | BioFire | HRLS-ASY-0002 | www.biofiredx.com |
| Tricaine | |||
| Paraformaldehyde |
Citer Cet Article
DNA Extraction from Tail Clip: A Method Used in Zebrafish Genotyping. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20184, doi: (2023).